肌肽對高糖引起的HUVECs 細胞損傷的保護作用

莊旭東 師 巖

糖尿病血管并發(fā)癥是糖尿病常見的并發(fā)癥之一，且發(fā)生早、預后差、病死率高，其引發(fā)的心腦血管疾病是糖尿病患者致死致殘的主要原因，約占糖尿病患者死亡原因的60% ～70%［1］。如何有效保護血管內(nèi)皮細胞，成為防治糖尿病血管并發(fā)癥的關鍵［2］。2004年，美國糖尿病學會提出糖尿病及其血管并發(fā)癥都有統(tǒng)一的發(fā)病機制，即高血糖引起的氧化應激損傷、氧化應激致使大量氧自由基及活性氧直接損傷血管內(nèi)皮細胞，引起細胞凋亡，最終表現(xiàn)為內(nèi)皮細胞功能障礙［3］。因此抗氧化治療成為防治糖尿病血管病變的一個有效途徑。研究顯示，肌肽作為一種內(nèi)源性的抗氧化劑，它具有水溶性好、性質(zhì)穩(wěn)定、分子質(zhì)量低、易于被機體利用等優(yōu)點［4］。本實驗以體外培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細胞為對象，建立高糖誘導的細胞損傷模型，觀察肌肽能否減弱高糖誘導的人臍靜脈內(nèi)皮細胞損傷，為肌肽在防治糖尿病血管并發(fā)癥方面提供理論依據(jù)。

材料與方法

1.實驗材料:人臍靜脈內(nèi)皮細胞HUVECs 本實驗室保存(中國醫(yī)學科學院基礎醫(yī)學研究所基礎醫(yī)學細胞中心);肌肽(美國Sigma 公司);胎牛血清(Hyclone，美國);0.25%胰酶-0.02%EDTA(吉諾生物醫(yī)藥技術(shù)有限公司);DMEM 培養(yǎng)基(美國Gibco 公司);丙二醛(MDA)、乳酸脫氫酶(LDH)檢測試劑盒檢測試劑盒和超氧化物歧化酶(SOD)檢測試劑盒(南京建成生物工程研究所);caspase -3 活性檢測試劑盒(南京凱基生物公司)。

2.實驗方法:(1)人臍靜脈內(nèi)皮細胞HUVECs 常規(guī)培養(yǎng)在含10%胎牛血清的DMEM 培養(yǎng)液中，于37℃、5% CO2條件下培養(yǎng)?！?br>