吳靜芳 魏 星 裘華森
1浙江醫院外科 杭州 310006 2浙江省中醫院外科
術后腸麻痹是外科術后常見并發癥,其具體發病機制尚未明確,一直缺乏特異有效的治療手段。近年來,中醫藥促術后胃腸動力有較好的臨床療效,是該領域的研究熱點之一。我們采用電針針刺大鼠足三里及上巨虛穴對大鼠腹部術后腸麻痹進行治療,觀察墨汁推進率和血清胃動素(motilin,MTL)水平,探討電針治療對大鼠腹部術后腸動力的影響。
1.1 動 物 健康清潔級SD雄性大鼠56只,浙江中醫藥大學動物實驗中心提供。合格證號:SCXK(滬)2008-0016,購自上海山西普爾-必凱實驗動物有限公司。
1.2 實驗試劑 大鼠胃動素(MTL)ELISA試劑盒(南京建成生物工程研究所,批號20101130);10%水合氯醛、生理鹽水、75%酒精(浙江省中醫院);10%水合氯醛(批號090909);10%EdTA 二鈉、95%酒精、明膠、活性炭粉(浙江中醫藥大學分子生物學遺傳學實驗室提供,購于杭州微生物試劑有限公司);10%EdTA二鈉產品(批號12811531216)。
1.3.1 動物分組 取健康清潔級SD大鼠72只,通過隨機數字表法隨機分為模型組、電針組、假手術組,每組24只,各組按照隨機原則再分為24、72、120h組,每組各8只。
1.3.2 動物模型制備[1]術前24h各組大鼠禁食,自由飲水。在無菌操作下,取腹部正中切口打開腹腔,將小腸翻向左側,置于生理鹽水浸濕的紗布上,用生理鹽水浸濕的捋腸器沿小腸的長軸自十二指腸直至回盲部推擠,力量以剛好推動腸內容物為宜,模擬臨床上常見的全小腸探查操作。假手術組僅行開腹翻腸不進行推擠操作。然后將小腸按順序還納,腹腔內灑少量溫生理鹽水,雙層連續縫合關閉腹腔。手術后,大鼠均置于暖燈下保溫。模型組和電針組大鼠手術時間均在10min左右,差異無統計學意義(P>0.05)。
1.3.3 治療方法 電針組:根據《實驗針灸學》[2]造模成功后2h于大鼠后肢雙側取足三里及上巨虛穴,直刺,進針深度5mm左右,捻轉有緊滯感后針柄接電針治療儀,右側接正極,左側接負極。刺激參數:疏密波(疏波 4Hz,密波 50Hz),強度定于該治療儀“1”檔左右,以大鼠雙下肢輕微抖動為宜。留針30min,1天2次,至觀察結束。
1.3.4 墨汁灌胃 采用墨汁計算小腸推進率,各組大鼠在各觀察時間點用灌胃針給予墨汁灌胃(0.5mL/只)。
1.3.5 觀察指標及檢測方法 ①血清MTL:灌胃后30min脫頸處死,開腹,從下腔靜脈采血1mL,置于含30μL 10%EDTA二鈉的1.5mL離心管中混勻,4℃下在離心機中離心15min(3500r/min),用微量移液器取血清置于另一1.5mL離心管中,置于-20℃冰箱保存。用ELISA法測血清中MTL含量。②小腸墨汁推進率:灌胃后30min脫頸處死。打開腹腔分離腸系膜,剪取上端自幽門、下端至回盲部的腸管,置于托盤上,輕輕將小腸拉成直線。測量腸管長度為“小腸總長度”,從幽門至墨汁前沿為“墨汁推進長度”。墨汁推進率計算公式[2-3]:墨汁推進長度(cm)/小腸總長度(cm)×100%。
1.4 統計學方法 應用SPSS17.0軟件進行統計分析。計量資料用(x±s) 表示,計量資料的多個樣本均數比較采用單因素方差分析(One-Way ANOVA)(若方差齊性,則采用LSd法;若方差不齊,則采用Tamhane,sT2法);計數資料的多個樣本均數比較采用非參數法(Nonparame-tric Tests-2 Independent Samples),P<0.05表示差異有統計學意義。模后 24、72h時間點明顯低于假手術組(P<0.01),在120h點兩組比較差異無統計學意義(P>0.05)。電針組24、72h時間點明顯低于假手術組(P<0.05,P<0.01),120h點兩組比較差異無統計學意義(P>0.05)。電針組72h點明顯高于模型組(P<0.05),其余時間點兩組比較差異無統計學意義(P>0.05)。電針組墨汁推進率隨著時間的延長而增加,72、120h優于24h(P<0.01),120h 又優于 72h(P<0.05)。見表 1。

表1 三組大鼠小腸墨汁推進率比較(x±s) %
2.2 三組血清MTL比較 模型組血清MTL含量24、72h點明顯低于假手術組,差異有統計學意義(P<0.01),120h點也低于假手術組(P<0.05)。電針組24h點低于假手術組(P<0.05),其余時間點兩組比較差異無統計學意義(P>0.05)。電針組72h和120h點明顯高于模型組(P<0.01,P<0.05),24h 點兩組比較差異無統計學意義(P>0.05)。電針組血清MTL含量隨著時間的延長而增加,72、120h明顯高于24h(P<0.05)。72h與120h比較差異無統計學意義(P>0.05)。見表2。

表2 三組血清MTL比較(x±s) ng/L
2.1 三組墨汁推進率比較 模型組墨汁推進率在造
術后腸麻痹是外科術后、特別是腹部手術后常見的但目前尚無法避免的臨床難題。其臨床表現主要為腹痛、腹脹、肛門停止排氣排便、腸鳴音減弱或消失,嚴重者可致術后腸管積液擴張,菌群失調移位,導致吻合口瘺、切口裂開、甚至多器官功能衰竭等嚴重并發癥,延長患者住院時間和增加住院費用。Kraft[3]報道美國因術后胃腸功能障礙每年需花費14.7億美元。隨著快速康復外科的廣泛開展,目前多數學者已認識到,術后腸麻痹是影響患者術后康復的核心環節,早期干預對其進行預防和治療尤為重要[4]。
現代醫學認識到術后胃腸動力的重要性,主要從完善術前準備、提高手術技術以減少創傷和刺激、術后胃腸減壓和維持電解質平衡等措施加以預防,但是缺乏主動干預促進術后胃腸動力快速恢復的方法。大量臨床與實驗研究證實[5],中醫藥應用對術后胃腸功能的快速恢復具有優勢。
中醫認為,胃腸運動功能與脾胃氣機的升降傳輸密切相關。腹部手術擾亂了體內正常的氣機運行,且損耗胃腸氣血,臟器失于疏泄,脾胃失于運化。針刺調整胃腸功能療效良好,且操作方便,不受禁食的影響,不必改變體位。取四肢遠端穴位治療,通過刺激經絡穴位而激發機體潛在的自我調節機能,促進胃腸蠕動恢復。足三里穴有全身性強壯作用,能“理脾胃”、“和腸道消滯”、“通調經絡氣面”,為臨床治療腹腔內臟病的要穴,以“肚腹三里留”著稱。上巨虛調和腸胃,行氣化瘀,常用于腹痛、腹脹、痢疾、便秘、腸痛等。兩穴用于術后腸麻痹治療,有較好的臨床療效[6]。
墨汁推進率是反映大鼠腸蠕動功能的一個最客觀、直接的指標。本實驗結果顯示,各時間點模型組墨汁推進率明顯低于模型組,提示模擬臨床上常見的全小腸探查操作,對小腸行推擠操作確實能抑制腸蠕動,成功制備術后腸麻痹模型。術后針刺72h小腸推進率較模型組明顯提高,顯示大鼠術后電針刺激在術后3天體現最佳療效。
MTL與胃腸平滑肌細胞上受體有著高度的親和力,能夠刺激上消化道的機械運動和生理性肌電活動的作用[7]。手術創傷可刺激體內兒茶酚胺的分泌,兒茶酚胺可通過抑制MTL和胃泌素的分泌而影響胃腸功能,低水平的MTL和胃泌素可直接導致術后胃腸功能紊亂,動力減弱。本實驗結果表明,電針組術后72、120h血清MTL水平較模型組明顯提高(P<0.05,P<0.01),而在 24h 時間點并無明顯差異,可見電針治療術后腸麻痹起效時間在術后3天,并有一定的持續改善作用。
總之,電針治療術后腸麻痹具有顯著的臨床療效,但其作用機制并不明確,值得進一步研究。
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