標本血量不足對凝血酶原時間及活化部分凝血活酶時間檢測結果的影響＊

徐 菡，邸 平，夏全成，馬駿龍，王成彬（解放軍總醫院臨床檢驗科，北京 100853）

凝血酶原時間（PT）、活化部分凝血活酶時間（APTT）檢測是臨床常用的血栓與止血篩查試驗，是術前篩查凝血系統疾病、觀察抗凝劑用量、出血性疾病或血栓性疾病的重要項目［1］。血凝檢測影響因素很多，如標本運送、離心速度、檢測時間；試劑的使用、復溶、預溫及儲存；藥物使用、監控、參考范圍的確定；檢驗人員的熟練程度、是否正規操作等諸多因素都會導致檢測結果誤差。本文主要針對凝血標本的血液與抗凝劑比例對試驗結果的影響進行研究。作者調研解放軍總醫院近兩年采集量不合格凝血標本后，發現98%的不合格標本屬采血量不足，故本文重點研究標本采血量不足對PT、APTT結果的影響，現報道如下。

1 材料與方法

1．1 儀器和試劑 STA－R全自動凝血分析儀（STAGO，法國）及配套試劑。

1．2 標本選擇 挑選2013年1～12月血量不足的枸櫞酸鈉抗凝標本58例，由抽血管上的刻度將血量不合格標本按血量與抗凝劑比例分為8∶1（n＝28），7∶1（n＝30）兩組；再分別按正常比例（血量與抗凝劑比例為9∶1）采血，設為上述兩組的對照組即8∶1對照組和7∶1對照組。兩次采血之間患者未進行治療。選取血細胞比容（HCT）在20%～55%的標本，要求離心后無溶血、脂血及黃疸。采血要求用塑料或硅化注射器，止血帶壓迫不超過3min，采血順利，枸櫞酸鈉0．3mL抗凝。

1．3 標本檢測 標本采集后2h內進行檢測前處理，3 000r／min，離心10min。儀器在檢測標本前經STAGO公司檢定運行良好且測試當日正常、異常質控均在控；試劑于2～8℃存放，現用現配，按要求室溫靜置后，上機前輕輕搖勻，PT試劑按要求使用磁力攪拌棒使試劑使用期間保持懸濁液狀態。

1．4 統計學方法 所有資料采用SPSS17．0軟件進行統計分析，計量資料用s表示，組間采用配對t檢驗，P＜0．05為差異有統計學意義。

2 結 果

2．1 8 ∶1組患者PT、APTT檢測結果 8∶1對照組PT（13．70±2．95）s，抗凝劑比例8∶1組 PT（13．80±2．94）s，兩組結果差異無統計學意義（P＞0．05）；8∶1對照組 APTT（38．00±3．75）s，抗凝劑比例8∶1組 APTT（39．90±3．89）s，兩組差異有統計學意義（P＜0．05）。

2．2 7 ∶1組患者PT、APTT檢測結果 7∶1對照組PT（13．3±2．98）s，抗凝劑比例7∶1組PT（15．9±3．4）s，兩組結果差異有統計學意義（P＜0．05）；7∶1對照組 APTT（38．3±4．46）s，抗凝劑比例7∶1組 APTT（41．6±4．66）s，兩組結果差異有統計學意義（P＜0．05）。

2．3 從試驗結果可以看出，APTT在血液和抗凝劑比例為8∶1時，對結果有影響；PT在血液和抗凝劑比例為7∶1時，對結果有影響；所以在血液與抗凝劑比例為8∶1時，PT結果能作為臨床參考。

3 討 論

血液凝固是一個復雜的過程，凝血功能檢測標本采用濃度為109mmol／L的枸櫞酸鈉抗凝，臨床采集方法要求枸櫞酸鈉與全血比例為1∶9，抗凝劑過多會造成血液稀釋，影響檢測結果的準確性［2］。抗凝劑與血的比例是基于 HCT（0．45±0．05），血漿（0．55±0．05）這一基礎，實質是抗凝劑與血漿的比例為1∶5，當HCT超出或低于正常范圍時，應用計算公式隨時調整抗凝劑的用量，以保證抗凝劑在血漿中的絕對含量不變。公式如下：抗凝劑用量（mL）＝0．001 85×全血量（mL）×（1－HCT%）［3］。當血量為2．7mL時，枸櫞酸鈉和鈣離子比例恰當，鈣離子完全被枸櫞酸鈉絡合封閉，凝血過程被阻斷；當血量不足2．7mL時，枸櫞酸鈉則過量，但測定PT、APTT所加入的鈣離子是定量的，測定時過量的枸櫞酸鈉絡合了部分加入的鈣離子，造成凝血過程中鈣離子不足，導致PT、APTT結果延長。

血液標本的采集和檢驗分別由護理和檢驗兩個不同學科人員完成，標本采集由臨床護士完成，檢驗前由檢驗人員按檢驗專業標準判斷標本質量是否合格［4］。標本質量是保證檢驗結果準確性的重要前提，如果標本采集不合格，即使使用最先進的儀器設備，有最高的檢驗技術水平，也不能彌補標本質量不合格造成的誤差和錯誤［5］。在ISO15189文件中，這屬于分析前質量管理［6］。分析前質量即是指從臨床醫生開出醫囑開始，到分析檢驗程序啟動。此流程是實驗室質量保證體系中最重要、最關鍵的環節之一。據報道，臨床反饋不準確的檢驗結果，最終80%可溯源至實驗分析前程序的不規范，而最重要的則為標本采集的不規范、不準確［7］。分析前質量管理工作由臨床醫生、護士、衛生員在醫學實驗室以外完成，檢驗科工作人員很難控制，而標本的質量又是檢驗結果準確的基礎。因此，必須高度重視分析前質量控制工作，如果沒有一份準確的抽血樣本，就不能獲得可信的檢測結果，這一關鍵問題應當受到臨床醫務人員的重視［8］。檢驗分析前質量控制是國內外醫學實驗室管理的熱點，是我國質量管理最薄弱的環節，最易出現問題，是潛在因素最多、最難控制的環節。該環節直接影響試驗結果的準確性，甚至導致臨床誤診，延誤病情。凝血四項檢測結果的準確性也與這些分析前因素密切相關。本院2012年3月至2013年10月共有270 000份送檢標本做凝血四項測定，其中不合格標本1 080例，占0．4%，其中采血量不足標本623例。作者通過試驗結果證實，要保證凝血試驗結果的準確性，標本采集的準確度是一個不容忽視的問題。因此檢驗科應聯合護理部門對護士進行培訓，使其做到熟練掌握靜脈穿刺、各種真空采血管的正確使用及標本處理的標準程序等技能，認識護理工作對確保檢驗質量的重要性，確立提高醫療質量的服務理念。應把它作為檢驗科重要的工作內容，這也是全面管理質量管理的關鍵環節。但對分析前階段的質量控制，只有通過科室之間互相學習與溝通，正確、規范化采集標本，做好各項環節的質量保證措施，才能提高分析前階段的質量控制水平，使檢驗結果能正確、可靠、真實［9－10］。

綜上所述，分析前質量控制是關系檢測結果是否忠實反映患者情況的重要因素，而臨床護士抽血量是否準確又是分析前質量控制的重要環節。凝血功能檢測對1∶9抗凝比例要求非常嚴格，血量過少會對結果尤其是APTT造成極大的影響。因此，抽血時務必要求精確定量至3mL以保證結果的可靠性。

［1］ 叢玉隆，王金良，李曉軍，等．實用檢驗醫學［M］．北京：人民衛生出版社，2009．

［2］ 陳永玲，袁琳，王昌富．影響PT、aPTT測定結果的實驗前樣本因素［J］．血栓與止血學，2006，12（1）：37－38．

［3］ 楊繼明，張愛華，肖中華，等．標本采集量對凝血項目檢測結果的影響［J］．實驗與檢驗醫學，2011，29（1）：75．

［4］ 容桂榮，張萍萍，趙立民，等．血液標本采集與運送的質量控制現狀［J］．中華護理雜志，2008，43（7）：645－647．

［5］ 金嵐，陳倩，吳慕琳，等．門診抽血室與檢驗科互動式溝通對標本質量的影響［J］．中國醫藥導報，2013，10（7）：138－140．

［6］ 叢玉隆，張海鵬，任珍群．血液學檢驗分析前質量控制的重要因素－－標本的采取及其控制［J］．中華醫學檢驗雜志，1998，21（1）：51－54．

［7］ 孟冬婭，薛文成，胡曉芳．從護理角度提高檢驗質量的分析前變異控制［J］．解放軍護理雜志，2002，19（3）：49－50．

［8］ 郭光輝，束振華．影響凝血四項測定結果的分析前因素［J］．海南醫學，2010，21（24）：108－109．

［9］ 王巧兵．血凝檢測結果影響因素的分析［J］．中國現代醫生，2010，48（12）：83．

［10］季明德，郭長青，梁鑫．抽取血液量減少時對凝血酶原時間檢測結果的影響［J］．醫學檢驗與臨床，2008，19（2）：66－67．