血清sRAGE在帕金森病中的表達及其臨床意義

摘要：目的 探討血清sRAGE在帕金森病（Parkinson Disease，PD）中的表達及其臨床意義。方法 采用雙抗體夾心ELISA法測定PD組患者與對照組（同期健康體檢者）血清中sRAGE的含量并進行比較，每組各100例。結果 PD組血清sRAGE水平（767.43±18.20） pg/ml低于健康對照組（792.77±41.47） pg/ml，差異有統計學意義（P<0.01）。PD患者不同嚴重程度組間血清sRAGE水平，由輕到重sRAGE水平呈下降趨勢，但組間差異無統計學意義（P>0.05）。相同年齡段間PD組與健康對照組血中sRAGE表達水平比較，50～60歲和60～70歲年齡段兩組間差異有統計意義（P<0.01）。結論 PD組血清中sRAGE水平明顯低于健康對照組，特別在50～70歲年齡段，且其水平與PD嚴重程度無明顯相關性，推測sRAGE可能通過競爭結合晚期糖基化終產物受體（RAGE）的配體減弱后者的病理作用，可能在PD中起潛在保護作用。

關鍵詞：PD；血清sRAGE；ELISA

PD是一種以黑質紋狀體通路退行性變為主要特征的神經系統變性疾病，發病具體機制仍不明確。RAGE已被發現與神經系統變性病、糖尿病等多種疾病有關，而sRAGE是近年發現存在于循環系統中的剪接變異體。通過與RAGE競爭結合配體，中和后者病理作用。大量的研究資料表明，sRAGE在阿爾茨海默病、肌萎縮側索硬化癥、朊蛋白病、亨廷頓病等神經系統變性病患者血清中表達下降，推測其可能有助于保護神經細胞和延緩病情進展。而sRAGE與PD關系國內外進行研究較少。

1 資料與方法

1.1一般資料 PD組100例為2009年6月～2013年7月我院收治的PD患者。其中男57例，女43例，平均年齡（65±8.63）歲，平均病程（2.4±1.2）年。經篩選合格的PD患者進行改良Webster評分法，根據PD患者的面部表情、坐位起立、言語、步態、運動障礙、上肢伴隨運動、震顫、生活自理、肌強直、姿勢等十項評分（每項0～3分），按總分將PD組分成三組：輕度組（0～10分，26例），中度組（11～20分，44例），重度組（21～30分，30例）。選擇同期體檢健康者100例作為對照組，其中男57例，女43例，平均年齡（64±8.91）歲。兩組對象年齡和性別差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。

1.2方法 取外周靜脈血4ml，置于含有抑肽酶的EDTA抗凝管中，以3000 r/min離心15min，提取血清后于-80℃儲存待測。按照試劑盒說明書采用雙抗體夾心ELISA法檢測。sRAGE試劑盒購自北京愛迪博生物科技有限公司，低速自動平衡離心機、酶標儀和洗板機均為美國B10-RAD公司生產。

1.3統計學方法 采用SPSS 17.0軟件進行統計學處理，計量資料以均數±標準差（x±s）表示，組間比較采用獨立樣本t檢驗或單因素方差分析。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 PD組和對照組sRAGE表達水平的比較 PD組患者外周血sRAGE表達水平平均為（767.43±18.20）pg/ml，明顯低于對照組（792.77±41.47）Pg/ml，兩組比較差異有統計學意義（P<0.01）。

2.2不同嚴重程度PD患者組間sRAGE表達水平的比較 輕度到重度PD患者的sRAGE水平呈下降趨勢，但組間比較差異無統計學意義（P>0.05），見表1。

2.3相同年齡段PD組與對照組sRAGE表達水平比較 50～60歲和60～70歲年齡段的PD患者sRAGE表達水平明顯低于對照組，兩組比較差異有統計學意義（P<0.01），見表2。

3 討論

sRAGE是RAGE的內源分泌型剪接變異體。內皮細胞可能是sRAGE的主要來源。sRAGE主要由1個V型免疫球蛋白樣區和2個C型免疫球蛋白樣區組成，尤其V區是sRAGE與配體結合的關鍵部位。sRAGE包含配體結合區但缺乏跨膜區和胞內段，因此能與配體結合但不能產生信號途徑，不能介導生物學效應。近年實驗證實在阿爾茨海默病患者腦中，A口與小膠質細胞的RAGE結合，促使小膠質細胞向淀粉樣斑塊遷移、增殖，激活NF-κB并分泌巨噬細胞集落刺激因子（M-CSF），引起炎癥反應。通過對早期患者血清檢測發現sRAGE表達水平降低，因此推測sRAGE可以與RAGE競爭結合配體，抑制RAGE誘導的細胞信號傳導途徑，從而減少RAGE與配體結合后導致的損傷反應，起保護細胞功能。在尸檢研究發現，PD患者腦中NF-κB陽性的多巴胺能神經元數量是正常人的70倍，提示NF-κB的激活與PD的病理機制有關。綜上提示我們AGEs-RAGE軸系統亦可能參與了PD的發病過程，由此推測通過檢測血清sRAGE水平變化，可能成為防治PD的重要靶點。

本研究結果顯示PD患者血清中sRAGE表達水平較正常對照組降低，說明血清sRAGE可能對PD患者神經細胞起潛在保護作用。在研究中sRAGE在PD患者不同嚴重程度組間表達水平有下降趨勢，推測在PD患者血清中sRAGE的水平差異可能決定了其對細胞損傷程度敏感性和抵抗性的差異。但差異并無統計學意義（P>0.05），這可能與本文觀察例數太少及個體sRAGE表達的基因多態性有關。相同年齡段兩組間比較結果提示sRAGE可能對于檢測早期（特別是50～70歲） PD患者有意義。根據實驗結果推測，sRAGE可能通過減慢PD中氧化應激和免疫炎性反應的速度，對PD患者起保護作用。因此，基因重組外源性sRAGE及調節其體內sRAGE的合成分泌，有望成為防治PD新的干預措施。

參考文獻：

[1]Anne M.Anxiety disorder after stroke：Results from the Perth community stroke study [J].Br J Psychiatry，2005，149：235.

[2]李海斌，石炳毅.帕金森病的干細胞治療進展[J].中國組織工程研究與臨床康復，2009，13（1） ：173-177.

編輯/哈濤