He—Ne激光穴位照射對老年癡呆大鼠血清自由基及血液流變學的影響

【摘要】 目的 探討He-Ne激光穴位照射對老年癡呆大鼠血清自由基及血液流變學的影響。方法 用三氯化鋁和D-半乳糖建立大鼠腦損傷老年癡呆動物模型，以不同劑量的氦氖激光穴位照射模型，觀察大鼠血清自由基水平及血液流變學指標的改變。結果 劑量為20.2J/cm2和50.3J/cm2的氦氖激光穴位照射老年癡呆模型大鼠后，血清中SOD活性明顯升高，MDA含量明顯降低（P<0.05，P<0.01），血液流變學指標有明顯改善（P<0.05）。結論 一定劑量He-Ne激光穴位照射有抗MDA氧自由基損傷和激活SOD抑制脂質過氧化的作用，并能改善血液流變學指標異常，是預防、治療老年癡呆等中樞神經退行性疾病的有效方法。

【關鍵詞】 He-Ne激光；穴位照射；老年癡呆；自由基；血液流變學

doi：10.3969/j.issn.1004-7484（x）.2014.04.090

文章編號：1004-7484（2014）-04-1885-02

老年性癡呆，又稱阿茨海默氏病（Alzheimer‘s Disease，AD）是一種發生于中老年的原發性中樞神經系統退行性疾病。現有的大量研究表明，老年癡呆等神經元退行性疾病與腦組織氧化應激具有密不可分的聯系。AD的病因和發病機制目前尚不清楚，但越來越多的研究發現氧自由基的產生與AD有關，并認為氧化應激在AD發生、發展中起關鍵作用[1]。低強度激光具有消炎、鎮痛、抗氧化和調節免疫等多種生物學作用，作為一種非藥物治療手段已被廣泛應用于中樞神經系統疾病的防治。本研究分別測定治療前后血清超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量變化及血液流變學指標的改變，以探討He-Ne激光體外穴位照射對AD患者自由基的清除作用及對血液流變學的影響，為He-Ne激光用于AD治療提供有利的科學理論依據。

1 材料與方法

1.1 動物 健康成年雄性SD大鼠40只，體重（200±20）g，清潔級，購自內蒙古大學實驗動物中心。

1.2 儀器與試劑 HJ-1B型氦氖激光器（南京激光儀器廠），He-Ne激光功率計（北京物科光電公司），752C紫外可見分光光度計（上海第三分析儀器廠），混勻器（上海偉業有限公司），MVIS-2030全自動血液流變分析系統，超氧化物歧化酶（SOD），丙二醛（MDA）測定試劑盒（南京建成生物工程研究所）；D-半乳糖，六水三氯化鋁（東臺市永泰化工有限公司）。

2 方 法

2.1 分組及AD大鼠模型制備 實驗大鼠隨機分為4組，即對照組、模型組、激光高低劑量照射組，參考Fattorettip等人及國內外的相關文獻[2-3]，采用腹腔注射D-半乳糖及皮下注射三氯化鋁復制AD模型。對照組注射等量生理鹽水，AD模型組及激光照射組大鼠腹腔注射D-半乳糖（用注射用水稀釋成1%的溶液）60mg/kg，造成亞急性衰老，皮下注射Alcl3（用注射用水稀釋成1%的溶液）100mg/kg。每日1次，共40天，誘導復制AD模型。

2.2 激光照射 激光波長為632.8nm，輸出功率為22mW，以兩種不同劑量20.2J/cm和250.3J/cm2進行穴位表面照射；激光照射穴位定位參照大鼠常用針灸的百會、大椎穴位。激光照射1次/d，30min/次，連續照射1周為1個療程，療程間隔3天，2個療程后觀察血清的自由基水平及血液流變學指標的變化。對照組及模型組大鼠不進行激光照射。在第15d斷頭處死大鼠，取血10ml左右，3000r/min離心10min，分離出血清，置-20℃保存備用。

2.3 指標的測定 將-20℃保存備用的血清樣品，置于冰水浴中融化，按建成生物工程研究所提供的方法。SOD含量測定采用黃嘌呤氧化酶法；MDA含量采用（TBA）法；全血粘度的測量利用血液全自動分析儀，于25℃恒溫下測定高低切變率下血液粘度、紅細胞聚集指數及紅細胞的變形指數。

2.4 統計學處理 數據采用SPSS11.0統計軟件進行分析。檢測結果用χ±s表示，組間比較采用t檢驗，P<0.05為差別有統計學意義。

3 結 果

3.1 血清SOD活性及MDA含量的改變 模型組大鼠血清SOD含量顯著低于對照組（P<0.01），血清MDA含量與對照組相比顯著升高（P<0.01），激光高低劑量治療組和模型組相比，SOD含量明顯升高（P<0.05，P<0.01），MDA含量明顯降低（P<0.05，P<0.01），激光高劑量組最為顯著。說明一定量的He-Ne激光穴位照射具有明顯的抗氧化及抗自由基損傷作用，見表1。

4 討 論

AD等神經元退行性疾病發病機理復雜，其中氧自由基引起的過氧化損傷被認為是AD等老年疾病發病的重要因素。MDA是脂質過氧化的產物，其含量的變化可間接地反映組織中氧自由基含量變化和氧自由基對機體的損害程度。超氧化物歧化酶SOD是機體天然的自由基清除劑，清除并阻止由氧自由基引發的自由基連鎖反應[4]。人體內氧化自由基的生成使SOD活性下降，導致膜脂質發生過氧化損傷。本實驗中模型組與對照組相比，大鼠血清SOD活性下降，MDA含量升高，表明三氯化鋁和D-半乳糖致老年癡呆模型大鼠的血清自由基產生增多，機體清除氧自由基的能力下降。He-Ne激光高低劑量組大鼠血清中MDA的含量較癡呆模型組都明顯降低，SOD含量明顯升高，激光高劑量組最為顯著。實驗表明一定劑量的激光穴位照射能減少氧自由基的產生，增強清除氧自由基的能力，減輕氧自由基引起的腦組織損傷，起到保護神經細胞和防止腦老化的作用。

大量臨床觀察顯示AD患者伴高脂血癥、血液流變學異常明顯高于同齡健康人。因此，調節脂代謝紊亂，降低血液黏滯度已成為防治AD的主要措施之一。本文采用激光照射大鼠模型的百會、大椎穴位的方法，觀察激光對模型大鼠血液流變學的影響，實驗表明He-Ne激光高劑量穴位照射組對模型大鼠的血液流變學指標有明顯改善作用。說明一定劑量的激光穴位照射能改善微循環，增加腦血流量，減少缺血性損傷，促進缺血缺氧神經細胞功能的恢復。

參考文獻

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