寡克隆區(qū)帶檢驗(yàn)在兒童神經(jīng)系統(tǒng)疾病中的應(yīng)用

楊靖

【摘要】目的 研究寡克隆區(qū)帶檢驗(yàn)在兒童神經(jīng)系統(tǒng)疾病中的應(yīng)用價(jià)值。方法 篩選出2012年3月到2014年3月兒科住院診斷為神經(jīng)系統(tǒng)疾病的54例患兒為研究對(duì)象，根據(jù)疾病類型的不同將其分為三組，A組：神經(jīng)系統(tǒng)炎性脫髓鞘疾病（20例），B組：神經(jīng)系統(tǒng)炎性疾病（20例）， C組：周圍神經(jīng)病（14例）。采用免疫固定電泳技術(shù)對(duì)患兒的腦脊液及血清標(biāo)本中的寡克隆區(qū)帶進(jìn)行檢測(cè)并對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析比較。結(jié)果 三組患兒陽性率兩兩之間比較：A組與B組比較χ?=0.5670，P>0.05，無明顯差異；A組與C組比較χ?=23.5105、B組與C組比較χ?=17.4550，P均<0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論寡克隆區(qū)帶檢驗(yàn)對(duì)兒童神經(jīng)系統(tǒng)疾病的診斷及鑒別診斷具有較高臨床應(yīng)用價(jià)值，可對(duì)患兒中樞神經(jīng)系統(tǒng)體液免疫活化情況進(jìn)行反饋，對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)疾病中多發(fā)性硬化病的診斷陽性率較高，具有較高的臨床理論價(jià)值，可進(jìn)行輔助診斷。

【關(guān)鍵詞】寡克隆區(qū)帶；免疫固定電泳技術(shù)；兒童神經(jīng)系統(tǒng)疾病；應(yīng)用價(jià)值

【中圖分類號(hào)】R4 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B 【文章編號(hào)】1671-8801（2014）12-0119-02

腦脊液寡克隆區(qū)帶是臨床對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)疾病進(jìn)行檢測(cè)的常用指標(biāo)。相關(guān)國(guó)外研究已經(jīng)證實(shí)寡克隆區(qū)帶的檢測(cè)在多種神經(jīng)系統(tǒng)疾病檢測(cè)中對(duì)其發(fā)病機(jī)制的研究及診斷具有重要價(jià)值，如癡呆、中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染、多發(fā)性硬化等疾病[1]。但由于中西方存在人種上的差異，特別是國(guó)內(nèi)多發(fā)性硬化患者與西方患者在臨床特征上具有顯著差別，故應(yīng)對(duì)中國(guó)寡克隆區(qū)帶檢測(cè)在神經(jīng)系統(tǒng)疾病患者診斷中的價(jià)值進(jìn)行臨床探究，尤其是在幼兒患者中。為此筆者展開了對(duì)54例神經(jīng)系統(tǒng)疾病患兒寡克隆區(qū)帶檢驗(yàn)結(jié)果的對(duì)照研究，現(xiàn)將結(jié)果總結(jié)如下。

1資料與方法

1.1一般資料

篩選出2012年8月到2014年8月兒科住院診斷為神經(jīng)系統(tǒng)疾病的54例患兒為研究對(duì)象，其中男性30例，女性24例；年齡6個(gè)月～12歲，平均（4.6±1.8）歲；病程1個(gè)月～5年，平均（2.8±1.3）年。根據(jù)疾病類型的不同將其分為三組，A組：神經(jīng)系統(tǒng)炎性脫髓鞘疾病（20例），包含多發(fā)性硬化11例、視神經(jīng)脊髓炎5例、吉蘭巴雷綜合征4例；B組：神經(jīng)系統(tǒng)炎性疾病（20例），包含脊髓炎6例、顱內(nèi)感染8例、腦囊蟲病2例、病毒性腦炎4例； C組：周圍神經(jīng)病（14例）。三組患兒在性別、年齡、病程等臨床資料的比較上，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可進(jìn)行組間比較。

1.2方法

所有患兒入院后完善相關(guān)常規(guī)檢查，于第二日晨間抽取外周血3ml，離心分離出血清；同時(shí)采用腰穿的方式抽取腦脊液3ml；如病情需要或腦脊液發(fā)生異常，則需要重復(fù)腰椎穿刺留置標(biāo)本；全部標(biāo)本均保存在-20℃冰箱內(nèi)待測(cè)。①寡克隆區(qū)帶檢驗(yàn)：利用瓊脂糖凝膠進(jìn)行免疫固定電泳對(duì)血清和腦脊液標(biāo)本進(jìn)行檢驗(yàn)，蛋白質(zhì)經(jīng)瓊脂糖凝膠行電泳分離后利用免疫固定技術(shù)，在凝膠片上加入IgG酶標(biāo)抗血清，采用特異性高的抗體對(duì)酶進(jìn)行標(biāo)記，經(jīng)固相酶免疫反應(yīng)后，進(jìn)行顯色，讓標(biāo)本呈現(xiàn)出寡克隆區(qū)帶；對(duì)此寡克隆區(qū)帶進(jìn)行免疫球蛋白性質(zhì)的鑒定。腦脊液表現(xiàn)出與血清不相同的2個(gè)及以上的異常區(qū)域則提示（+）。全部血清及腦脊液標(biāo)本的寡克隆區(qū)帶檢測(cè)均經(jīng)PN1211全自動(dòng)電泳分析儀進(jìn)行，且經(jīng)兩個(gè)受過專業(yè)培訓(xùn)的實(shí)驗(yàn)室工作人員分別操作執(zhí)行，得到相同的（+）結(jié)果為準(zhǔn)。

1.3觀察指標(biāo)

對(duì)每個(gè)患兒的寡克隆區(qū)帶（+）結(jié)果、腦脊液數(shù)據(jù)進(jìn)行觀察記錄，并進(jìn)行分析比較[2]。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 14.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料以（ ±s）表示，組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用例數(shù)（%）表示，率的比較采用χ?檢驗(yàn)，檢驗(yàn)結(jié)果以P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1A組患兒中檢驗(yàn)結(jié)果為（+）者共7例，約占35.0%；其中多發(fā)性硬化5（45.0%）例、視神經(jīng)脊髓炎1（20.0%）例、吉蘭巴雷綜合征1（25.0%）例。B組患兒中檢驗(yàn)結(jié)果（+）者共6例，約占30.0%；其中脊髓炎2（33.3%）例、顱內(nèi)感染2（25.0%）例、腦囊蟲病1（50.0%）例、病毒性腦炎1（25.0%）例；C組患兒中檢驗(yàn)結(jié)果為（+）者共1例，約占7.1%。三組患兒寡克隆區(qū)帶檢驗(yàn)陽性率比較，具體見表1。

注：三組患兒陽性率兩兩之間比較：A組與B組比較χ?=0.5670（P=0.4515），A組與C組比較χ?=23.5105（P=0.0000），B組與C組比較χ?=17.4550（P=0.0000）。其中A組和B組之間無明顯差異，C組分別與A組和B組間比較，P均<0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.2三組患兒腦脊液WBC計(jì)數(shù)分別為：A組（32.5±2.8）×106，B組（33.5±3.0）×106，C組（31.8±3.2）×106；腦脊液蛋白定量分別為：A組（0.8±0.4）g/dl，B組（1.2±0.6）g/dl，C組（1.1±0.5）g/dl。三組患兒兩種指標(biāo)水平無明顯差異。

3討論

血清和腦脊液中寡克隆帶檢驗(yàn)在臨床對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)疾病的診斷中廣泛應(yīng)用，其證實(shí)中樞神經(jīng)本身參與活躍的免疫應(yīng)答。腦脊液寡克隆區(qū)帶屬于定性指標(biāo)，具有高度靈敏性，其檢驗(yàn)結(jié)果顯示（+）提示中樞神經(jīng)系統(tǒng)存在自身生成的免疫球蛋白[3]。李潔等研究發(fā)現(xiàn)，寡克隆區(qū)帶陽性在多發(fā)性硬化及中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病中，前者腦脊液檢驗(yàn)呈（+），但血清檢驗(yàn)中多為（-）；后者在血清及腦脊液的檢驗(yàn)中均可顯示為（+）；腦脊液寡克隆區(qū)帶陽性區(qū)和血清檢驗(yàn)中不同，表明寡克隆區(qū)帶檢驗(yàn)（+）對(duì)多發(fā)性硬化疾病的診斷意義不同[4]。

本文研究中，不同疾病類型患兒，血清及腦脊液中寡克隆區(qū)帶陽性率不同，其中A組為35.0%，B組為30.0%，C組為7.1%，三組兩組間進(jìn)行比較，C組與A組、B組存在顯著差異（P均<0.05），但A組與B組間比較，無明顯差異（P>0.05）。說明在A組和B組患兒中均中樞神經(jīng)系統(tǒng)存在自身免疫激活。A組患兒中，多發(fā)性硬化陽性率為45.0%最高，視神經(jīng)脊髓炎僅為20.0%。臨床上此兩類疾病表現(xiàn)相似，難以通過臨床癥狀進(jìn)行鑒別診斷；但對(duì)寡克隆區(qū)帶進(jìn)行檢測(cè)可有效區(qū)分二者。本文研究中將其分組進(jìn)行寡克隆區(qū)帶檢驗(yàn)，結(jié)果多發(fā)性硬化與視神經(jīng)脊髓炎陽性率水平差異顯著。吉蘭巴雷綜合征患兒陽性率為25.0%與多發(fā)性硬化相比較低。提示寡克隆區(qū)帶檢驗(yàn)陽性率在兒童神經(jīng)系統(tǒng)疾病的診斷中對(duì)多發(fā)性硬化的診斷率較高[5]。通過B組與C組研究數(shù)據(jù)分析可得：神經(jīng)系統(tǒng)炎性疾病寡克隆區(qū)帶檢驗(yàn)陽性率為30.0%，周圍神經(jīng)病陽性率為7.1%，其中脊髓炎33.3%、顱內(nèi)感染25.0%、腦囊蟲病50.0%、病毒性腦炎25.0%；證明寡克隆區(qū)帶檢驗(yàn)對(duì)兒童神經(jīng)系統(tǒng)疾病的診斷具有較高臨床應(yīng)用價(jià)值，可對(duì)患兒中樞神經(jīng)系統(tǒng)體液免疫活化情況進(jìn)行反饋。

綜上所述，寡克隆區(qū)帶檢驗(yàn)對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)疾病中多發(fā)性硬化病的診斷陽性率較高，具有較高的臨床理論價(jià)值，不同的神經(jīng)系統(tǒng)疾病診斷的靈敏度不統(tǒng)一，寡克隆區(qū)帶的檢測(cè)對(duì)臨床鑒別診斷多發(fā)性硬化病具有重要意義。

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