吳振永,趙紅艷,孫亞茹,侯鐵永,胡 菊,崔玉秀(河北省保定市第二中心醫院檢驗科 072750)
在檢驗科生化室日常工作中,經常因為血液標本量少而需要將血清提取到樣品杯中[1]。另外,標準品和質控品往往也需加入到樣品杯中,又常常因為日常工作量大或儀器故障而導致標本不能及時測定,標本中水分蒸發而濃縮,從而給試驗結果帶來誤差[2-3]。本研究就針對這一情況,在實驗室不同溫度、濕度條件下,測定樣品杯內血清標本中總蛋白等多個項目的含量隨放置時間的延長而變化來判定標本濃縮情況,用以監測其穩定時間,從而為實驗室工作人員提供指導,采取相應措施盡量避免這種誤差,使檢驗結果更加準確,滿足臨床診治需要。本文測定分析了保存于溫度和濕度下的血清標本的部分生化項目,本試驗針對庫爾特貝克曼DXC800全自動生化分析儀配套樣品杯內待測血清溫度、濕度以及存儲時間對檢驗結果的準確性影響。
1.1 研究對象 常溫不同濕度下樣品杯內的質控血清。
1.2 儀器設備 本文所采用的實驗儀器為庫爾特貝克曼DXC800全自動生化分析儀,本研究中所采用的檢測試劑為庫爾特貝克曼DXC800公司所生產的相關配套產品,樣品杯為江蘇康健醫療設備公司生產的貝克曼儀器專用0.5mL樣品杯,質控品為伯樂公司的中值液體質控品,批號為43422。
1.3 方法 每天記錄實驗室內溫度、濕度,在室溫25℃、濕度30%的條件下開始試驗。按說明書要求提前1h融化質控品,將融化好的質控品加樣品杯內,每個樣品杯加400毫升質控血清,共加4組,每組4支,做好標記,第1組分裝后立即上機檢測,其余3組分別在實驗室敞口放置0.5、1、2h后上機檢測,記錄檢測數據,在不同日期相同溫度、濕度條件下重復上述試驗,共測5d。在室溫25℃,濕度50%和70%的條件下重復進行上述實驗。記錄檢測數據,計算不同條件下不同時間段所測結果的均值和標準差。
1.4 統計學方法 本組研究中所得出的所有數據與結果均運用SPSS13.0統計軟件進行了分析與研究。計數資料采用表示,組間差異采用配對t檢驗,以P<0.05為差異有統計學意義。
2.1 溫度25℃濕度30%的環境 保存0.5h后,與對照組(0 h)相比較,除尿酸(UA)、總蛋白(TP)、鈉(Na)、氯(Cl)和乳酸脫氫酶(LDH)差異有統計學意義(P<0.05)外,其余各檢驗項目差異均無統計學意義(P>0.05);保存1h后,除堿性磷酸酶(ALP)的檢測結果差異無統計學意義(P>0.05)外,其余檢測結果差異均有統計學意義(P<0.05)。保存2h,各檢測項目差異均有統計學意義(P<0.05)。見表1。
2.2 溫度25℃濕度50%的環境 保存0.5h后,與對照組(0 h)相比,除 UA、TP、Na、Cl和LDH 差異有統計學意義(P<0.05)外,其余各檢驗項目差異均無統計學意義(P>0.05);保存1h后,除ALP和血糖(Glu)的檢測結果無明顯變化,差異無統計學意義(P>0.05)外,其余檢測結果均有統計學意義(P<0.05)。保存2h,除了血糖(Glu)的檢測結果差異無統計學意義(P>0.05)外,其他檢測項目差異均有統計學意義(P<0.05)。見表2。
2.3 溫度25℃濕度70%的環境 除了LDH和UA保存2h檢測結果差異有統計學意義(P<0.05)外,其余各檢測項目各時間段與對照組(0h)相比較變化都不明顯,差異無統計學意義(P>0.05)。見表3。
表1 25 ℃濕度30%條件下不同時間的檢驗結果(,n=50)

表1 25 ℃濕度30%條件下不同時間的檢驗結果(,n=50)
注:與0h檢驗結果比較,*P<0.05。
0h 0.5h 1h 2h TP(g/L) 54.80±0.90 55.70±0.80* 57.00±0.98* 59.50±0.96*ALB(g/L) 37.70±0.60 38.10±0.56 38.60±0.73* 40.40±0.64*AlP(U/L) 127.00±8.00 127.00±9.61 128.60±8.11 136.50±7.00*Glu(mmol/L) 6.87±0.11 6.91±0.10 7.00±0.13* 7.28±0.14*UA(umol/L) 358.30±4.10 369.70±4.31* 374.70±4.20* 390.20±3.84*CHO(mmol/L) 4.69±0.11 4.70±0.12 4.83±0.10* 4.98±0.10*Na(mmol/L) 142.10±1.70 143.60±1.40* 145.80±1.55* 151.60±1.50*Cl(mmol/L) 95.20±1.70 95.90±1.65* 97.70±1.60* 102.40±1.50*LDH(U/L) 164.00±3.00 167.20±3.30* 162.00±3.10* 180.40±2.90*CK(U/L) 277.00±3.00 278.00±3.10 308.10±3.20* 312.50±2.90*組別
表2 25 ℃濕度50%條件下不同時間的檢驗結果(,n=50)

表2 25 ℃濕度50%條件下不同時間的檢驗結果(,n=50)
注:與0h檢驗結果比較,*P<0.05。
0h 0.5h 1h 2h TP(g/L) 55.70±0.80 56.40±0.70 56.90±0.77* 58.70±0.60組別*ALB(g/L) 38.00±0.80 38.20±0.90 39.00±0.90* 39.50±0.70*AlP(U/L) 124.00±3.00 125.20±2.60 125.60±2.90 129.10±2.80*Glu(mmol/L) 6.94±0.15 6.90±0.16 6.98±0.18 7.02±0.17 UA(umol/L) 361.40±3.90 366.30±4.10* 368.60±3.90* 393.40±3.50*CHO(mmol/L) 4.61±0.08 4.67±0.09 4.76±0.07* 4.84±0.08*Na(mmol/L) 142.30±1.10 143.90±1.30* 145.10±1.10* 149.90±1.20*Cl(mmol/L) 95.50±0.50 96.50±0.60* 97.60±0.50* 101.20±0.55*LDH(U/L) 164.00±2.00 175.20±2.30* 174.60±1.60* 172.30±2.80*CK(U/L) 288.00±5.00 292.50±4.50 295.00±4.60* 299.00±4.40*
表3 25℃濕度70%條件下不同時間的檢驗結果(,n=50)

表3 25℃濕度70%條件下不同時間的檢驗結果(,n=50)
注:與0h檢驗結果比較,*P<0.05。
0h 0.5h 1h 2h TP(g/L) 55.00±0.60 55.40±0.60 55.50±0.70 55.60±0.70組別ALB(g/L) 37.60±0.80 37.90±0.90 38.10±0.70 38.20±0.70 AlP(U/L) 126.00±4.00 126.00±3.60 124.30±4.10 124.60±3.70 Glu(umol/L) 6.87±0.13 6.87±0.12 6.85±0.15 6.80±0.15 UA(umol/L) 359.20±3.60 358.30±3.90 360.40±3.80 363.00±3.80*CHO(mmol/L) 4.60±0.10 4.63±0.13 4.65±0.12 4.68±0.12 Na(mmol/L) 142.00±1.60 142.20±1.90 143.10±1.50 143.80±1.90 Cl(mmol/L) 95.30±1.20 95.50±1.30 95.80±1.10 95.90±1.30 LDH(U/L) 163.00±3.00 163.30±3.20 167.00±3.40 173.30±2.80*CK(U/L) 286.00±3.00 286.70±3.50 287.60±2.70 288.00±2.60
臨床檢驗結果的真實性和精確性,對于臨床整體診斷和治療結果將產生直接影響,臨床診斷的精確性越來越取決于臨床檢驗的敏感性和特異性[4-5]。臨床實驗室每天提供的檢驗信息結果將關系到對患者的準確診斷和治療以及患者病情的轉歸和健康狀況評估等[6]。這就對檢驗科室的檢驗工作的操作過程及結果提出了更高的要求。因為血液標本在離開人體后,仍在不斷發生各種反應,因而考察室溫下不同濕度保存的標本的質量是否對檢驗結果產生影響,對于檢驗結果的真實性和可靠性具有重要的臨床意義[7]。
在本試驗中,筆者測定和分析了在25℃的環境下保存于不同濕度下樣品杯內質控血清的部分生化項目,根據保存時間的延長檢測結果的變化,探尋貯存條件對血清的檢測可能造成的影響,從而為實驗室針對相應條件的標本保存時間進行指導及對結果準確性評估。研究的結果顯示,于25℃濕度70%條件下保存的樣品杯內的標本,與對照組相比除了LDH和UA外,其余項目各個時間段均未發生明顯改變;于25℃濕度50%環境下和25℃濕度30%環境下,保存2h后,除了Glu的檢測結果變化不明顯外,其他檢測項目均有明顯改變,尤其是LDH和UA。據此分析原因,在室溫25℃濕度70%條件下保存1h,檢驗項目的結果比較穩定;保存2h,大部分檢測項目的結果是穩定的。但在25℃濕度30%條件下保存不穩定,與對照組比較,其值在2h后結果變化顯著,0.5h大部分結果相對穩定。通常情況下臨床試驗室的批量標本均為常溫下分析和處理,這表明以上幾項檢驗項目在濕度比較小的情況下,要盡可能早的完成檢測,越快越好;實驗室的濕度70%左右,結果比30%和50%濕度的結果相對穩定。可能是提示水分蒸發是重要干擾因素[8-9]。因此,提示包括血清測定在內的成套生化檢查,應做到采血后迅速送檢,迅速分離血清,及時上機檢測[10]。從本試驗結果可知,血液分離血清后應盡量在2h內濕度70%左右上機檢測,結果影響比較小。如過實驗室不能滿足濕度70%的環境,要盡可快上機檢測,保存時間比較長的話,最好加蓋保存,影響會比較小。否則,即使先進儀器與方法,也難以避免標本處置不當而引入的誤差及錯誤。總之,標本的存放時間和溫濕度是非常重要的[11],實驗室常溫的環境下,盡量保證實驗室的濕度在70%左右,而且血液離心后,生化標本要盡早上機檢測,盡量在2h之內完成。若需要復查,最好重新抽血。原則上生化標本應盡早測定,將影響因素減到最低。如不能滿足此條件,要加蓋保存標本或低溫保存,防止水分蒸發。
綜上所述,樣品杯內的血清標本在濕度70%的環境下,大部分生化檢測結果較為穩定,若能在2h內完成檢測,常溫條件即可滿足要求。這樣才能確保保存后的標本結果具有真實性和可靠性。
[1]Lin YH,Jiang YG,Li MC,et al.Effects of protate man-pulation on serum total and free prostate specific antigen,and free-to-total prostate specific antigen ratio[J].Saudi Med J,2010,31(9):999-1004.
[2]唐金玲.在不同環境下血清標本的生化檢驗結果分析[J].中國現代藥物應用,2012,06(14):22-23.
[3]梁志豪,梁麗華,廖揚勛,等.采供血機構血清標本新保存管理模式的探討[J].中國醫藥指南,2010,8(11):151-152.
[4]薄濤.血清保存條件對生化檢驗結果的影響[J].臨床和實驗醫學雜志,2008,7(8):81-82.
[5]郭書云,朱愛萍.血清及兩種質控品冷凍保存對生化檢測結果的穩定性研究[J].臨床醫藥實踐,2006,15(10):776-777.
[6]Truszkiewicz W.Influence of storage conditions on results of antibody level assay in human serum samples[J].Med Dosw Mikrobiol,2011,63(2):189-193.
[7]Liu GR,Luo B,Zheng T,et al.Influence of storage conditions on results of antibody level assay in human serum samples[J].Zhonghua Nan Ke Xue,2013,19(7):637-641.
[8]Norman SA,Beckett LA,Miller WA,et al.Variation in hematologic and serum biochemical values of belugas(Delphinapterus leucas)under managed care[J].J Zoo Wildl Med,2013,44(2):376-388.
[9]Gurebuz C,Canna L,Atis G,et al.The role serum testosterone to prostate-specific antigen ratio as a predictor of prostate cancer risk[J].Kaohsiung J Med Sci,2012,28(12):649-653.
[10]海濤.血清保存條件對生化檢驗結果的影響[J].臨床和實驗醫學雜志,2008,7(8):81-82.
[11]蘇少華.儲存溫度與時間對血清標本生化檢驗結果的影響[J].現代醫院,2010,8(2):56-57.