炎癥致巨噬細(xì)胞和血管平滑肌細(xì)胞低密度脂蛋白受體反饋調(diào)控差異的研究＊

葉 強(qiáng)，雷 寒，范忠才，鄭文武，鄭舒展（．瀘州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院心血管內(nèi)科，四川瀘州 646000；2．重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一院心血管內(nèi)科 40006）

低密度脂蛋白受體（LDLr）是結(jié)合血漿LDL膽固醇及調(diào)控血漿膽固醇濃度的主要受體。LDLr活性受依賴于細(xì)胞內(nèi)膽固醇水平的負(fù)反饋系統(tǒng)的嚴(yán)密調(diào)控，細(xì)胞內(nèi)膽固醇處于穩(wěn)態(tài)水平，故生理?xiàng)l件下天然LDL孵育細(xì)胞不能致細(xì)胞泡沫化［1］。LDLr抑制50%所需LDL濃度定義為IC50（Inhibition Concentration50），代表LDLr下調(diào)敏感性。

本課題組以往研究顯示，炎癥應(yīng)激可以擾亂人腎臟系膜細(xì)胞和肝臟細(xì)胞LDLr反饋調(diào)控，允許膽固醇攝入增加，導(dǎo)致過(guò)多膽固醇沉積。同時(shí)實(shí)驗(yàn)顯示，肝細(xì)胞和腎臟系膜細(xì)胞對(duì)膽固醇攝取有不同的能力和敏感性。生理?xiàng)l件下，腎臟系膜細(xì)胞LDLr對(duì)膽固醇負(fù)荷誘導(dǎo)的下調(diào)反應(yīng)比肝細(xì)胞敏感，而肝細(xì)胞LDLr對(duì)下調(diào)表現(xiàn)出抵抗表型。然而，炎癥應(yīng)激改變了LDLr調(diào)控從敏感到抵抗的表型，從而增加了腎臟系膜細(xì)胞LDL攝入閾值，使腎臟系膜細(xì)胞從功能上類似肝細(xì)胞最大化攝入LDL，導(dǎo)致泡沫化［2－8］。巨噬細(xì)胞和血管平滑肌細(xì)胞均為脂質(zhì)代謝的外周細(xì)胞，也是參與動(dòng)脈硬化的主要細(xì)胞類型。然而，LDLr調(diào)控差異在外周細(xì)胞中仍不是很清楚。本研究探討生理?xiàng)l件下，人單核細(xì)胞系（THP－1）巨噬細(xì)胞和血管平滑肌細(xì)胞LDLr負(fù)反饋調(diào)控的差異，以及炎癥應(yīng)激怎樣以細(xì)胞特異性方式改變LDLr反饋調(diào)控。

1 材料與方法

1．1 材料 THP－1購(gòu)于美國(guó)典藏生物中心（ATCC），No：TIB－202；人原代冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞（VSMCs）購(gòu)于TCS cell works（Buckinghamshire，UK）；細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基 DMEM／F12、RPMI1640、胎牛血清（FCS）購(gòu)于北京 Hyclone公司。……