視網膜脫離后光感受器細胞死亡規律的實驗研究

董凱 柯根杰 武立云 朱子誠 許迅 孫曉東

視網膜脫離(retinal detachment，RD)是一種常見的眼科疾病，病理過程復雜，致盲率高，光感受器細胞的不可逆損傷是導致RD患者視力損傷的主要原因［1-2］。本課題組根據前期研究［3］，提出如下假說:RD后光感受器細胞不僅有凋亡，同時存在有程序性壞死，如壞死性凋亡。但是，目前在RD中尚不清楚光感受器細胞壞死的時間分布規律，所以本研究擬通過建立RD模型，研究光感受器細胞凋亡和壞死的時間分布規律，為進一步研究程序性壞死提供較為理想的干預和檢測的時間靶點。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 實驗動物選用雄性健康的 Sprague-Dawley大鼠24只，體質量260～280 g，由上海交通大學附屬第一人民醫院提供，所有實驗操作均嚴格遵守美國視覺眼科研究學會對動物實驗的要求和上海交通大學及安徽醫科大學對動物實驗的規定。

1.2 實驗方法

1.2.1 視網膜脫離動物模型的建立 實驗大鼠由腹腔內注射 100 g·L－1水合氯醛麻醉，5 g·L－1托吡卡胺和5 g·L－1腎上腺素眼液散瞳;術前可樂必妥眼液沖洗結膜囊(中國蘇州參天制藥有限公司)，置角膜接觸鏡，30-G針穿刺視網膜下，沿視網膜下注入10 g·L－1透明質酸鈉50 μL(中國山東博士倫公司)，可見局部RD約占1/2范圍，脫離范圍于結膜面用10-0縫線做標記，以備取材時定位用［4-6］。每只實驗大鼠右眼建立 RD模型，左眼作為對照組。

1.2.2 電鏡檢測 按照文獻報道的方法進行電鏡檢測［4，7］。(1)取材:腹腔內注射 100 g·L－1水合氯醛麻醉，摘除眼球，沿縫線標記范圍取出視網膜組織。(2)固定:體積分數25%戊二醛固定12 h，制成1 mm×3 mm條塊，重新固定液固定?！?br>