橋本甲狀腺炎中細(xì)胞間黏附分子1的表達(dá)及意義

賈　樂(lè),徐嘉雯,王新?tīng)I(yíng)，王強(qiáng)修※

(1.寶雞市中醫(yī)醫(yī)院病理科,陜西 寶雞 721001； 2.山東大學(xué)附屬省立醫(yī)院病理科,濟(jì)南 250021； 3.廣饒縣人民醫(yī)院病理科，山東 東營(yíng) 257399)

橋本甲狀腺炎中細(xì)胞間黏附分子1的表達(dá)及意義

賈樂(lè)1,徐嘉雯2,王新?tīng)I(yíng)3，王強(qiáng)修2※

(1.寶雞市中醫(yī)醫(yī)院病理科,陜西 寶雞 721001； 2.山東大學(xué)附屬省立醫(yī)院病理科,濟(jì)南 250021； 3.廣饒縣人民醫(yī)院病理科，山東 東營(yíng) 257399)

摘要：目的探討細(xì)胞間黏附分子1(ICAM-1)在橋本甲狀腺炎(HT)中的表達(dá)及其意義。方法選取 2008 年 1 月至2012 年 12 月在山東大學(xué)附屬省立醫(yī)院甲狀腺外科行手術(shù)切除的甲狀腺疾病患者147例，根據(jù)疾病和腫瘤生物學(xué)行為不同分成HT組(72例)、甲狀腺微小乳頭狀癌(PTMC)組(60例)、甲狀腺腺瘤組(15例)。采用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)3組患者ICAM-1的表達(dá)。結(jié)果ICAM-1在HT組(30.1%，22/72)及PTMC組(85.0%，51/60)中高表達(dá)，在甲狀腺腺瘤組中無(wú)表達(dá)。ICAM-1在伴有甲狀腺乳頭狀癌(PTC)樣核特征的HT(61.9%，13/21)中表達(dá)顯著高于不伴有者(17.6%，9/51)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。不同年齡、性別、多灶性、有無(wú)復(fù)發(fā)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的ICAM-1陽(yáng)性率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，有無(wú)包膜侵犯和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的ICAM-1陽(yáng)性率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論ICAM-1在PTMC和伴有PTC樣核特征的HT中表達(dá)上調(diào)，提示其可能參與甲狀腺癌的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程。

關(guān)鍵詞：橋本甲狀腺炎；甲狀腺微小乳頭狀癌；細(xì)胞間黏附分子1；診斷

甲狀腺微小乳頭狀癌(papillary thyroid microcarcino-mas，PTMC)是指直徑≤1 cm的甲狀腺乳頭狀癌(papillary thyroid carcinomas，PTC)，常可伴發(fā)橋本甲狀腺炎(Hashimoto thyroiditis，HT)[1-2]。臨床診斷工作中，當(dāng)HT中的部分細(xì)胞出現(xiàn)PTC的核改變特征時(shí)，與小灶性的PTMC形態(tài)學(xué)改變非常相似，極易導(dǎo)致病理診斷困難或誤診。細(xì)胞間黏附分子1(intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1)屬于黏附分子中免疫球蛋白超家族中的成員，被認(rèn)為在腫瘤的局部浸潤(rùn)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移中起非常重要的作用。文獻(xiàn)報(bào)道,ICAM-1可在PTC中過(guò)表達(dá)[3]，但在HT患者中的表達(dá)情況仍不詳。本研究通過(guò)檢測(cè)ICAM-1蛋白在HT、PTMC及甲狀腺腺瘤中的表達(dá)，探討其在甲狀腺疾病尤其是伴有PTC樣核改變的HT中的表達(dá)及意義。

1資料與方法

1.1一般資料選取2008年1月至2012年12月在山東大學(xué)附屬省立醫(yī)院甲狀腺外科行手術(shù)切除的甲狀腺疾病患者147例，病理學(xué)檢查根據(jù)2004年世界衛(wèi)生組織甲狀腺腫瘤分類[4]。并根據(jù)疾病和腫瘤生物學(xué)行為的不同分為3組：HT組72例，男20例、女52例，男∶女=1∶2.4；年齡19～68歲，平均(41.0±4.0)歲；伴有PTC樣核特征21例，不伴有PTC樣核特征51例。PTMC組60例，男17例、女43例，男∶女=1∶2.2；年齡22～79歲，平均(42.1±2.8)歲。甲狀腺腺瘤組15例，男5例，女10例，男∶女=1∶2.0；年齡24～59歲，平均(40.1±3.0)歲。3組患者的性別、年齡等一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2納入與排除標(biāo)準(zhǔn)納入標(biāo)準(zhǔn)：患者臨床病史資料齊全，病理診斷結(jié)果明確，存檔蠟塊無(wú)缺失，由2名病理醫(yī)師重新復(fù)查臨床及病理資料，以確定病變組織學(xué)類型；腫瘤患者則明確病灶大小、多灶性、有無(wú)包膜浸潤(rùn)及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等情況。排除標(biāo)準(zhǔn)：臨床病史資料不全，病理診斷結(jié)果不確定，甲狀腺癌的直徑>1 cm，用于進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色所需的存檔蠟塊缺失以及術(shù)前患者接受過(guò)內(nèi)分泌治療或放化療者。

1.3試劑ICAM-1單克隆抗體購(gòu)自美國(guó)Santa cruz生物有限公司，PV6000免疫組織化學(xué)檢測(cè)試劑盒和二氨基聯(lián)苯胺法顯色試劑盒均購(gòu)自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。

1.4免疫組織化學(xué)染色采用EnVision二步法，以磷酸鹽緩沖液替代一抗作為陰性對(duì)照，用已知正常扁桃體組織作為陽(yáng)性對(duì)照。石蠟包埋的組織4 μm連續(xù)切片；二甲苯脫蠟，梯度乙醇逐級(jí)水化；10% H2O220 min阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶活性；抗原修復(fù)用微波爐抗原熱修復(fù)，修復(fù)液為枸櫞酸鈉(0.1 mol/L，pH 6.0)。按免疫組織化學(xué)試劑盒說(shuō)明書(shū)操作，一抗4 ℃過(guò)夜，磷酸鹽緩沖液沖洗；Envision二抗室溫40 min；二氨基聯(lián)苯胺法光鏡控制下顯色，蘇木精對(duì)比染色，脫水，風(fēng)干，中性樹(shù)脂封片。

1.5免疫組化染色結(jié)果判斷選擇5個(gè)高倍視野各計(jì)數(shù)500個(gè)腫瘤細(xì)胞， 以細(xì)胞質(zhì)和膜出現(xiàn)明顯的棕黃色顆粒并且明顯強(qiáng)于背景非特異性染色為染色陽(yáng)性細(xì)胞，包括染色強(qiáng)度和陽(yáng)性細(xì)胞百分率進(jìn)行評(píng)價(jià)。染色強(qiáng)度：陰性，0分；弱陽(yáng)性，1分；中等陽(yáng)性，2分；強(qiáng)陽(yáng)性，3分。陽(yáng)性細(xì)胞百分率：<5%，0分；5%～25%，1分；26%～50%，2分；51%～75%，3分；>75%，4分。最終染色得分為兩者相加，<3分為陰性；≥3分為陽(yáng)性[5]。染色結(jié)果經(jīng)2位高年資病理醫(yī)生進(jìn)行評(píng)價(jià)，取平均值。

2結(jié)果

2.13組甲狀腺疾病患者ICAM-1表達(dá)的比較ICAM-1定位于細(xì)胞膜或細(xì)胞質(zhì)(見(jiàn)封三圖1)，3組ICAM-1陽(yáng)性表達(dá)率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=55.284，P<0.01)，PTMC組和HT組ICAM-1的陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于甲狀腺腺瘤組[85.0%(51/60)，30.6%(22/72)比0](χ2=39.844,6.135，P<0.01)，且PTMC組顯著高于HT組(χ2=39.246，P<0.01)。

2.2ICAM-1在HT中的表達(dá)ICAM-1在伴有PTC核特征的HT患者中的陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于不伴有者[61.9%(13/21)比17.6%(9/51)]，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=13.540，P<0.01)。

2.3ICAM-1表達(dá)與PTMC臨床病理特征的關(guān)系不同年齡、性別、多灶性、有無(wú)復(fù)發(fā)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的ICAM-1陽(yáng)性率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，較無(wú)包膜侵犯的ICAM-1陽(yáng)性率高，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的較無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的ICAM-1陽(yáng)性率高(均P<0.05)，見(jiàn)表1。

ICAM-1：細(xì)胞間黏附分子1； PTMC：甲狀腺微小乳頭狀癌

3討論

ICAM-1是一種跨膜糖蛋白，屬于免疫球蛋白家族成員，分布于淋巴管和血管內(nèi)皮細(xì)胞、纖維母細(xì)胞等中，是參與介導(dǎo)細(xì)胞間黏附識(shí)別的重要因子，其可與淋巴細(xì)胞表面的受體淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原結(jié)合，使淋巴細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞穩(wěn)定黏附[1]。研究發(fā)現(xiàn)，ICAM-1可在前列腺癌[5]、乳腺癌[6]和口咽癌[7]等多種實(shí)體瘤中過(guò)表達(dá)，并與腫瘤發(fā)生、發(fā)展有關(guān)。PTMC是甲狀腺癌最常見(jiàn)的病理學(xué)類型，單純依靠組織學(xué)特征鑒別PTMC與具有PTMC核特征的HT是非常困難的[8]。本研究檢測(cè)了ICAM-1在HT、PTMC及甲狀腺腺瘤中的表達(dá)。結(jié)果顯示，ICAM-1在HT、PTMC中過(guò)表達(dá)，而在甲狀腺腺瘤中不表達(dá)，ICAM-1在PTMC和HT中的陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于甲狀腺腺瘤(P<0.01)。與HT相比，ICAM-1在PTMC中的表達(dá)明顯上調(diào)，而且大多數(shù)ICAM-1表達(dá)陽(yáng)性的PTMC有甲狀腺包膜的浸潤(rùn)和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，表現(xiàn)出高侵襲性的特征。因此，行ICAM-1標(biāo)記有助于病理醫(yī)師結(jié)合形態(tài)學(xué)特征更準(zhǔn)確地對(duì)常見(jiàn)甲狀腺疾病進(jìn)行鑒別診斷。

目前，HT與甲狀腺癌的關(guān)系仍有爭(zhēng)論。有研究指出，HT患者患甲狀腺癌的風(fēng)險(xiǎn)是正常人的1.68倍[9]，尤其是伴有PTC核特征(如核重疊、增大、毛細(xì)胞核及核溝等[10])者，PTC核特征出現(xiàn)-甲狀腺濾泡上皮不典型增生-Hürthle細(xì)胞化生可能是一個(gè)連續(xù)的過(guò)程[9,11]。李曉靜等[12]回顧性分析了772例甲狀腺癌資料，發(fā)現(xiàn)2005年P(guān)TMC占乳頭狀癌總數(shù)的27.27%，2011年升至54.22%，乳頭狀癌合并HT者占其總數(shù)的12.38%。本研究結(jié)果顯示，72例HT中有21例伴有PTC核特征，且為多灶性，形態(tài)學(xué)上與PTMC很相似，病理檢查時(shí)極易造成誤診、誤治。本研究結(jié)果顯示，具有PTC核特征改變的HT中ICAM-1的表達(dá)較不伴有PTC核特征者顯著升高(P<0.05)，提示ICAM-1可能介入了甲狀腺腫瘤發(fā)生、發(fā)展的過(guò)程。并且，ICAM-1在PTMC中的陽(yáng)性率顯著高于HT,有利于輔助PTMC的診斷。

文獻(xiàn)報(bào)道，轉(zhuǎn)染中重排/甲狀腺乳頭狀癌基因1和轉(zhuǎn)染中重排/甲狀腺乳頭狀癌基因3癌基因的表達(dá)提示HT是PTC的癌前病變[13]。另有研究指出，p63蛋白[14]和雜合性人類8-羥基鳥(niǎo)嘌呤DNA糖苷酶缺失可能參與了HT-PTC的惡性轉(zhuǎn)化[15]。但是到目前為止，仍無(wú)肯定的遺傳學(xué)證據(jù)證實(shí)兩者之間存在必然的相關(guān)性。本研究結(jié)果提示，ICAM-1陽(yáng)性表達(dá)有助于識(shí)別PTMC以及伴有PTMC核特征的HT，并且建議對(duì)ICAM-1陽(yáng)性的HT患者定期隨訪，以做到早發(fā)現(xiàn)、早診斷和早治療。

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2015年版《中國(guó)科技期刊引證報(bào)告》中《醫(yī)學(xué)綜述》的指標(biāo)數(shù)值

《醫(yī)學(xué)綜述》在中國(guó)科學(xué)技術(shù)信息研究所的2015年版《中國(guó)科技期刊引證報(bào)告》(核心版)同類學(xué)科48種期刊中的總被引頻次(4045)排名第7位、影響因子(0.447)排名第31位、綜合評(píng)價(jià)總分(56.5)排名第8位、學(xué)科影響指標(biāo)(0.96)排名第2位(5個(gè)并列)，他引率0.95；在2015年版《中國(guó)科技期刊引證報(bào)告》(擴(kuò)刊版)的總被引頻次8755、影響因子0.978、他引率0.98、學(xué)科影響指標(biāo)0.85、學(xué)科擴(kuò)散指標(biāo)9.33、擴(kuò)展H指標(biāo)11。

Expression and Clinical Significance of Intercellular Adhesion Molecule-1 in Hashimoto ThyroiditisJIALe1,XUJia-wen2,WANGXin-ying3,WANGQiang-xiu2.(1.DepartmentofPathology,BaojiCityChineseMedicineHospital,Baoji721001,China; 2.DepartmentofPathology,ShandongProvincialHospitalAffiliatedtoShandongUniversity,Jinan250021,China；3.DepartmentofPathology,GuangraoCountyPeople′sHospital,Guangrao257399,China)

Abstract:ObjectiveTo investigate the expression and clinical significance of intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) in Hashimoto thyroiditis(HT).MethodsA total of 147 patients with thyroid disease admitted to Shandong University Affiliated Provincial Hospital Thyroid Surgery from Jan.2008 to Dec.2012 were included in the study,according to the disease and biological behavior of the tumor they were divided into HT group(72 cases),small papillary thyroid carcinoma(PTMC) group(60 cases),thyroid adenoma group(15 cases).The expression of ICAM-1 in the 3 groups was detected by immunohistochemistry(IHC).ResultsICAM-1 expression was not detected in follicular lesions adenoma,but was frequently overexpressed in HT(30.1%,22/72)and papillary thyroid microcarcinomas(85.0%,51/60).ICAM-1 expression in patients with PTC-like nuclear alterations(61.9%,13/21) was significantly higher than that in HT caseswithout PTC-like features(17.6%,9/51)(P<0.01).Differences of ICAM-1 positive rate among different ages,genders,multifocalness,recurrence and distant metastasis had no statistical significance(P>0.05).ICAM-1 positive rate between patients with or without capsular invasion and lymph node metastasis had statistically significant difference(P<0.05).ConclusionICAM-1 expression is upregulated in PTMC and HT with PTC-like features,indicating that it might be involved in the genesis and development of thyroid carcinoma.

Key words:Hashimoto thyroiditis; Papillary thyroid microcarcinomas; Intercellular adhesion molecule-1; Diagnosis

收稿日期：2015-01-30修回日期：2015-05-28編輯：伊姍

基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金青年基金(81202092)；山東省醫(yī)藥衛(wèi)生科技發(fā)展計(jì)劃(2011HW053)：山東省科學(xué)技術(shù)發(fā)展計(jì)劃(2012YD18045)

doi：10.3969/j.issn.1006-2084.2015.24.049

中圖分類號(hào)：R736.1

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1006-2084(2015)24-4554-03