2型DPN患者血清NSE的變化及其與周圍神經病變關系的研究

葉曉梅　張敏

2型DPN患者血清NSE的變化及其與周圍神經病變關系的研究

葉曉梅張敏

目的 探討2型糖尿病周圍神經病變（DPN）患者血清神經元特異性烯醇化酶（NSE）的變化并研究其與DPN的關系。方法 177例2型糖尿病患者按有無DPN分為DPN組（106例）和對照組（71例），測定并比較兩組的血清NSE水平，以Logistic回歸分析探討NSE與DPN的關系。 結果 DPN組血清NSE水平高于對照組（P＜0.05）；Logistic回歸分析顯示在排除性別、年齡、糖代謝指標、病程等混雜因素影響后，NSE水平仍與DPN密切相關（OR值：1.194［1.031～1.383］，P值：0.018）。結論 2型糖尿病DPN患者血清NSE水平升高，NSE水平與DPN密切相關，可能是DPN的一個獨立預測因子。

神經元特異性烯醇化酶 2型糖尿病 周圍神經病變

糖尿病周圍神經病變（DPN）起病隱匿，早期常無自覺癥狀，待出現臨床癥狀時周圍神經多已出現不可逆的軸索損傷和階段性脫髓鞘等病理改變。由于診斷方法和標準不同，其患病率為2.4%～75.1%［1，2］。目前臨床常用的DPN診斷方法有多種，但缺乏對糖尿病性神經損傷的生物標志物。神經元特異性烯醇化酶（NSE）是神經元和神經內分泌細胞所特有的一種蛋白酶，在神經損傷時其血清濃度升高，國內有學者發現DPN患者血清NSE升高，且與神經病變程度正相關，提出NSE可能是DPN的一個潛在生物標志物［3］，然而國外此方面報道甚少，國內尚未見其他報道，因此本文研究了2型糖尿病DPN患者血清NSE的變化，并對NSE與DPN的關系作初步探討。報道如下。

1　臨床資料

1.1一般資料 2013年1月至2014至1月在本院內分泌科住院的2型糖尿病患者，按有無DPN分為DPN組（n=106例）和對照組（n=71例）。DPN組男63例，女43例；平均年齡（59.45±9.29）歲。對照組男41例，女30例；平均年齡（58.48±7.98）歲。糖尿病的診斷標準參考1999年WHO標準。排除標準：（1）嚴重的腎功能不全（內生肌酐清除率＜50ml/min），嚴重的肝功能不全（如ALT、AST超過正常上限的3倍），心功能不全（New York心功能分級III、IV級）。（2）有外周血管疾病、中樞神經系統疾病、神經內分泌細胞來源的增生或腫瘤。（3）排除骨科疾病、肺部疾病。

1.2DPN的診斷標準 依據2009年最新的診療規范，即有明確的糖尿病病史；在確診糖尿病時或之后出現神經病變；臨床癥狀和體征與DPN的表現相符；以下5項檢查中如有≥2項異常則可診斷為DPN：（1）溫度覺異常。（2）尼龍絲檢查示足部感覺減退或消失。（3）振動覺異常。（4）踝反射消失；（5）NCV檢查顯示有≥2項減慢。

1.3方法 所有對象詳細詢問病史，包括性別、年齡、糖尿病病程、糖尿病家族史及既往史，進行體格檢查，計算體重指數（BMI），測量血壓，進行DPN的專項檢查（包括肌電圖）。采血測定糖化血紅蛋白（HbA1c）、糖化白蛋白（GA）、空腹血糖（FPG）、膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、肝腎功能、NSE，留尿測定24h尿微量白蛋白，計算內生肌酐清除率（Ccr）。血糖測定采用葡萄糖氧化酶法（日立7600全自動分析儀），HbA1c采用高壓液相法（Variant II HbA1c分析儀，美國BIORAD公司），GA測定采用液態酶法（Glamour2000全自動生化分析儀，美國MD儀器公司）。血脂測定采用酶法（日立7600全自動分析儀），NSE測定采用電化學發光法（Roche公司E170全自動電化學發光分析儀）。尿微量白蛋白定量采用免疫比濁法（德國拜耳公司DCA2000尿微量白蛋白/肌酐檢測儀）。

1.4統計學方法 采用SPSS19.0統計軟件。計量資料以表示，非正態分布資料經對數轉換再分析，兩組間比較采用t檢驗，NSE與DPN的關系采用Logistic回歸分析，P＜0.05為差異有統計學意義。

2　結果

2.1DPN組和對照組各項指標比較 DPN組血清NSE水平、24h尿微量白蛋白、HDL-C、病程明顯高于對照組，差異有統計學意義（P均＜0.05），DPN組舒張壓低于對照組（P＜0.05）。兩組間年齡、性別、糖代謝指標、BMI，收縮壓、TC，TG，LDL-C，Ccr的差異無統計學意義（P均＞0.05）。見表1。

表1　DPN組和對照組各項指標的比較

表1　DPN組和對照組各項指標的比較

測定指標DPN組（n=106）對照組（n=71）P值年齡（歲）59.45±9.2958.48±7.980.471性別，男性百分比（%）59.4357.750.123 FPG（mmol/L）11.93±5.2912.21±4.730.710 HbA1c（%）10.65±2.3410.74±2.700.829 GA（%）33.08±11.5230.70±11.740.183病程（年）7.31±3.235.80±2.600.002 BMI（kg/m2）23.71 ±3.1823.87±2.920.740收縮壓（mmHg）138.11±20.51133.55±19.000.137舒張壓（mmHg）78.93±11.8082.37±10.040.046 TC（mmol/L） 4.68±1.514.93±1.200.239 TG（mmol/L）1.79±1.661.98±1.590.496 HDL-C（mmol/L）1.11±0.321.01±0.260.025 LDL-C（mmol/L）5.25±2.307.12±1.120.480 24h尿微量白蛋白（mg）87.31±47.5749.53±26.800.001 Ccr（ml/min）81.34±6.2380.76±11.090.223 NSE（μg/L）11.42±2.7110.66±1.890.031

2.2血清NSE與DPN關系的多元回歸分析 見表2。

表2　NSE與DPN關系的多元回歸分析

3　討論

NSE是參與糖酵解途徑的烯醇化酶的一種，是一個高度水溶性的胞內酶，位于神經內分泌細胞的胞漿中，在組織損傷后，它迅速釋放入腦脊液和血中，其生物半衰期48h［4］。在中樞神經系統疾?。ㄈ缒X血管病、腦外傷、癲癇等）中，血清NSE水平升高已被廣泛證實［5］，被認為是神經元損傷的特異性標志。DPN患者亦存在神經損傷，以末梢神經損害為主，與中樞神經系統不同的是，由于無血腦屏障的保護，末梢神經更脆弱，更易暴露于有毒的環境中［6］，因此作者推測在DPN患者，血清NSE水平亦升高。目前國內外這方面的研究甚少［7］。在本研究中，DPN組血清NSE水平為（11.42±2.71）μg/L，對照組為（10.66±1.89）μg/L，DPN組NSE水平升高，差異有顯著性，這與李建波等研究結果相符［3］。已有研究顯示，缺血缺氧是DPN的主要致病因素［8］，慢性暴露于高血糖及相關的缺血缺氧伴隨著氧化應激，致DPN的風險增加［9］，其特征是神經細胞變性并常伴隨再生［10］；長期高血糖及缺血缺氧的環境對神經系統產生氧化應激［4，11，12］，激活神經元中一些糖酵解酶包括烯醇化酶［6］，為了滿足這種環境下對能量相對高的要求以增加神經元的存活，糖酵解酶活性被迫上調［13］，在這些過程中，受影響的神經元中的烯醇化酶的合成可能發生改變，并有可能使NSE漏入血中。以上這些研究結果也許可以解釋DPN患者血清NSE升高的原因。但國外學者Sandhu HS等進行的研究中，卻發現DPN患者血中NSE的mRNA水平低于糖尿病不伴神經病變者及健康對照者［7］，與作者的結果相反，這可能與種族差異，DPN的不同診斷方法及NSE測定方法等有關，有必要進行更深入的研究。

本文亦研究了NSE與DPN的關系，多元Logistic回歸分析顯示，在排除性別、年齡、血糖、糖化血紅蛋白、糖化白蛋白、病程等混雜因素影響后，NSE仍與DPN密切相關，因此作者認為NSE也許可能作為DPN的一個獨立預測因子。DPN早期癥狀不明顯，常被忽視，一旦出現麻木疼痛等表現，神經損傷常不可逆，給患者的生活帶來較大影響。然而目前對于DPN的診斷缺乏統一客觀標準，神經電生理檢查曾一度被視為金標準，但耗時費力，成本高，且有創傷，不適合作為常規篩查，且DPN早期的病理改變以神經末梢和小纖維改變為主，神經電生理檢查可顯示假陰性，故以之作為金標準受到質疑，目前臨床多以多種方法聯合診斷［14］，缺乏特異的生物標志物，基于作者及現有研究的結果，如NSE能應用于臨床作為DPN早期的篩選指標，將有助于DPN的早期診斷和及時干預，降低DPN相關的致死、致殘率，使患者獲益。鑒于目前這方面研究甚少，將來尚需更多大規模的研究以證實兩者的關系。然而這一指標亦有它的局限性，因周圍神經NSE含量遠低于腦內，血液中含量更是微乎其微，檢測結果容易波動，且受不同實驗室條件限制，難以建立統一的標準，因此尚需進一步研究。

1 Fabian W， Majkowska L， Stefański A，et，al. Prevalence of diabetes，antidiabetic treatment and chronic diabetic complications reported by general practitioners.Przegl Lek，2005，62（4）：201～205.

2 Rubino A， Rousculp MD， Davis K， et al. Diagnosis of diabetic peripheral neuropathy among patients with type 1 and type 2 diabetes in France， Italy， Spain， and the United Kingdom.Prim Care Diabetes，2007，1（3）：129～134.

3 Jianbo Li，MD，PHD，Hongman，Zhang，MD，Min Xie，MD，et al.NSE，a Potential Biomarker， Is Closely Connected to Diabetic Peripheral Neuropathy. Diabetes Care，2013， 36（11）： 3405～3410.

4 Marangos PJ， Schmechel DE. Neuron specific enolase， a clinically useful marker for neurons and neuroendocrine cells. Annu Rev Neurosci，1987，10：269～295.

5 代紅源，余紹祖.NSE在神經系統疾病中的研究進展.國外醫學神經病學神經外科學分冊，2001，28（6）：401～404.

6 Marieb EN， Hoehn K. Human Anatomy & Physiology. 7th ed. London，UK： Pearson， 2007：388～602.

7 Sandhu HS， Butt AN， Powrie J， et al. Measurement of circulating neuron-specific enolase mRNA in diabetes mellitus. Ann N Y Acad Sci， 2008，1137（1）：258～263.

8 Cameron NE ，Cotter MA. Vascular change in animal models of diabetic neuropathy. J Neurochem，2003，85（Suppl 2）：14.

9 Fernyhough P， Roy Chowdhury SK， Schmidt RE. Mitochondrial stress and the pathogenesis of diabetic neuropathy. Expert Rev Endocrinol Metab， 2010，5（1）：39～49.

10 Dyck PJ， Zimmerman BR， Vilen TH， et al. Nerve glucose， fructose，sorbitol， myo-inositol， and fiber degeneration and regeneration in diabetic neuropathy. N Engl J Med，1988，319（9）：542～548.

11 Boulton AJ. Diabetic neuropathy： classification， measurement and treatment. Curr Opin Endocrinol Diabetes Obes， 2007，14（2）：141～145. 12 Kaiser E， Kuzmits R， Pregant P，et al. Clinical biochemistry of neuron specific enolase. Clin Chim Acta， 1989，183（1）：13～31.

13 Mielke R， Schr?der R， Fink GR，et al. Regional cerebral glucose metabolism and postmortem pathology in Alzheimer's disease. Acta Neuropathol，1996，91（2）：174～179.

14 劉會貞，劉雯，李金榮，等.4種方法診斷糖尿病周圍神經病變的評價.廣東醫學，2010，31（24）：3253～3255.

Objective To investigate the serum neuron-specifi c-enolase（NSE）level in type 2 diabetes with peripheral neuropathy（DPN）and explore the relationship between NSE and DPN. Methods 177 inpatients with type 2 diabetes were included in this study.They were divided into DPN group（n=106）and control group（n=71）according to the existing of DPN.The level of serum NSE was determined and compared in two groups；Logistic regession model was used to assess the relationship between NSE and DPN. Results The DPN group had a higher serum NSE level than control group（P＜0.05）and the serum NSE level showed closed association to DPN（odds ratio 1.194［1.031-1.383］，P=0.018）after sex，age，glucose metabolism indexes，duration were adjusted. Conclusion Theserum NSE level is increased in type 2 diabetes with DPN and tightly related to DPN，it might be an independent predictive factor of DPN.

NSE Type 2 diabetes Peripheral neuropathy

201700 復旦大學附屬中山醫院青浦分院內分泌科