基質金屬蛋白酶及TIMPs在EMS患者血清及腹腔液中的表達

陳子松　周杭杰　李磊　應玲紅

·檢測診斷·

基質金屬蛋白酶及TIMPs在EMS患者血清及腹腔液中的表達

陳子松周杭杰李磊應玲紅

目的 探討血清和腹腔液中基質金屬蛋白酶MMP-2、MMP-9及其組織抑制因子TIMP-1、TIMP-2 水平與子宮內膜異位癥（EMs）發病的關系。方法 2012年6月至2013年12月87例EMs患者血清和腹腔液，用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法（ELISA）檢測MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2水平與對照組30例子宮肌瘤患者比較。結果 血清和腹腔液中MMP-2和MMP-9表達水平EMs組顯著高于對照組，TIMP-1和TIMP-2表達水平EMs組顯著低于對照組，比較差異均有統計學意義（P＜0.05）。EMs組血清和腹腔液中MMP-2和MMP-9水平在Ⅲ～Ⅳ期顯著高于Ⅰ～Ⅱ期，TIMP-1和TIMP-2水平在Ⅲ～Ⅳ期顯著低于Ⅰ～Ⅱ期，比較差異均有統計學意義（P＜0.05）。MMP-2和MMP-9水平血清顯著高于腹腔液，TIMP-1和TIMP-2水平血清顯著低于腹腔液，比較差異均有統計學意義（P＜0.05）。結論 MMP-2和MMP-9水平高表達，TIMP-1和TIMP-2水平低表達可能與EMs發生和發展有關。

子宮內膜異位癥 基質金屬蛋白酶 組織抑制因子

子宮內膜異位癥（EMs）是育齡期婦女的常見病和多發病，其發病率呈上升趨勢，發病機制至今尚未完全闡明。目前最為廣泛接受的是經血逆流種植學說，該學說認為逆流入腹腔的內膜碎片種植并侵蝕生長，需要細胞外基質的破壞和重建，可能受到基質金屬蛋白酶（MMPs）及其特異的組織抑制劑（TIMPs）的影響［1］。本文探討血清和腹腔液中基質金屬蛋白酶MMP-2、MMP-9及其組織抑制因子TIMP-1、TIMP-2水平與EMs發病的關系。

1　臨床資料

1.1一般資料 選取本院2012年6月至2013年12月87例EMs患者，年齡21～45歲，平均年齡（32.5±6.0）歲。對照組30例為子宮肌瘤患者，年齡23～40歲，平均年齡（31.0±5.0）歲。兩組年齡差異無統計學意義。1. 2 方法 （1）標本采集：所有患者清晨空腹抽取靜脈血3ml，3000 r/min 離心 10min，取上層血清于-20℃冰箱保存；在手術時腹腔鏡抽吸未被血液污染的腹腔液，3000r/min 離心10min，取上清液-20℃冰箱保存。（2）檢測方法：采用酶聯免疫吸附法檢測血清和腹腔液，試劑盒由深圳晶美生物工程有限公司提供。

1.3統計學方法 應用SPSS13.0統計軟件。檢測結果以表示，組間分析采用t檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2　結果

2.1EMs組與對照組血清中MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2表達水平比較 見表1。

表1　兩組血清中MMPs及TIMPs表達水平比較［ng/ml，（x±s）］

2.2EMs組與對照組腹腔液中MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2表達水平比較 見表2。

表2　兩組組腹腔液中MMPs及TIMPs表達水平比較［ng/ml，（x±s）］

2.3EMs組各期與對照組血清中MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2表達水平比較 見表3。

表3　兩組血清中MMPs及TIMPs表達水平比較［ng/ml，（x±s）］

2.4EMs組各期與對照組腹腔液中MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2表達水平比較 見表4。

表4　兩組腹腔液中MMPs及TIMPs表達水平［ng/ml，（x±s）］

2.5EMs組血清與腹腔液中MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2表達水平比較 見表5。

表5　EMs患者血清與腹腔液中MMPs及TIMPs表達水平比較［ng/ml，（x±s）］

3　討論

EMs被認為是一種類似癌性浸潤性良性疾病，具有轉移、種植、破壞組織以及潛在惡變的生物學行為，常通過粘附-侵襲-血管形成3個過程。MMP-2和MMP-9 為鋅離子依賴的中性蛋白酶，是細胞外基質降解的主要蛋白水解酶，能降解明膠、基底膜、IV型膠原等，且能促進血管內皮細胞生長、導致新生血管的形成，因此在子宮內膜的異位粘附、種植、生長起重要作用［2］。Marion等［3］報道在子宮內膜異位癥患者外周血及腹腔液中發現MMP-2濃度增加，MMP-2濃度與甾體激素濃度存在相關性，雌激素可能刺激MMP-2的分泌，從而導致子宮內膜異位癥的形成并促進其生長。Merli等［4］發現Ⅲ期與Ⅳ期EMs組織中MMP-2、 MMP-9表達水平均明顯升高，認為MMP-2、MMP-9是EMs形成與不斷進展的關鍵。

TIMP-1和TIMP-2為糖蛋白，在體內較廣泛地存在，是蛋白酶抑制劑。TIMP-1能和 MMP-9非共價結合，TIMP-2能和MMP-2非共價結合，各自形成1：l復合體。TIMP-1能抑制MMP-9活性，TIMP-2能抑制MMP-2活性，TIMP-1和TIMP 2還能抑制新生血管形成，防止細胞外基質降解。TIMP-1和TIMP-2通過調解MMP-2和MMP-9的活性調控細胞外基質的更新，細胞外基質合成與降解過程的協調依賴于它們之間的平衡，這種平衡失調，就會引起多種病理改變，這一現象在EMs發生發展中有著極其重要的作用［5］。

本資料顯示，EMs組患者血清和腹腔液中MMP-2和MMP-9表達水平顯著高于對照組（P＜0.05），證實高濃度MMP-2和MMP-9破壞細胞外基質，促進新生血管形成，調節細胞粘附，激活潛在活性蛋白質等方面具有重要作用，這些因素易于EMs的發生。MMP-2和MMP-9濃度在Ⅲ～Ⅳ期顯著高于Ⅰ～Ⅱ期，說明高濃度MMP-2和MMP-9在EMs病情的進展方面也起著至關重要作用。由于TIMPs是MMPs的抑制劑，MMP-2和MMP-9濃度升高必然導致TIMP-1和TIMP-2濃度的降低，表現在TIMP-1和TIMP-2表達水平EMs組顯著低于對照組（P＜0.05），這與鎖丙榮等［6］結論一致。MMP-2和MMP-9水平血清顯著高于腹腔液，TIMP-1和TIMP-2水平血清顯著低于腹腔液（P＜0.05），表明在體液中的分布不同。利用TIMPs和MMPs之間的平衡關系，為EMs的治療提供了新的方向?？傊琈MP-2和MMP-9的異常表達可能與異位內膜種植有關，利用TIMP-1和TIMP-2的調節作用，采取合理的干預措施，可降低EMs的發生和發展。

1 李艷，郎景和. 基質金屬蛋白酶 9 及其組織抑制劑1在子宮內膜異位癥組織中的表達. 中華婦產科雜志，2006 ，41（1）：30～33.

2 李建芳，李利波，蕭君明，等.基質金屬蛋白酶2、9及其抑制因子1、2在子宮內膜異位癥患者血清及腹腔液中的表達.中國傷殘醫學，2014，22（3）：29～30.

3 Marion Tuer， Weigel Julia， Krmer Christian，et al. Differential expression of MMP-2， MMP-9 and PCNA in endometriosis and endometrial carcinoma. European journal of obstetrics， gynecology， and reproductive biology， 2012，160（1）：74～78.

4 Merli Saare，Merit Lamp，Tanel Kaart，et al. Polymorphisms in MMP-2 and MMP-9 promoter regions are associated with endometriosis. Fertility and sterility， 2010，94（4）：1560～1563.

5 黃燕清，黃崢，孫玲，等.腹腔液基質金屬蛋白酶-1、-2、-3、-9與子宮內膜異位癥的相關性. 廣東醫學，2010，3l（4）：433～435.

6 鎖丙榮， 於建鵬. 異位內膜中明膠酶表達與子宮內膜異位癥（EMs）分期的相關性分析.醫學信息，2012，25（3）：195～196.

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