曾建濤 李泉 楊丹
(1.重慶市長壽區人民醫院;2.重慶市長壽區中醫院,重慶 401220)
梅毒螺旋體是一種密螺旋體,感染人體可引起梅毒。檢測梅毒螺旋體的方法很多,血清學實驗仍然是最主要的方法[1]。其中梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(TPPA)特異性和敏感性較高[2]。但TPPA試驗也存在一定的假陽性率,筆者于2014年7月收治1例TPPA 試驗假陽性的病例,現報告如下。
1.1 臨床資料 患者,男,44歲,主訴:梅毒復診。患者3年前在外院診斷為梅毒。
1.2 儀器與試劑(1)TPPA 試劑由富士瑞比歐株式會社生產,自身抗體譜試劑由歐蒙公司提供。(2)IgG、IgA、IgM、補體C3,C4、RF、ASO 和CRP 應用羅氏全自動生化分析儀檢測。
1.3 實驗方法 TPPA 試驗和自身抗體譜檢測嚴格按照試劑說明書操作。吸收試驗方法為:取未致敏粒子0.95mL至小試管中,加入患者血清50μL混勻,室溫放置30min。離心5min后,吸取上清液進行對倍稀釋。最后在第3 孔加入未致敏粒子25μL,第4孔加入致敏粒子25μL,振蕩混勻,室溫靜置2h后觀察結果。
TPPA 試驗未致敏孔顯示為陽性,致敏孔顯示為弱陽性(圖1),此結果表明TPPA 試驗受到干擾,結果為假陽性。吸收試驗結果顯示未致敏孔和致敏孔均為陰性(圖1),確定該患者TPPA 試驗為陰性。

圖1 TPPA 試驗結果
為研究TPPA 假陽性的原因,筆者對常見的干擾因素進行了分析。患者血清IgG 10.57g/L,IgA 2.08g/L、IgM 3.23g/L、補體C3 1.13g/L和補體C4 0.45g/L;RF 14.00IU/mL,ASO 41IU/mL,CRP 1.00mg/L;其中除IgM 升高外,其他結果均正常。檢測吸收試驗后的血清,換算后IgM 為3.19g/L,無明顯變化,表明干擾并非由IgM 引起。為排除自身免疫抗體的干擾,應用免疫印跡法對患者血清進行自身抗體譜的檢測,結果均為陰性。
梅毒是由梅毒螺旋體引起的一種性傳播疾病,TPPA 是針對梅毒特異性抗體的試驗,其原理為梅毒特異性抗體與包被在明膠顆粒上純化的梅毒螺旋體Nichols株發生凝集反應。
明膠顆粒是直徑3 μm 左右的球體。相比TPHA 試驗中用紅細胞做載體,明膠顆粒穩定性更好,免疫原性較弱,可減少非特異性反應的發生。
目前對引起明膠顆粒非特異性反應的物質并不十分清楚[3],文獻[4-5]報道的常見干擾因素有RF、Ds-DNA 和免疫球蛋白制劑等。本文檢測了常見的干擾因素,仍未找到真正原因。未找到干擾因素時可通過未致敏粒子提供的抗原表位對干擾物質進行吸收試驗,從而得到準確的實驗結果。
在明膠粒子凝集反應的其他試驗,包括肺炎支原體抗體、HIV 抗體等的檢測中,也存在類似的干擾。在臨床試驗中必須重視未致敏孔結果的觀察,才可避免錯誤報告的發生。
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