心脈康顆粒對(duì)腹主動(dòng)脈狹窄致心衰大鼠心臟血流動(dòng)力學(xué)的影響

陳玉興， 曾巧煌， 黃雪君， 曾曉會(huì)， 姚 楠， 黃丹娥， 甘海寧

（1.廣東省中醫(yī)藥工程技術(shù)研究院，廣東省中醫(yī)藥研究開發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東廣州510095；2.廣州中醫(yī)藥大學(xué)，廣東廣州510405）

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心脈康顆粒對(duì)腹主動(dòng)脈狹窄致心衰大鼠心臟血流動(dòng)力學(xué)的影響

陳玉興1， 曾巧煌2， 黃雪君1， 曾曉會(huì)1， 姚 楠1， 黃丹娥1， 甘海寧1

（1.廣東省中醫(yī)藥工程技術(shù)研究院，廣東省中醫(yī)藥研究開發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東廣州510095；2.廣州中醫(yī)藥大學(xué)，廣東廣州510405）

摘要：目的 觀察心脈康顆粒對(duì)腹主動(dòng)脈狹窄所致大鼠心力衰竭模型心功能的作用。方法 選用SD大鼠50只，采用腹主動(dòng)脈狹窄誘導(dǎo)法復(fù)制心衰大鼠模型，造模4周后隨機(jī)分為模型組，芪藶強(qiáng)心膠囊組，心脈康顆粒高、中、低劑量組，并另設(shè)假手術(shù)組（對(duì)照組），開始給藥，連續(xù)12周。然后，觀察各組大鼠左心室收縮壓（LVSP）、左室舒張末期壓（LVEDP）、左室等容期壓力變化速率峰值（±d p/d tmax）及大鼠血清中N-末端腦鈉肽前體（NT-pro BNP）、肌鈣蛋白I（cTnI）含有量，測(cè)定心臟指數(shù)。結(jié)果 心脈康顆粒明顯升高心衰大鼠LVSP和+d p/d tmax，以及LVEDP和-d p/ d tmax，降低心衰大鼠血清中NT-pro BNP、cTnI含有量和心臟指數(shù)。結(jié)論 心脈康顆粒具有明顯改善心衰大鼠心力衰竭的作用。

關(guān)鍵詞：心脈康顆粒；心力衰竭；血流動(dòng)力學(xué)

心力衰竭是各種心臟疾病導(dǎo)致心功能不全的一種綜合征，該病患病率高，死亡率高，五年存活率與惡性腫瘤相仿，且其患病率在近期內(nèi)仍將繼續(xù)增長(zhǎng)，是21世紀(jì)最重要的心血管病癥之一［1］。中醫(yī)認(rèn)為久病使心之氣陰不足或陽(yáng)氣受損，無(wú)力鼓動(dòng)血脈，從而使血脈瘀阻，而痰、水、瘀等病理產(chǎn)物又進(jìn)一步損及心之陰陽(yáng)，從而形成惡性循環(huán)，因而心衰多屬本虛標(biāo)實(shí)，氣虛、陽(yáng)虛為本虛；標(biāo)實(shí)以瘀血、水飲、痰濁居多［2］。心脈康顆粒由桂附理中丸加減而成，組方有人參、附子、肉桂、丹參、五味子、枳實(shí)、茯苓、羅布麻葉，具有益氣溫陽(yáng)、活血利水等功效，臨床用于氣虛血瘀型心衰的治療取得較好療效。本實(shí)驗(yàn)主要對(duì)心脈康顆粒的強(qiáng)心作用進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)觀察，為心脈康顆粒臨床治療心衰提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與儀器

1.1 藥品與試劑 心脈康顆粒，由人參、附子、肉桂、丹參、五味子、枳實(shí)、茯苓、羅布麻葉中藥飲片組成，由廣東省中醫(yī)研究所制劑室制備成顆粒劑提供使用，制劑折算成人日處方量24 g飲片，3.484 g飲片/g顆粒，批號(hào)20130316；芪藶強(qiáng)心膠囊（石家莊以嶺藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)130405）；ELISA Kit for Rat NT-pro BNP、ELISA Kit forRat cTnI（上海西唐生物科技有限公司，批號(hào)1210252、1210251）；水合氯醛（成都市科龍化工試劑廠，批號(hào)20120611）；肝素鈉注射液（江蘇萬(wàn)邦生化醫(yī)藥股份有限公司，批號(hào)1203129-B）。

1.2 動(dòng)物 SPF級(jí)SD大鼠，雄性，由廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)44007200002932。飼養(yǎng)于廣東省中醫(yī)研究所SPF級(jí)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室，批號(hào)SCXK（粵）2010-0059。1.3 儀器 JJ3000動(dòng)物電子秤（中國(guó)和恒儀器公司產(chǎn)品）；BS224S電子天平（萬(wàn)分之一，德國(guó)SARTORIUS產(chǎn)品）；HH-6數(shù)顯恒溫水浴鍋（金壇市富華儀器有限公司產(chǎn)品）；3K30離心機(jī)（德國(guó)SIGMA公司產(chǎn)品）；5424型小型高速離心機(jī)（德國(guó)Eppendorf公司產(chǎn)品）；-80℃超低溫冰箱（美國(guó)Thermo公司產(chǎn)品）；多導(dǎo)生理記錄儀（澳大利亞PowerLab公司產(chǎn)品）；Bio-RAD 680酶標(biāo)儀（美國(guó)伯樂公司產(chǎn)品）。

2方法

2.1 心衰大鼠動(dòng)物模型建立［3］取50只雄性SD大鼠，體質(zhì)量250～280 g，采用腹主動(dòng)脈縮窄法制作充血性心力衰竭大鼠模型。腹腔注射10％水合氯醛麻醉，無(wú)菌條件下于大鼠劍突下腹正中切口，逐層打開腹腔，小心在腎動(dòng)脈分支以上方0.5 cm處鈍性分離腹主動(dòng)脈，把針頭磨鈍的8號(hào)注射器緊貼平行置于腹主動(dòng)脈上，用4號(hào)手術(shù)絲線將腹主動(dòng)脈和注射器針頭一同結(jié)扎，然后小心將注射器針頭撤出，分層縫合腹腔。另取同批次大鼠10只作為假手術(shù)組，除不結(jié)扎外同法操作。術(shù)后予腹腔注射青霉素5 d預(yù)防感染。

2.2 動(dòng)物分組及給藥 造模4周后將50只造模大鼠按體質(zhì)量隨機(jī)分為5組，分為模型組，芪藶強(qiáng)心膠囊組，心脈康顆粒高、中、低劑量組，每組10只。芪藶強(qiáng)心膠囊劑量0.324 g/kg；心脈康顆粒高劑量1.24 g/kg、中劑量0.62 g/kg、低劑量0.31 g/kg，其中中劑量為臨床等效劑量，為成人用劑量的5.4倍。各給藥組按劑量灌胃給藥，假手術(shù)組、模型組給予蒸餾水，10 mL/kg灌胃，每天1次，連續(xù)給藥12周。

2.3 血流動(dòng)力學(xué)測(cè)定［4-6］給藥12周后，各組大鼠禁食不禁水12 h，稱重，并用10％水合氯醛經(jīng)腹腔注射麻醉，仰臥固定，消毒并鈍性分離左頸總動(dòng)脈約1 cm，在近心端處用動(dòng)脈夾夾緊，小心在動(dòng)脈管壁上剪一很小斜口，向心臟方向插入內(nèi)充滿肝素的導(dǎo)管，用手術(shù)線將動(dòng)脈壁與導(dǎo)管輕輕扎緊固定。松開動(dòng)脈夾繼續(xù)將導(dǎo)管緩慢插入，當(dāng)電腦屏幕波形由動(dòng)脈壓力波形變?yōu)樽笫覊毫Σㄐ螘r(shí)，停止插管，測(cè)量左室內(nèi)壓。8/30 PowerLab多導(dǎo)生理記錄儀系統(tǒng)記錄大鼠的左心室收縮壓（LVSP）、左室舒張末期壓（LVEDP）、左室等容期壓力變化速率峰值（±d p/d tmax）。

2.4 檢測(cè) 血流動(dòng)力學(xué)參數(shù)測(cè)定完成后，腹主動(dòng)脈取血測(cè)定大鼠血清中NT-pro BNP、cTnI含有量。取心臟，濾紙吸干血液，稱重，計(jì)算心臟指數(shù)（g/100 g）。

3 結(jié)果

3.1 對(duì)心力衰竭大鼠血流動(dòng)力學(xué)的影響 表1表明，與假手術(shù)組比較，模型組大鼠LVSP、+d p/d tmax明顯降低（P＜0.01），LVEDP、-d p/d tmax顯著升高（P＜0.01）。與模型組比較，心脈康顆粒組高、中、低劑量大鼠LVSP、+d p/ d tmax明顯上升（P＜0.01或P＜0.05），LVEDP、-d p/d tmax顯著降低（P＜0.01）。

表1　對(duì)心力衰竭大鼠血流動(dòng)力學(xué)的影響（±s，n=10）

表1　對(duì)心力衰竭大鼠血流動(dòng)力學(xué)的影響（±s，n=10）

注：與假手術(shù)組比較，**P＜0.01；與模型組比較，#P＜0.05，##P＜0.01

-d p/d tmax/ （mmHg.s-1）假手術(shù)組　　—　139.670±4.557　-11.188±2.367　 7 882.516±1 482.584　 -6 238.719±1 030.337模型組　　—　92.786±6.340**　9.925±3.492**　3 781.581±790.939**　-3 086.891±546.065**芪藶強(qiáng)心膠囊組　0.324　 115.250±16.105##　-0.673±5.627##　5 327.399±1 076.329#　-4 095.961±1 084.111#心脈康顆粒高劑量組　1.240　 121.247±14.074##　-5.816±4.019##　6 554.411±1 209.224##　-5 363.666±688.655##心脈康顆粒中劑量組　0.620　 112.299±10.550##　1.769±3.495##　5 119.781±1 641.030#　-4 014.076±423.682#心脈康顆粒低劑量組　0.310　 104.042±8.470#　6.508±4.002　 5 248.357±1 186.590#組別　　劑量/ （g.kg-1）　LVSP/mmHg　LVEDP/mmHg　+d p/d tmax/ （mmHg.s-1）-3 534.454±604.782

3.2 對(duì)心力衰竭大鼠血清NT-pro BNP、cTn I含有量及心臟指數(shù)的影響 表2表明，與假手術(shù)組比較，模型組大鼠NT-pro BNP、cTnI含有量明顯升高（P＜0.01），心臟指數(shù)明顯增大（P＜0.01）。與模型組比較，心脈康顆粒組高、中、低劑量大鼠NT-pro BNP、cTnI含有量明顯降低（P＜0.01 或P＜0.05），心臟指數(shù)明顯減小（P＜0.01或P＜0.05）。

4 討論

在中醫(yī)學(xué)中并無(wú)心力衰竭之名，根據(jù)心衰的臨床表現(xiàn)，本病當(dāng)歸屬于中醫(yī)學(xué)“水腫”、“喘證”、“心悸”、“痰飲”等范疇。本病是一個(gè)本虛標(biāo)實(shí)的病證，其中虛證以心氣虧虛、腎陽(yáng)不足為主，實(shí)證以水濕內(nèi)停、心脈瘀滯為主，臨床大多虛實(shí)夾雜［7］。治療心衰，應(yīng)采用益氣溫陽(yáng)藥為治絡(luò)強(qiáng)心之本，輔以活血通絡(luò)、利水消腫藥以治標(biāo)，代表性藥物如芪藶強(qiáng)心膠囊［8］。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為心力衰竭的發(fā)病原因主要是缺血性心肌病、風(fēng)心病、高心病、擴(kuò)張型心肌病、肺梗死、先心病、營(yíng)養(yǎng)代謝性心臟病等［9］。其機(jī)制為（1）機(jī)械-神經(jīng)內(nèi)分泌機(jī)制：心肌刺激是導(dǎo)致心肌肥厚的主要觸發(fā)機(jī)制之一；（2）氧化應(yīng)激反應(yīng)：在衰竭的心肌細(xì)胞中活性氧簇（ROS）的產(chǎn)生增加導(dǎo)致DNA和線粒體的損傷，進(jìn)而導(dǎo)致心肌細(xì)胞凋亡；（3）炎癥機(jī)制：通過(guò)促炎癥細(xì)胞因子參與心衰的發(fā)生發(fā)展；（4）細(xì)胞凋亡：與凋亡或程序性細(xì)胞死亡導(dǎo)致心肌細(xì)胞不可逆的丟失有關(guān)［10］。衛(wèi)生部藥政司所發(fā)《中藥新藥治療充血性心力衰竭的臨床研究指導(dǎo)原則》規(guī)定心衰的中醫(yī)分型為心肺氣虛證、氣陰兩虧證、心腎陽(yáng)虛證、氣虛血瘀證、陽(yáng)虛水泛證、痰飲阻肺證、陰竭陽(yáng)脫證等7個(gè)證型［11-12］。心脈康顆粒由具有益氣溫陽(yáng)、活血利水等功效的人參、附子、肉桂、丹參、五味子、枳實(shí)、茯苓、羅布麻葉組成，臨床用于氣虛血瘀證型心衰有較好效果。本次實(shí)驗(yàn)開展了心脈康顆粒對(duì)腹主動(dòng)脈狹窄所致大鼠實(shí)驗(yàn)性心衰心功能的作用研究，結(jié)果表明心脈康顆粒明顯升高心衰大鼠LVSP、+dp/dtmax數(shù)值，降低心衰大鼠LVEDP、-dp/dtmax數(shù)值，結(jié)果提示心脈康顆粒能有效改善心力衰竭大鼠的血流動(dòng)力學(xué)［13］。

NT-proBNP是腦鈉肽（BNP）的前體肽鏈結(jié)構(gòu)的氮末端產(chǎn)物，與BNP同屬鈉尿肽家族，為心臟分泌的肽類激素，在心衰的早期診斷中，廣泛應(yīng)用于心力衰竭的診斷、危險(xiǎn)分層，指導(dǎo)治療和判定預(yù)后的最強(qiáng)風(fēng)險(xiǎn)因子，NT-proBNP是更簡(jiǎn)單、方便、快捷的用來(lái)評(píng)價(jià)心功能的檢測(cè)方法，其升高對(duì)于心力衰竭的預(yù)測(cè)是一個(gè)很有價(jià)值的標(biāo)記物，反映出心力衰竭的嚴(yán)重程度，也是心力衰竭患者預(yù)后的重要標(biāo)志物［14-15］。cTnI是心肌組織特有的一種調(diào)節(jié)蛋白，當(dāng)心肌受損時(shí)游離型cTnI首先逸出細(xì)胞進(jìn)入血循環(huán)而被檢出，并隨心肌損傷加重，cTnI血清濃度逐漸升高［16］。升高程度與心衰程度成正比，與臨床指標(biāo)有著強(qiáng)相關(guān)性，并對(duì)預(yù)后的判斷有一定的價(jià)值［17］。

本實(shí)驗(yàn)研究顯示，心脈康顆粒明顯降低心衰大鼠NT-proBNP和cTnI含有量，降低心臟指數(shù)，提示心脈康顆粒可有效治療心力衰竭大鼠并改善其預(yù)后狀態(tài)。

本實(shí)驗(yàn)初步研究了心脈康顆粒的強(qiáng)心作用，其作用相關(guān)機(jī)制有待深入進(jìn)行。

表2　對(duì)心力衰竭大鼠血清NT-pro BNP、cTnI含有量及心臟指數(shù)的影響（±s，n=10）

表2　對(duì)心力衰竭大鼠血清NT-pro BNP、cTnI含有量及心臟指數(shù)的影響（±s，n=10）

組別　　劑量/ （g.kg-1）　NT-proBNP/（pg.mL-1）　cTnI/（ng.mL-1）　　心臟指數(shù)/ （g/100 g）假手術(shù)組　　—　35.267±10.906　128.162±9.008　0.367±0.042模型組　　—　141.177±16.166**　200.663±7.558**　0.455±0.031**芪藶強(qiáng)心膠囊組　0.324　88.364±35.622##　175.067±7.691##　0.400±0.028##心脈康顆粒高劑量組　1.240　78.702±38.222##　172.776±2.742##　0.407±0.020##心脈康顆粒中劑量組　0.620　92.529±48.840##　170.828±7.575##　0.397±0.025##心脈康顆粒低劑量組　0.310　102.193±39.156#　181.541±13.277##　0.422±0.033#

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作者簡(jiǎn)介：陳玉興（1971—），男，主任中藥師，主要從事中藥配方顆粒和中藥新藥的研發(fā)工作。Te1：（020）83576735，E-mai1：cyx89333@qq.com

基金項(xiàng)目：廣東省科技計(jì)劃立項(xiàng)資助項(xiàng)目（2010B030700021）

收稿日期：2014-09-24

doi：10.3969/j.issn.1001-1528.2016.01.041

中圖分類號(hào)：R285.5

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B

文章編號(hào)：1001-1528（2016）01-0176-03