3種方法檢測乙型肝炎病毒血清標志物的結(jié)果分析

白　潔，李桂霞，羅傳霞，趙紅斌，張全華△

(1.蘭州軍區(qū)總醫(yī)院安寧分院檢驗科，甘肅蘭州 730071；2.蘭州軍區(qū)總醫(yī)院骨研所，甘肅蘭州 730070)

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·臨床研究·

3種方法檢測乙型肝炎病毒血清標志物的結(jié)果分析

白潔1，李桂霞1，羅傳霞1，趙紅斌2，張全華1△

(1.蘭州軍區(qū)總醫(yī)院安寧分院檢驗科，甘肅蘭州 730071；2.蘭州軍區(qū)總醫(yī)院骨研所，甘肅蘭州 730070)

摘要:目的探討3種方法檢測血清乙型肝炎病毒(HBV)標志物的臨床意義。方法選取2014年8～12月蘭州軍區(qū)總醫(yī)院安寧分院430例門診體檢者和350例住院患者，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)、化學(xué)發(fā)光分析法(CLIA)及膠體金免疫層析法(以下簡稱“膠體金法”)分別進行乙型肝炎5項血清標志物和HBV前S1蛋白檢測，比較分析3種檢測方法檢測結(jié)果的差異。結(jié)果ELISA法、CLIA法及膠體金法檢出HBV血清標志物一項以上陽性者分別為634、663、553例，3種檢測方法陽性率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=0.035，P<0.05)；CLIA法檢出不同模式HBV血清標志物的陽性率高于ELISA法，但各HBV血清標志物陽性模式在不同方法中的陽性率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；CLIA法的檢測特異度與靈敏度均高于ELISA法，差異有計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論在HBV的3種檢測方法中，ELISA和CLIA法都極具優(yōu)勢，且CLIA法的檢測靈敏度與特異度較高，其檢測結(jié)果對臨床醫(yī)生提出有效的治療方案具有指導(dǎo)意義。

關(guān)鍵詞:乙型肝炎病毒；酶聯(lián)免疫吸附試驗；膠體金免疫層析法；化學(xué)發(fā)光分析法

乙型肝炎病毒(HBV)感染是我國主要的傳染性疾病之一，長期攜帶HBV可引發(fā)肝硬化、肝衰竭等病癥，嚴重時甚至危及感染者的生命[1]。因此，有效、快速、準確地檢測HBV是預(yù)防和控制乙型肝炎的有效途徑。隨著臨床診斷技術(shù)的不斷發(fā)展，現(xiàn)已有多種檢測方法應(yīng)用于HBV的檢測，其中應(yīng)用較廣的方法包括酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)、膠體金免疫層析法、化學(xué)發(fā)光免疫分析(CLIA)等。目前，醫(yī)院實驗室多采用CLIS或ELISA檢測HBV[2-3]。本文采用全自動酶聯(lián)免疫分析儀、膠體金免疫層析法(以下簡稱“膠體金法”)及全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀對780例體檢者的HBV和HBV前S1蛋白進行檢測，并對結(jié)果進行比較分析?，F(xiàn)報道如下。

1材料與方法

1.1標本來源選取2014年8～12月蘭州軍區(qū)總醫(yī)院安寧分院的430例門診體檢者和350例住院患者，以無抗凝劑的干燥真空管靜脈采血4 mL，分離血清后用3種方法分別檢測HBV和HBV前S1蛋白，排除脂血、溶血標本，以及其他傳染病等干擾因素。

1.2儀器與試劑采用的儀器為煙臺艾德康A(chǔ)DDCAER600全自動酶免分析儀，配套試劑為英科新創(chuàng)(廈門)科技有限公司生產(chǎn)的乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎病毒表面抗體(HBsAb)、乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)、乙型肝炎病毒e抗體(HBeAb)、乙型肝炎病毒核心抗體(HBcAb)、HBV前S1蛋白ELISA試劑盒；北京科美生物CHEMCLIN600全自動發(fā)光分析儀及其配套試劑；英科新創(chuàng)(廈門)科技有限公司生產(chǎn)的乙型肝炎5項檢測卡(膠體金法)及HBV前S1蛋白檢測試劑盒(膠體金法)；質(zhì)控品則為北京康徹思坦生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)產(chǎn)品。

1.3方法

1.3.1檢測方法采用ELISA、CLIA及膠體金法檢測血清標本的乙型肝炎5項血清標志物(HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb)及HBV前S1蛋白，試驗操作及結(jié)果判斷嚴格按試劑盒說明書的要求進行，檢測在2 d內(nèi)完成。

1.3.2檢測結(jié)果判定ELISA法：HBV前S1蛋白的樣品吸光度值/臨界值(S/CO)≥1判為陽性，S/CO<1判為陰性；HBsAg、HBsAb、HBeAg的S/CO≥1判為陽性，S/CO<1判為陰性；HBeAb、HBcAb的S/CO≤1判為陽性，S/CO>1判為陰性。膠體金法：HBsAg、HBsAb、HbeAg陽性在檢測線及對照線各出現(xiàn)一條紫紅色反應(yīng)線，陰性僅在對照線出現(xiàn)一條紫紅色反應(yīng)線；HBeAb、HBcAb陽性僅在對照線出現(xiàn)一條紫紅色反應(yīng)線，陰性在檢測線及對照線各出現(xiàn)一條紫紅色反應(yīng)線；HBV前S1蛋白陽性在檢測線及對照線各出現(xiàn)一條紫紅色反應(yīng)線，陰性僅在對照線出現(xiàn)一條紫紅色反應(yīng)線。CLIA法：HBsAg≥0.5 ng/mL、HBsAb≥0.5 ng/mL、HBeAg≥0.5 ng/mL、HBeAb≥0.77 U/mL、HBcAb≥4.57 U/mL判為陽性。

1.4統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計分析，計數(shù)資料以例數(shù)或百分率表示，采用χ2檢驗進行比較分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.13種方法檢測結(jié)果比較780例受試者標本ELISA法檢出HBV血清標志物一項以上陽性634例，陽性率為81.28%，全陰性146例；CLIA法檢出一項以上陽性663例，陽性率為85.00%,全陰性117例；膠體金法檢出一項以上陽性553例，陽性率為70.90%，全陰性227例；3種檢測方法陽性率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=0.035，P<0.05)。見表1。

表1　　3種方法檢測結(jié)果比較[n=780，n(%)]

表2　　3種方法檢測不同模式HBV血清標志物陽性率比較[n=780，n]

-：無數(shù)據(jù)。

表3　　ELISA與CLIA法的檢測效能比較(%)

*：P<0.05，與ELISA法的靈敏度比較；#：P<0.05，與ELISA法的特異度比較。

2.23種方法檢測不同模式HBV血清標志物陽性率比較3種方法均可檢測HBV血清標志物組合模式，膠體金法檢測模式最少，CLIA法檢出陽性率高于ELISA法，但各HBV血清標志物陽性模式在不同方法中的陽性率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

2.3ELISA與CLIA法的檢測效能以膠體金法檢測結(jié)果為標準，分析ELISA與CLIA法的檢測靈敏度、特異度和符合率，結(jié)果顯示CLIA法的靈敏度和特異度均高于ELISA法，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

3討論

乙型肝炎是我國法定乙類傳染病，具有傳染性強、感染率高等特點[4]，且易感者多為青壯年和兒童，若未得到及時有效的診斷，極易轉(zhuǎn)化為肝硬化甚至肝癌，嚴重危害患者的身體健康，對人類的生命造成嚴重威脅[5]。因此，亟需一種簡單、準確、快速的檢測方法為臨床治療提供可靠依據(jù)。本文對臨床應(yīng)用較普遍的3種方法進行比對，結(jié)果顯示，ELISA法檢出HBV血清標志物一項以上陽性634例，陽性率為81.28%，全陰性146例；CLIA法檢出一項以上陽性663例，陽性率為85.00%,全陰性117例；膠體金法檢出一項以上陽性553例，陽性率為70.90%，全陰性227例；3種檢測方法陽性率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=0.035，P<0.05)，膠體金法檢測陽性率稍低，其余兩種方法中CLIA法陽性率略高于ELISA法。

在目前的檢測技術(shù)中，全自動酶免分析儀的應(yīng)用實現(xiàn)了免疫檢測自動化，具有靈敏度高、檢測快速、結(jié)果穩(wěn)定、零污染、試劑穩(wěn)定性好、效率高及應(yīng)用范圍廣等優(yōu)點[6]。膠體金法具有簡單、快速、方便、實用、無污染等優(yōu)點，但成本較高，且用膠體金法檢測時若濃度低會出現(xiàn)先陰后陽的現(xiàn)象。另外，作為一種定性檢測方法，該方法不能準確反映HBV的濃度變化[7]，且靈敏度低。CLIA法是將化學(xué)發(fā)光或生物發(fā)光體系與免疫反應(yīng)相結(jié)合，用于檢測微量抗原或抗體的一種新型標記免疫測定技術(shù)，其靈敏度和可測范圍遠遠高于ELISA法，且操作簡便、反應(yīng)時間短、結(jié)果穩(wěn)定、誤差小、安全性好[8]。本研究顯示，3種方法均可檢測HBV血清標志物組合模式，膠體金法可檢測模式最少，CLIA法檢出陽性率高于ELISA法，但各HBV血清標志物陽性模式在不同方法中的陽性率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。這可能與CLIA法靈敏度較高有關(guān)，低濃度HBsAb亦可以檢測出來；而ELSIA法只能對高濃度的HBsAb進行檢測。此外，以膠體金法檢測結(jié)果為標準，分析ELISA及CLIA法的檢測效能，結(jié)果顯示CLIA法的靈敏度和特異度均高于ELISA法，表明通過CLIA法檢測可以減少漏檢。

綜上所述，3種方法在HBV血清學(xué)檢測中比較，CLIA法具有更高的優(yōu)越性，可明顯提高HBV陽性檢出率，并能準確地進行定性和定量分析。因此，CLIA檢測結(jié)果具有重要的價值，可以為臨床醫(yī)生作出有效治療方案提供指導(dǎo)，并可早期發(fā)現(xiàn)疾病的發(fā)生，從而更好地為臨床提供診斷依據(jù)，具有廣闊的發(fā)展?jié)摿Α?/p>

參考文獻

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(收稿日期：2015-10-10)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.05.039

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)05-0666-03

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