P16與Ki67的表達在子宮頸病變診斷中的應用

樂桂花福建省三明市第二醫(yī)院病理科，福建三明　366000

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P16與Ki67的表達在子宮頸病變診斷中的應用

樂桂花
福建省三明市第二醫(yī)院病理科，福建三明366000

［摘要］目的探究P16與Ki67的表達在子宮頸病變診斷中的應用。方法 采用回顧性分析的方法，選取2014年8月—2015年12月期間在該院婦科進行治療的90例子宮頸病變患者作為該研究的對象，其中30例為低級別鱗狀上皮內病變（LSIL）（包括CINI，扁平濕疣，尖銳濕疣），30例為高級別鱗狀上皮內病變（HSIL）（CINII10例，CINIII20例）、30例子宮頸良性反應性病變（包括不成熟鱗化，上皮萎縮，修復性上皮增生）患者，采用免疫組化SP法對這90例患者的P16以及Ki67表達情況進行檢測分析。結果經過HE染色分析，可以發(fā)現Ki67表達陽性細胞在宮頸鱗狀上皮中的位置分布與子宮頸上皮內瘤變有著一定的相關性，LSIL多分布于下1/3的位置，CINII多分布于下1/3～2/3的位置，而CINIII多分布于＞2/3位置，子宮頸良性反應性病變分布于下1/3的基底和副基底層；P16的表達水平在LSIL、HSIL、子宮頸良性反應性病變中的差異有統(tǒng)計學意義（P=0.021＜0.05）。且P16的表達水平與子宮頸上皮內瘤變的級別呈現出正相關的關系，差異有統(tǒng)計學意義（P=0.013＜0.05）。結論P16與Ki67的表達可水平可用于子宮頸良性反應性病變的甄別，還與子宮頸上皮內瘤變的進展聯(lián)系密切，對P16以及Ki67表達水平的聯(lián)合檢測能夠幫助子宮頸病變診斷，可以在臨床醫(yī)學中得以廣泛的推廣應用。

［關鍵詞］P16；Ki67；子宮頸病變；診斷；應用

作為臨床醫(yī)學中一種常見的婦科惡性腫瘤疾病，子宮頸癌嚴重威脅著人們的生命健康，且近年來呈現出逐年增多的趨勢，并向年輕化發(fā)展。目前，臨床醫(yī)學中對子宮頸癌的治療效果并不理想，因此，對育齡期婦女開展子宮頸病變組織活檢以及常規(guī)的病理學檢查顯得極為重要，能夠促進早發(fā)現、早識別，輔助確診、預后判斷以及個體化的治療。Ki67及P16能夠提高子宮頸上皮內瘤變患者的鑒別診斷，在臨床醫(yī)學中具有較高的應用價值。為了探究P16與Ki67的表達在子宮頸病變診斷中的應用，選取2014年8月—2015年12月期間該院90例子宮頸病變患者進行研究分析，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

此次研究選取該院收治的90例子宮頸病變患者，年齡在27～64歲之間，平均年齡為（41.4±3.2）歲，病程為3個月～4年，平均病程為（2.5±1.2）年，患者經過標本檢測分析，對其進行編號，按照患者的病情類型對其進行相應的分組，其中子宮頸良性反應性病變患者為30例，低級別上皮內瘤變?yōu)?0例，高級別上皮內瘤變30例（10例為CINII級，20例為CINIII級），患者的標本均采用10%的甲醛溶液進行處理，并用石蠟進行包埋。所有患者均符合子宮頸病變的臨床診斷標準，所有患者來自該院門診和住院部，使用患者的各種資料時，均經過患者的知情同意以及倫理委員會的批準。其在年齡、病程、文化程度等方面的指標差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），可進行比較分析。

1.2 方法

首先，對這90例患者的標本進行連續(xù)切片，厚度以3～4 um為宜，每一個標本制作3張，分別進行P16標記、Ki67標記以及HE染色對照。然后采用pH6.1的枸櫞酸鹽緩沖液修復患者的抗原，然后采用微波加熱。采用SP法對患者的切片樣本進行診斷分析，并用DAB實施染色。已經檢測的陽性片可作為對照。在進行P16 與Ki67診斷時，要嚴格按照相關的規(guī)定，保障檢測結果的正確性。

1.3 判斷標準

P16的陽性表達主要集中在細胞核與細胞質部位，且呈現出棕黃色的顆粒形態(tài)。P16陽性為上皮彌漫連續(xù)性表達（鱗狀上皮基底和副基底細胞連續(xù)性表達，表層細胞有或沒有表達；整個腺體表達這兩種情況），沒有表達、鱗狀上皮或腺體局灶性表達為陰性。Ki67則主要位于細胞核，呈現棕黃色顆粒形態(tài)表示為陽性，采用的計數方式，陽性細胞＜10%而且分布在基底層和副基底層為-，陽性細胞數在11%～30%之間為+，31%～50%則為++，高于50%則為+++。Ki67的陽性表達，+表示低表達，++/+++則表示高表達［3］。

1.4 統(tǒng)計方法

該次研究用SPSS 17.0統(tǒng)計學軟件進行統(tǒng)計學分析，所用的計數資料用（n，%）來表示，進行X2檢驗。

2 結果

2.1 P16在不同子宮頸病變患者中的表達

經過檢測分析，30例子宮頸良性反應性病變患者的P16表達全部呈現為陰性，且在不同的子宮頸上皮內瘤變等級中的陽性表達分別為40%、90%、100%，不同級別差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。且P16的表達情況與上皮內瘤變級別呈現正相關的關系。見表1。

表1 P16在不同子宮頸病變患者中的表達［n（%）］

2.2 Ki67在不同子宮頸病變患者中的表達及位置分布

Ki67在LSIL中呈現陰性的有2例，呈現+陽性的為14例，++為6例，+++為8例，總陽性率為28例，占93.3%；CINII10例均呈現陽性，陽性率為100%，且+為5例，++為3例，+++為2例；CINIII20例均呈現陽性，陽性率為100%，其中+為12例，++為4例，+++為4例.不同子宮頸上皮內瘤變級別中陽性表達差異比較明顯，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。Ki67表達陽性細胞在LSIL中有23例位于下1/3，5例位于下1/3～2/3，2例位于＞2/3位置；在CINII中有1例位于下1/3，8例位于下1/3～2/3，1例位于＞2/3位置；在CINIII中3例位于下1/3～2/3，17例位于＞2/3位置，而30例子宮頸良性反應性病變患者中有28例表達在下1/3的基底和副基底層，其位置分布與子宮頸上皮內瘤變有著一定的相關性。見表2、表3。

表2 Ki67在不同子宮頸病變患者中的表達［n（%）］

表3 Ki67在不同子宮頸病變患者中的位置分布［n（%）］

3 討論

隨著我國社會主義現代化建設的不斷發(fā)展，我國的醫(yī)療衛(wèi)生水平得到了極大的提升。宮頸癌作為一種嚴重的婦女癌疾病，威脅著患者的生命安全，且經過異型增長，可發(fā)展成為原位癌，使患者的病情出現惡化。宮頸癌疾病受多種基因表達的影響，目前臨床醫(yī)學中對子宮頸上皮內瘤變進行深入研究，并取得了一定的研究成果，P16、Ki67的表達與子宮頸上皮內瘤變有著密切的相關性。P16能夠直接參與人體的細胞調控，有效控制細胞的分裂、增殖，可以將其作為一種抗癌基因，它位于染色體部位，能夠對癌細胞進行抑制，降低癌細胞的擴散；而Ki67則能夠對細胞的增值程度進行有效反映，在臨床醫(yī)學中，用于檢驗各種惡性腫瘤，有一定的應用價值。

該研究，對P16、Ki67表達進行了深入分析，發(fā)現Ki67表達與子宮頸良性反應性病變、LSIL、HSIL有著明顯的差異（P＜0.05）。子宮頸良性反應性病變的陽性率為6.7%，LSIL的陽性率達到93.3%，CINII與CINIII陽性率達到了100%；且Ki67在其病變的位置分布不同：子宮頸良性反應性病變主要在上皮基底層和副基底層、LSIL主要在下1/3、CINII主要在下1/3～2/3、CINIII子主要在＞2/3。P16基因在子宮頸良性反應性病變中呈陰性表達，而且P16基因表達與不同級別子宮頸上皮內瘤變之間也有著明顯差異，級別越高，P16的表達就越強，呈現出正相關的關系。以往醫(yī)學研究的結論在以往的文獻報道中，P16在人類其他組織惡性疾病中呈現低表達的現象，僅為55.3%，有學者認為，P16會隨著CIN級別的升高而出現表達增加的現象，系高危型HPV感染引起了宮頸上皮細胞內P16抑癌基因表達負反饋調節(jié)失控所致，提示細胞周期出現嚴重紊亂，癌前病變的幾率在增加。因此，對P16與CIN準確分型關系的檢測對宮頸癌的早期預警與防治有著重要的臨床意義。該研究中還充分采用了免疫組化技術分析了不同類型CIN宮頸活檢組織中的P16以及Ki67的表達情況，這為宮頸癌前病變的早期預警提供了比較可靠的輔助診斷依據。另外，該研究中通過涂3%冰醋酸方法也能夠提升對患者宮頸病變取材的準確性，進而保證診斷結果的準確性與有效性，確保對患者采取合適的方法進行治療。

綜上所述，P16與Ki67的表達水平可用于子宮頸良性反應性病變的甄別，還與子宮頸上皮內瘤變的級別有著密切的聯(lián)系，可以作為臨床醫(yī)學中可靠的診斷依據，有利于對子宮頸上皮內瘤變患者早發(fā)現、早治療，值得參考借鑒。

［參考文獻］

［1］汪勤，解正新，張衛(wèi)琴. p16、p53和Ki-67蛋白在子宮頸上皮內瘤變中的表達及意義［J］.臨床與實驗病理學雜志，2013 （5）：551-553.

［2］徐本群，馬娟，周瓊，等.P16與Ki67的表達在子宮頸上皮內瘤變組織學診斷與分級中的臨床意義［J］.安徽醫(yī)藥，2013 （9）：1540-1542.

［3］劉濤，何麗超，李竹琴. p16蛋白和Ki67抗原標記指數表達在宮頸上皮內瘤變中的診斷價值［J］.中國腫瘤臨床與康

復，2013（2）：119-121.

［4］叢玲華，戴珍珍，方來福，等.EGFR、P16、Ki67和P53在宮頸鱗狀上皮內瘤變和宮頸鱗狀細胞癌中表達的臨床意義［J］.中國現代醫(yī)生，2013，51（2）：87-90.

［5］郭宇雯，吳正升，張和平，等.子宮頸上皮內瘤變及子宮頸癌組織中p16和TLR3的表達及意義［J］.臨床與實驗病理學雜志，2015（5）：502-505.

［6］閆婕，吳潔，袁軍華，等. ER、PR、Ki67、HER-2、P53在中青年女性乳腺癌中的表達及臨床意義［J］.中外醫(yī)療，2015， 34（16）：11-12，15.

［7］張燕，羅政權，杜秀杰，等. XAF1、CHD5和Ki67在卵巢腫瘤漿液性腺癌中表達的臨床意義及與預后的關系［J］.中外醫(yī)療，2013，32（16）：38-39.

［8］鄧鵬飛，左艷，黎華文，等.p16及Ki-67蛋白在宮頸上皮內瘤變中的臨床檢測意義［J］.中國醫(yī)學創(chuàng)新，2013（8）：132-133.

Application of the Expression of P16 and Ki67 in Diagnosis of Cervical Lesions

LE Gui-hua
Department of Pathology，the Second Hospital of sanming city，sanming Fujian Province，366000 China

［Abstract］Objective To discuss the application of the expression of P16 and Ki67 in diagnosis of cervical lesions. Methods90 cases of patients with cervical lesions treated in the department of gynaecology of our hospital from August 2014 to December 2015 were selected as the research object by the retrospective analysis method，among them，30 cases were lowgrade squamous intraepithelial lesion（including CINI，condyloma，condyloma acuminatum），30 cases were high-grade squamous intraepithelial lesion（10 cases were CINII，20 cases were CINIII），30 cases were benign reactive lesions of cervix（including immature squamous metaplasia，epithelial atrophy，reparative epithelial hyperplasia），the expression of P16 and Ki67 of the 90 cases of patients was detected and analyzed by SP immunohistochemical technique. Results The HE staining analysis discovered that the location distribution of Ki67 expression positive cells in the cervical squamous epithelium had a certain correlation with the cervical intraepithelial neoplasia，LSIL was more distributed in the location of lower 1/3，CINII was more distributed in the location of lower1/3～2/3，but CINIII was more distributed in the location＞2/3，the benign reactive lesions of cervix was distributed in the base of lower 1/3 and parabasal layer，the difference of the expression of P16 in the LSIL，HSIL and benign reactive lesions of cervix reached 0.021 with statistical significance，and the expression level of P16 had a positive correlation with cervical intraepithelial neoplasia levels and the difference value was 0.013 with statistical significance. Conclusion The expression levels of P16 and Ki67 can be used to discriminate the benign reactive lesions of cervix and have a close correlation with the evaluation of the cervical intraepithelial neoplasia，the combined detection of the expression levels of P16 and Ki67 contributes to the diagnosis of cervical lesions，which can be widely promoted and applied in the clinical medicine.

［Key words］P16；Ki67；Cervical lesion；Diagnosis；Application

［中圖分類號］R737.33

［文獻標識碼］A

［文章編號］1674-0742（2016）04（a）-0046-04

［作者簡介］樂桂花（1976.6-），女，福建沙縣人，本科，主治醫(yī)師，主要從事病理診斷工作。

DOI：10.16662/j.cnki.1674-0742.2016.10.046

收稿日期：（2016-01-03）