六味葛藍降脂片大鼠30d喂養試驗研究

羅宇東++++++蔣林++++++朱智德++++++陳洪濤

[摘要] 目的 通過大鼠30 d喂養試驗，探討六味葛藍降脂片的安全性。 方法 選取80只大鼠，隨機分為3個劑量組和1個對照組（共4組），每組20只，雌、雄各10只。劑量組給予15.0、10.0、5.0 g/（kg·BW）的劑量（人體可能攝入量的150、100、50倍），對照組灌服等體積蒸餾水，每天灌胃1次，連續30 d后對大鼠各項指標進行觀察。 結果 各劑量組與對照組在試驗過程中均生長良好，無死亡，未發現異常體征。各劑量組的體重增長率、食物利用率、血液學指標、血液生化指標、臟/體比值等指標與對照組比較，差異無統計學意義（P>0.05）。 結論 在本實驗的劑量范圍內，六味葛藍降脂片大鼠30 d喂養未見短期的毒副作用。

[關鍵詞] 六味葛藍降脂片；毒理學安全性；實驗研究

[中圖分類號] R-332 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-4721（2016）03（c）-0015-04

[Abstract] Objective To explore the safety of Liuwei Gelan Lipid-decreasing tablet by 30-day feeding in rats. Methods 80 rats were selected and randomly divided into 3 groups with dosages and the control group.Male and female rats were equally divided.In these dosage groups，15.0，10.0 and 5.0 g/（kg·BW） were provided，which were 150，100 and 50 times of dosages taken by human body.In the control group，the same volume of distilled water was supplied.Gavage was performed once per day.The each index from rats was observed and tested after 30 continuing days of experiment. Results Rats were all well grown without death in the process of experiment in the control group and each dosage group.No abnormal sign was detected.There was no significant difference in the weight growth rate，food utilization rate，haematological inde，hematologic and biochemical indices，viscera/body ratio between these among 3 dosage groups and the control group （P>0.05）. Conclusion Within dosages tested in the experiment，no short-term toxic and side effect is detected after 30-day feeding in rats by Liuwei Gelan Lipid-decreasing tablets.

[Key words] Liuwei Gelan Lipid-decreasing tablet；Toxicological safety；30-day feeding

高脂血癥（hyperlipaemia，HLP）是一種常見病、多發病，常誘發冠心病、動脈硬化、脂肪肝、糖尿病、肥胖等癥，嚴重危害人類的身體健康。隨著人們生活水平的不斷提高和社會人口老齡化，高脂血癥的發病率呈明顯上升和年輕化趨勢。目前，用于治療高脂血癥的西藥（如他汀類、貝特類、阿而莫司類、煙酸類、膽酸螯合劑等）因起效快且療效肯定而受到大家的青睞，但是西藥存在靶點單一、降脂作用單一及不同程度的毒副作用等局限性。中醫在治療高脂血癥、防止心腦血管疾病發生等方面有著多藥理活性、多靶點、多環節協調綜合降脂的獨特優勢，其療效肯定、持續，副作用小[1-11]。六味葛藍降脂片為廣西中醫藥大學制藥廠擬開發的具有輔助降血脂功效的保健食品，處方遵循中醫藥君臣佐使的配伍原則，由絞股藍、西洋參、枸杞子、決明子等藥食同源藥材配伍而成，具有益氣健脾、升發清陽、除濕化痰、降濁消脂之功效。本研究前期對六味葛藍降脂片開展了急性毒性及遺傳毒性的研究，現進行大鼠30 d喂養試驗，旨在為其保健食品安全性提供依據。

1 材料與方法

1.1 樣品與試劑

六味葛藍降脂片為棕褐色片劑，2 g/片，每片相當于藥材量7 g，按人體每天的推薦服用量（2片/次，2次/d）計算，折合劑量為100.0 mg/（kg·BW）。產品來源于廣西中醫藥大學制藥廠。

1.2 試驗儀器

XFS-280壓力蒸汽滅菌器（浙江新豐醫療器械有限公司）、LRH-250生化培養箱（上海一恒科學儀器有限公司）、JY501電子天平（上海浦春計量儀器有限公司）、HH-6數顯恒溫水浴鍋（常州澳華儀器有限公司）、101-1恒溫電熱鼓風干燥箱（天津市泰斯特儀器有限公司）、RE501旋轉蒸發儀（鞏義市予華儀器有限公司）、SW-CJ-2D超凈工作臺（上海新苗醫療器械制造有限公司）。

1.3 動物來源

清潔級SD大鼠由廣西醫科大學實驗動物中心提供，合格證號：SCXK桂2014-0002。

1.4 實驗方法[12-17]

1.4.1 受試物給予方式與劑量選擇 選取80只SD大鼠，隨機分為3個劑量組和1個陰性對照組（共4組），每組20只，雌、雄各10只。劑量組按高、中、低劑量分別給予15.0、10.0、5.0 g/（kg·BW）的劑量（分別相當于人體推薦劑量的150、100、50倍），對照組灌服等體積蒸餾水。各組大鼠每天灌胃1次（1.0 ml/100 g體重），連續30 d。

1.4.2 實驗方法 大鼠在實驗期間自由飲水攝食，單籠飼養，給予普通飼料。每天觀察并記錄動物的一般表現、行為、中毒表現和死亡情況，每周稱1次體重和2次食物攝入量，計算食物利用率。實驗結束時，各組大鼠過夜禁食，次日稱量空腹體重后，檢測血常規（WBC、RBC、Hb及其分類、PLT等）及血液生化指標（血清ALT、AST、BUN、Cr、TC、TG、GLU、TP、ALB等項目）。采血后對動物進行解剖觀察，取腎臟、肝臟、睪丸和脾臟等臟器稱重，計算臟/體比值。

1.5 統計學處理

采用SPSS 18.0統計學軟件對數據進行分析，計量資料以x±s表示，計數資料采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 大鼠的一般情況

實驗期間，各組動物未觀察到中毒表現和異常行為，動物均生長良好，無死亡。

2.2 各劑量組每周體重的比較

六味葛藍降脂片各劑量組雌雄鼠的每周體重與對照組比較，差異無統計學意義（P>0.05）（表1），提示該樣品對大鼠的生長發育無顯著影響。

2.3 各劑量組總增重、總進食量及總食物利用率的比較

六味葛藍降脂片各劑量組雌雄鼠的總增重、總進食量及總食物利用率與對照組比較，差異無統計學意義（P>0.05）（表2），提示該樣品對大鼠的生長發育無顯著影響。

2.4 各劑量組血常規指標的比較

六味葛藍降脂片各劑量組雌、雄大鼠的血液學指標與對照組比較，差異無統計學意義（P>0.05）（表3），提示該樣品對大鼠的血液學指標無顯著影響。

2.5 各劑量組血液生化指標的比較

六味葛藍降脂片各劑量組雌、雄性大鼠的血液生化指標與對照組比較，差異無統計學意義（P>0.05）（表4），提示該樣品對大鼠的血液生化指標無顯著影響。

2.6 各劑量組臟器/體重比值的比較

六味葛藍降脂片各劑量組雌、雄性大鼠的肝/體、腎/體、雄鼠睪/體、脾/體比值與對照組比較，差異無統計學意義（P>0.05）（表5），提示該樣品對大鼠的臟器無明顯影響。

3 討論

高脂血癥是誘發冠心病、動脈粥樣硬化等疾病的首要因素。近年來的研究顯示，中藥治療高脂血癥療效確切，毒副作用小，復發率低。中藥可通過多層次、多環節、多靶點、多部位的綜合作用調節人體的各種生理平衡，從而達到治療高脂血癥的目的。根據祖國傳統醫學辨證論治理論，應用中藥復方制劑或單味藥治療高脂血癥具有廣闊的市場前景[18-21]。六味葛藍降脂片是利用藥食同源藥材研究開發的輔助降血脂的保健食品，該產品充分發揮中醫辨證論治的特色，遵循中藥君臣佐使配伍原則，具有益氣健脾、升發清陽、除濕化痰、降濁消脂之功效，通過調節機體的代謝機制，達到多靶點、多環節整體協調降血脂的功能。本實驗前期考察了六味葛藍降脂片對小鼠的急性毒性及遺傳毒性作用，試驗結果為三項遺傳毒性試驗（小鼠精子畸形試驗、小鼠骨髓細胞微核試驗、Ames試驗）陰性，急性經口毒性屬無毒級。大鼠30 d喂養試驗作為《食品安全性毒理學評價程序和方法》第二階段毒性試驗的主要內容之一，應用日益廣泛。本實驗對六味葛藍降脂片進行大鼠30 d喂養試驗，以15.0、10.0、5.0 g/kg體重的劑量（分別相當于人體推薦劑量的150、100、50倍）連續對大鼠灌胃30 d，結果顯示，各劑量組與對照組大鼠在實驗過程中均生長良好，無死亡，未發現異常體征；各劑量組的體重增長率、食物利用率、血液學指標、血液生化指標、臟/體比值等指標與對照組比較，差異無統計學意義（P>0.05），提示在本實驗的劑量范圍內，六味葛藍降脂片大鼠30 d喂養未見短期的毒副作用。

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（收稿日期：2015-10-20 本文編輯：祁海文）