兩種材料復合用于犬前牙拔牙位點保存的實驗研究

康立勛　高艷宇黑龍江省醫院口腔種植中心，黑龍江哈爾濱　150036

兩種材料復合用于犬前牙拔牙位點保存的實驗研究

康立勛高艷宇
黑龍江省醫院口腔種植中心，黑龍江哈爾濱150036

目的 探討前牙拔牙位點即刻保存中重組合異種骨（reconstituted bone xenograft，RBX）與羥基磷灰石生物陶瓷復合物的作用。方法 比格犬共6只，隨機分為A、B、C組，每組各2只。所有動物拔除上頜全部第二切牙后，三組采用不同的實驗方法，A組應用RBX與羥基磷灰石生物陶瓷復合物，B組僅應用羥基磷灰石生物陶瓷，C組為對照組，術后4周每組各處死1只犬，12周每組再處死1只犬，觀察大體標本、形態學測量以及CT檢查評價拔牙窩愈合情況。結果 三組犬4、12周時唇舌側牙槽嵴寬度差值比較差異均有統計學意義（P＜0.05），A組差值最小；4周與12周時拔牙窩唇側骨吸收程度A組阻止牙槽骨吸收效果最好，B組次之，C組最差；12周時A組唇側牙槽嵴高度差值比較優于B組和C組（P＜0.05）；術后4周與12周CT值與術前CT值之差A組均高于B組和C組（P＜0.05）。結論 RBX與羥基磷灰石生物陶瓷復合物聯合應用，可減緩牙槽嵴吸收，促進新生骨形成，具有保存拔牙位點的作用，可作為良好的新型復合骨移植材料。

重組合異種骨；羥基磷灰石生物陶瓷；位點保存；犬

［Abstract］Objective To discuss the function of RBX（reconstituted bone xenograft）and hydroxyapatite bioceramics complexes in the instant preservation of anterior extraction sockets.Methods Six beagle dogs were divided into group A，group B and group C，with 2 dogs in each group.After the extraction of both maxillary incisors，group A was immediately implanted RBX/hydroxyapatite bioceramics complexes，group B was implanted coralline hydroxyapatite，and group C was blank control.One dog from each group was sacrificed 4 weeks later and the other dog was sacrificed 12 weeks later to prepare tissue samples.The healing of extraction soket was evaluated by gross observation，morphological measurements and photographs of cone beam CT.Results There were significant differences in the labial-lingual alveolar ridge width difference among these three groups both 4 and 12 weeks later（P＜0.05），and the smallest difference of labial-lingual width was in group A.In 4 and 12 weeks，the re-absorption in extraction area bone was the best in group A，followed by group B，and was the worst in group C.The labial alveolar bone height difference was better in group A than that in group B and group C in 12 weeks（P＜0.05）.The difference between postoperative cone beam CT value and preoperative cone beam CT value was higher in group A than that in group B and group C in 4 and 12 weeks （P＜0.05）.Conclusion RBX/hydroxyapatite bioceramics complex can be used as a new material in the field of bone graft which can slow the absorption of alveolar ridge，promote new bone formation，and save the tooth extraction sites.

［Key words］RBX；Hydroxyapatite bioceramics complexes；Site preservation；Dogs

種植義齒是修復牙列缺失的重要方式，已被越來越多的患者所認可。牙齒種植可以為義齒提供理想的支撐，使義齒更加穩固，提高了咀嚼效率，而且具有無需磨削基牙、舒適等優點；同時，種植義齒還可恢復發音，滿足患者對口腔美學的期盼。但種植義齒修復需要有足夠的骨量和良好的骨質，才能實現種植體的長期穩定性，由于拔牙后自然愈合的拔牙窩發生的骨吸收可能導致種植區的骨量不足，在上頜前牙美學區域尤為明顯［1-3］。針對種植區骨量不足這一困擾口腔種植醫生的棘手問題，本研究應用RBX聯合羥基磷灰石生物陶瓷對犬拔牙位點保存進行動物實驗研究，現報道如下。

1　材料與方法

1.1實驗動物

比格犬6只，雄性，體重11～15 kg，隨機分為三組，每組各2只。實驗犬由哈爾濱醫科大學實驗動物部提供，許可證編號：SCXK（黑）2013-001。

1.2儀器與材料

重組合異種骨（reconstituted bone xenograft，RBX，天津中津生物發展有限公司提供）由牛骨形態發生蛋白（bone morphogenetic protein，BMP）重組合而成，海奧口腔修復膜（煙臺正海生物技術有限公司），鈦釘（西安中邦），微創拔牙器械、不可吸收縫線，LEICA型鋸割切片機（德國），DPCX-L型雙能X線骨密度儀（Lunar公司），800型沉淀離心機（上海手術器械廠）。

1.3RBX與羥基磷灰石生物陶瓷復合物材料的制備

安靜狀態下對A組中1只犬頸外靜脈采血20 mL，置于標記好的2支抗凝離心管中，于無菌室內以500 r/min的速度，離心10 min，離心后血液分為3層，中間層置于無菌紗布上，將水分吸干，將其中的一份細小的碎片，與羥基磷灰石生物陶瓷顆粒充分混合；另外一份輕輕擠壓成膜狀，即為RBX膜。

1.4手術過程［4］

比格犬取仰臥位，應用速眠新肌肉注射（0.1 mL/ kg），術區常規消毒，鋪無菌巾，分離牙齦，拔牙鉗拔除上頜左右第二切牙（圖1A），參考平面設定為上頜第一前磨牙切緣所在的平面，分別測定高度值及寬度值。高度值設定為各牙槽窩唇側嵴中點至參考平面的距離；寬度值設定為各牙槽窩唇、舌側嵴中點的距離［5］，拍攝X線測量垂直方向的骨密度。所有拔牙位點均用刮匙搔刮干凈，生理鹽水沖洗，修整軟組織邊緣，A組植入RBX復合植骨材料（圖1B），B組植入羥基磷灰石生物陶瓷，C組為空白對照組。三組位點均嚴密縫合，覆蓋海澳膜以保護全部拔牙位點。

1.5觀察指標

術后4周三組均處死1只犬，12周時再處死另一只犬。觀察：①肉眼觀察術區創口愈合情況，有無感染、裂開；②形態學觀察牙槽嵴的高度及寬度；③CBCT測定骨密度。由同一位醫生實施測量工作，每一位點至少重復測量5次取平均值［6］。

1.6統計學處理

采用SPSS17.0統計學軟件進行分析，計量資料以均數±標準差（x±s）表示，比較采用t檢驗；三組拔牙創CT值比較采用方差分析，P＜0.05為差異有統計學意義。

2　結果

2.1大體觀察

肉眼觀察術區創口愈合良好，無感染、裂開。4周時，A組探測牙槽嵴質地較韌，B組同A組感覺相似，C組探測較軟，可見骨壁凹陷。12周時，各組新生骨高度又有下降，質地A組和B組堅硬，C組明顯質地松軟。

2.2形態學觀察

4周時，測量牙槽嵴高度及寬度，各組間差異有統計學意義（P＜0.05）；12周時，A組牙槽嵴高度及寬度優于B組和C組（P＜0.05）。見表1。

表1　三組術后與術前唇舌側牙槽嵴寬度和高度差值比較（x±s，mm）

2.3三組間CT值比較

術后4周、12周三組CT值比較差異有統計學意義（P＜0.05），術后12周，A組高于B組和C組（P＜0.05）。見表2。

表2　三組拔牙創CT值比較（x±s）

2.4實驗犬新鮮拔牙創建立及RBX復合植骨材料填充過程

見圖1。

圖1　新鮮拔牙創建立及RBX復合植骨材料填充

3　討論

口腔種植技術為恢復患者牙列缺失提供了條件，目前口腔種植修復正在蓬勃發展，生物材料的不斷更新也極大地提高了種植后效果。既往的病例較多是就醫時已是缺牙狀態，僅有部分病例是外傷等情況造成牙齒斷裂或缺失，現在大多是未曾拔牙就來咨詢種植修復，為拔牙位點保存提供了方向［7］。傳統觀念是不認可在新鮮拔牙創內植入骨替代材料，認為自然愈合最為妥當，在自然愈合后，再行種植修復，但這可能限制了牙槽骨再生潛能，為后續的種植修復制造困難，對前牙美學區域影響最為突出。前牙美學區因自身的解剖學特點，骨壁較薄，且拔牙后，牙槽骨可能出現吸收或者骨量不足，想要保證種植修復的成功及達到良好的美學效果，就必須附加一系列骨增量手術，加大了患者生理創傷和心理負擔。在實際臨床工作中，尋求牙齒位點保存的方法，盡早讓缺失的牙列恢復功能及美學，是臨床醫生及患者共同的目標［8］。本研究采用微創拔牙位點保存技術［9，10］，最大限度地減少拔牙過程中人為破壞骨組織，阻斷或減輕牙槽嵴吸收，為骨替代材料的充填以及維持牙槽嵴豐滿度奠定了基礎。

本研究在犬口腔中展開，將犬前牙區牙齒拔除，建立新鮮拔牙位點（圖1A），制備好拔牙位點后，將RBX與羥基磷灰石生物陶瓷填充致拔牙位點中（見圖1B），并用自制的生物膜進行覆蓋，增加了該復合材料的穩定性及作用面積。本研究中使用的RBX［11，12］是BMP和小牛部分骨組織重組而成，其理化性質和人體骨相似，具有良好的生物相容性。既往結果提示［13］，RBX與羥基磷灰石生物陶瓷具有協同作用，減緩牙槽嵴吸收，促進新骨形成，可增加牙槽骨的骨量，是種植修復得以實現。本研究在術后4周時，實驗組牙槽嵴高度明顯優于對照組；術后12周，A組的骨密度較術前恢復更多，CT檢查提示植骨材料已與牙槽骨融為一體，牙槽骨骨量明顯增加，說明RBX復合物并不阻礙新生骨形成，相反促進細胞遷移、分化與增殖，誘導新骨形成［14，15］。

本研究結果顯示，添加了羥基磷灰石生物陶瓷的RBX復合物不僅不阻礙新生骨形成，更具有成骨作用。將RBX自制膜覆蓋材料表面，一方面增加了復合物的穩定性，另一方面，RBX壓縮成膜狀，其面積顯著增大，使得內含的生長因子緩慢釋放，較為持續的發揮成骨效果［16，17］，膜的覆蓋同時避免唇頰側微小血管損傷，對菲薄的唇頰側骨壁起到一定的保護作用，使其不會造成血液供應障礙，與Fickl等［18］的研究一致。術后12周時，A組CT值高于B組，說明拔牙后在拔牙創內即刻植入RBX復合物，可達到減緩牙槽骨吸收，誘導成骨細胞分化，實現拔牙位點保存的作用。

本研究采用微創拔牙技術與位點保存技術相結合，并在犬的前牙區植入RBX與羥基磷灰石生物陶瓷復合物，將臨床技術與生物材料相結合，證實其對骨密度的增加、牙槽嵴的增量都有良好的效果，結合其生物相容性、價格經濟的特點，在未來的口腔種植修復中會有一定的應用前景。

［1］王艷，尼加提·吐爾遜，李淑慧，等.2種材料復合用于犬上前牙拔牙位點保存的實驗研究［J］.中華實用診斷與治療雜志，2014，28（1）：10-11.

［2］王艷，李淑慧，尼加提·吐爾遜，等.兩種骨替代材料復合用于上頜前牙拔牙位點即刻保存的可行性［J］.中華臨床醫師雜志（電子版），2013，7（24）：11536-11540.

［3］王艷.兩種材料復合用于上前牙拔牙位點保存的實驗研究［D］.新疆醫科大學，2014.

［4］康立勛，王馨，高艷宇.應用RBX復合物于犬前牙拔牙位點保存的實驗研究［J］.中國繼續醫學教育，2016，8（10）：15-16.

［5］于博涵，鄧春富，趙寶紅，等.前牙區拔牙位點即刻保存的動物實驗研究［J］.現代口腔醫學雜志，2011，25（2）：111-114.

［6］尼加提·吐爾遜，王艷，趙涓彤，等.引導骨再生膜技術在牙槽嵴位點保存的臨床療效觀察［J］.新疆醫科大學學報，2013，36（11）：1641-1643.

［7］羅煥娣，袁柱炫，王玉玲，等.微創拔牙后即刻植入同種異體骨對牙槽嵴保存的影響［J］.中國醫學創新，2016，13（6）：40-44.

［8］鄧春富，張馨文.淺談前牙美學區種植術式的選擇與思考［J］.口腔頜面外科雜志，2015，25（6）：393-399.

［9］孫曉嵐，鄧春富，趙寶紅，等.前牙區拔牙位點保存技術的臨床研究［J］.現代口腔醫學雜志，2013，27（2）：74-77.

［10］康立勛，王馨，高艷宇，等.激光輔助凝血在美學區種植修復中的應用［J］.中華口腔醫學研究雜志（電子版），2016，10（2）：120-124.

［11］Li XD，Hu YY.The treatment of osteomyelitis with gentamicin-reconstituted bone xenograft-composite［J］.J Bone Joint Surg Br，2001，83（7）：1063-1068.

［12］Li D，Bi L，Meng G，et al.Multi-variety bone bank in China［J］.Cell and Tissue Banking，2010，11（3）：233-240.

［13］Botticelli D，Berglundh T，Lindhe J.The influence of a biomaterial on the closure of a marginal hard tissue defect adjacent to implants.An experimental study in the dog［J］.Clin Oral Implants Res，2004，15（3）：285-292.

［14］于忠英，袁志，張偉，等.重組合異種骨治療股骨非感染性骨不連的長期療效觀察［J］.現代生物醫學進展，2012，12（7）：1303-1305.

［15］周春梅，溫齊古麗·乃庫力，于莉，等.骨誘導活性材料復合富血小板纖維蛋白在拔牙位點引導新骨形成的骨計量學研究［J］.臨床口腔醫學雜志，2016，32（2）：67-69. ［16］孫英華，王稚英.富血小板纖維蛋白凝膠和膜顯微與超微結構研究［J］.中國醫學工程，2011，19（7）：65-67.

［17］張曉倩，尼加提·吐爾遜，王艷，等.兩種材料在前牙區拔牙位點保存的動物實驗分析［J］.實用醫學雜志，2014，30（08）：1207-1210.

［18］Fickl S，Zuhr O，Wachtel H et al.Hard tissue alterations after socket preservation with additional buccal overbuilding：A study in the beagle dog［J］.J Clin Periodontol，2009，36（10）：898-904.

An experimental study of two materials used for the saving of the dog tooth extraction sites

KANG LixunGAO Yanyu
Dental Implantology Center，Hospital of Heilongjiang Province，Harbin150036，China

R783

A

1673-9701（2016）17-0025-03

黑龍江省衛生計生委科研課題（2014-151）

（2016-03-19）