胱硫醚β—合成酶G919A基因多態性與原發性高血壓關系的meta分析

李丹丹+喬木+王喜冰+梁學清+趙昕

[摘 要] 目的 綜合評估胱硫醚β-合成酶（CBS）基因G919A多態性與原發性高血壓（EH）發生風險的關系。方法 全面檢索PubMed、Embase、Medline、萬方數據庫、中國知網（CNKI）、維普資訊，收集CBS基因G919A多態性與EH發生關系的病例對照研究，優勢比（OR）及95%可信區間（CI）評估關聯強度，應用RevMan5.3軟件對納入研究進行異質性檢驗和效應值OR合并，漏斗圖評價發表性偏倚；敏感度分析過程，分別以固定效應模型和隨機效應模型合并OR值，以評估結果的穩定性。結果 共納入4篇文獻6組病例-對照研究，共累計EH組患者1147例，健康對照組1138例，根據異質性檢驗結果選取固定效應模型或隨機效應模型合并數據。Meta分析結果顯示：CBS基因919純合子模型（AA vs GG）、雜合子模型（GA vs GG）、顯性模型（AA+GA vs GG）、隱性模型（AA vs GG+GA）和基因頻率（A vs G）與EH關系的合并OR（95%CI）分別為3.03（1.95～4.72）、1.49（1.10～2.02）、1.61（1.23～2.10）、2.65（1.26～5.57）和1.55（1.35～1.79），均P<0.01。漏斗圖未檢測出顯著的發表性偏倚。結論 目前Meta分析表明CBS基因G919A多態性與EH發病相關聯，尤其是在中國人群。

[關鍵詞] 胱硫醚β-合成酶；原發性高血壓；基因多態性；Meta分析

中圖分類號：R544.1 文獻標識碼：A 文章編號：1009-816X（2016）06-0422-05

[Abstract] Objective To evaluate the relationship between cystathionine beta-synthase （CBS） G919A genetic polymorphisms and the risk of essential hypertension （EH）. Methods A comprehensive search was conducted on PubMed， Embase， Medline， Wanfang Databases， CNKI and VIP to collect the case-control studies on the relationship between CBS G919A genetic polymorphisms and EH. Odds ratios （OR） with 95% confidence intervals （CI） were applied to assess the strength of association. The RevMan 5.3 software was applied for heterogeneity test and combined OR and their 95%CI calculation. Publication bias was assessed through funnel plot and the combined ORs were estimated through fixed-effects models or random-effects models for sensitivity analysis so as to assess the stability of the results. Results Four related literatures （six case-control studies） on the relationship between CBS G919A polymorphisms and EH were included，involving 1147 EH patients （case-groups） and 1138 controls.Based on the heterogeneity results，fixed-effects models or random-effects models were applied to estimate the combined ORs.The meta-analyses showed that combined OR （95% CI） for CBS 919 heterozygote model（AA vs GG），homozygote model（GA vs GG），dominant model（AA+GA vs GG），recessive model（AA vs GG+GA）and gene frequency（A vs. G） were 3.03（1.95～4.72）， 1.49（1.10～2.02）、1.61（1.23～2.10）、2.65（1.26～5.57） and 1.55（1.35～1.79）. No significant publication bias was detected by funnel plot and sensitivity analysis suggested the robustness of the results. Conclusions The present meta-analysis suggests that CBS 919A genetic polymorphisms positively correlate with EH， especially in Chinese population.

[Key words] Cystathionine beta-synthase （CBS）； Essential hypertension （EH）； Genetic polymorphism； Meta-analysis

原發性高血壓（essential hypertension，EH）是最常見的心血管疾病之一，主要以體循環動脈壓增高為主要臨床表現，目前認為其是由遺傳因素和環境因素共同作用的結果[1]。眾多環境及臨床疾病與EH相關，其中包括鈉鹽的攝入、飲酒、缺乏鍛煉、不良的飲食習慣、肥胖、胰島素抵抗型糖尿病及高脂血癥等[2]。盡管這些因素解釋了大部分高血壓發生的原因，但仍有高達60%的高血壓的風險差異是由于個人的基因所引起的[3]。研究發現，血漿同型半胱氨酸（homocysteine，Hcy）水平升高與EH的發生密切相關[4]。而胱硫醚β-合成酶（cystathionine beta-synthase，CBS）是Hcy代謝過程中的關鍵酶，因此，CBS基因缺陷可通過影響血漿總Hcy水平間接導致高血壓的發生，其中常見的突變位點有T833C、G919A、844ins68等。目前已有關于CBS基因G919A多態性與EH發生風險關系的相關研究，但各研究結果間存在一定爭議。Meta分析對于存在差異的不同研究，能夠匯總多項研究結果，增大樣本量，提高效應值估計精度，定量分析合并效應量，成為循證醫學中有力的研究工具。本研究采用Meta分析評估CBS基因G919A多態性與EH發生風險的關系，為EH的早期診斷和篩選易感人群提供理論依據。

1 資料與方法

1.1 文獻檢索途徑和策略：計算機全面檢索PubMed、Embase、Medline、萬方數據庫、中國知網、維普資訊，獲取有關CBS基因G919A多態性與EH關系的相關研究文獻。檢索中文主題詞或關鍵詞為：胱硫醚β-合成酶或CBS、基因、多態性、原發性高血壓。英文主題詞或關鍵詞為：Cystathionine beta-synthase or CBS，Gene，polymorphism or variant，Hypertension。檢索日期截止至2016年3月1日，檢索語種不限，同時輔以文獻追蹤法查閱相關文獻，同時手工檢索文獻，以確保文獻檢索的全面性。病例報道、評論、綜述、系統評價類文獻不作為納入文獻。

1.2 文獻納入標準：納入文獻均符合以下標準：①原始資料為已公開發表的文獻；②研究設計為病例-對照研究；③EH病例組診斷明確；④病例組和對照組各基因型數據表達明確；⑤對照組各基因型分布符合哈迪-溫伯格平衡（Hard-Weinberg equilibrirum，HWE）。兩位系統評價員獨立篩選，對納入文獻質量進行評價并提取基本資料，包括第一作者、發表年份、民族、基因分型方法、樣本量、病例組與對照組各基因型及基因頻率分布情況和對照組各基因型的HWE平衡情況。如有爭議則共同復查原文后協商決定。

1.3 統計學處理：對納入研究的原始數據應用RevMan5.3軟件進行合并統計分析。本研究以0R值及其95%CI為效應指標評價CBS基因G919A多態性與EH易感性的關聯強度，所采用的基因型模型有純合子模型（AA vs GG）、雜合子模型（GA vs GG）、顯性模型（AA+GA vs GG）、隱性模型（AA vs GG+GA）和直接比較基因頻率（A vs G）。采用Q檢驗評估納入研究間的異質性，檢驗水準為α=0.05，同時應用I2定量異質性大小：檢驗水準為I2=56%，如納入研究間無明顯異質性（I2≤56%，P≥0.05）則采用固定效應模型；如異質性明顯（I2>56%，P<0.05）則采用隨機效應模型合并數據。繪制漏斗圖評估發表性偏倚。

2 結果

2.1 納入文獻的基本情況：經過文獻檢索和嚴格篩選，最終納入4篇文獻[5～7，9]，共6個病例-對照研究，包括HE患者1147例，對照組1138例。因CBS基因G919A主要在我國范圍內研究，故所得研究均以我國人群為研究對象，均采用PCR-RFLP基因分型方法，除趙磊（b）[8]研究的對照組不符合HWE外，其余對照組均符合HWE。各納入文獻基本特征和原始數據見表1。

2.2 Meta分析結果：異質性檢驗結果：純合子模型（AA vs GG，圖1，P=0.06>0.05）、雜合子模型（GA vs GG，圖略，P=0.01<0.05）、顯性模型（AA+GA vs GG，圖2，P=0.03<0.05）、隱性模型（AA vs GG+GA，圖略，P=0.04<0.05）和基因頻率（A vs G，圖3，P=0.05，I2=55%<56%），故純合子模型和基因頻率模型采用固定效應模型合并數據，其余模型均采用隨機效應模型合并數據，與EH關系的合并OR（95% CI）分別為3.03（1.95～4.72）、1.49（1.10～2.02）、1.61（1.23～2.10）、2.65（1.26～5.57）和1.55（1.35～1.79），對應Z值分別為4.91、2.56、3.45、2.58和6.05；均P<0.01。表明CBS919各基因型模型均與EH相關聯，說明CBS919多態性與EH相關。

考慮到種族差異對CBS基因多態性的影響，本文進一步進行亞組分析（如圖3，基因頻率A vs G各種族亞組與EH關系的meta分析，其余各基因型模型的森林圖未列出），亞組分析表明，不同民族CBS919各基因型模型與EH的關聯性不同（結果見表2），可見，CBS基因多態性存在明顯的種族差異。

2.3 發表性偏倚與敏感度分析：漏斗圖中各點分布基本對稱（圖4），說明無明顯的發表性偏倚。在敏感度分析過程，分別以固定效應模型和隨機效應模型合并OR值，其結果基本一致，并通過加入趙磊（b）[8]的研究，其合并數據分析的結果與之前結果亦一致，說明目前所得結果是穩定的。

3 討論

血漿Hcy水平升高作為心血管疾病的獨立危險因素己被廣泛認同。CBS是Hcy代謝轉硫基過程中的重要酶，該基因定位于染色體21q22.3，長25～30KB，編碼551個氨基酸長度。CBS基因G919A位于第8外顯子，當第307位氨基酸由甘氨酸（Gly）代替了絲氨酸（Ser），導致CBS活性下降，但并不影響CBS與5′磷酸吡哆醛的結合，其引起酶活性下降的機制仍不清[10]。目前對CBS基因多態性的研究主要集中在腦血管疾病及冠心病領域[11～13]。絕大多數研究者認為，CBS基因突變導致CBS缺乏或活性降低是血管性疾病的獨立危險因素，CBS基因多態性存在明顯的地域和種族差異，與本文亞組分析結果一致。

目前已有較多探索CBS基因G919A多態性與EH發生風險關系的研究，但各研究結果存在一定差異。本研究運用Meta分析的方法增大樣本含量，提高了檢驗效能和效應量估計精度，將不一致的研究結果進行定量綜合。本文最終共納入6個病例-對照研究，根據異質性檢驗結果選取固定效應模型或隨機效應模型合并效應指標OR值。Meta分析結果顯示，CBS基因919純合子模型（AA vs GG）、雜合子模型（GA vs GG）、顯性模型（AA+GA vs GG）、隱性模型（AA vs GG+GA）和基因頻率（A vs G）與EH的合并OR（95%CI）分別為3.03（1.95～4.72）、1.49（1.10～2.02）、1.61（1.23～2.10）、2.65（1.26～5.57）和1.55（1.35～1.79），均P<0.01。表明CBS基因G919A多態性與EH發病相關聯，尤其是在中國人群，且漏斗圖未檢測出顯著的發表性偏倚。因CBS基因G919A主要在我國范圍內研究，國外未見此類研究，故所得研究均以我國人群為研究對象，但由于本研究納入的文獻數量有限，可能受到混雜因素如種族因素的影響，考慮到種族差異對CBS基因多態性的影響，本文進一步進行亞組分析，結果表明，不同民族CBS 919各基因型模型與EH的關聯性不同，但為得到更可靠的結論，需要進一步開展多中心、大樣本、設計良好的病例-對照研究，更新系統評價，為EH的遺傳背景提供進一步證據，為其早期診斷和預防提供循證醫學依據。

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（收稿日期：2016-7-11）