惡性血液病患者T淋巴細胞亞群檢測研究

湯麗　任敏

【摘要】 目的：分析惡性血液病患者的外周血T淋巴細胞亞群變化及其檢測價值。方法：選取2012年1月-2015年12月筆者所在醫院收治的惡性血液疾病患者40例（A組）、良性血液病患者34例（B組）和正常人30例（C組）作為研究對象，檢測和比較三組的T淋巴細胞亞群變化。結果：A組和B組的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+較C組均明顯降低，且A組明顯低于B組，差異有統計學意義（P<0.05）；A組和B組的CD8+及CD16+、CD56+較C組均明顯提高，且A組明顯高于B組，差異有統計學意義（P<0.05）。結論：血液病患者存在不同的免疫功能失調，且以惡性血液病患者更為嚴重，T淋巴細胞亞群檢測對于良惡性血液病的診斷鑒別、臨床治療決策與預后評估具有重要指導意義。

【關鍵詞】 惡性血液病； 免疫功能； T淋巴細胞亞群

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2016.31.030 文獻標識碼 B 文章編號 1674-6805（2016）31-0057-02

血液病史至血液協同原發或繼發性疾病，患者的臨床表現主要為發熱、出血及貧血等。臨床根據其良惡性主要分為良性與惡性血液病兩類，其中，惡性血液病主要有急性白血病（AL）、慢性白血病（CL）、多發性骨髓瘤（MM）、淋巴瘤（LM）等，嚴重威脅人類生命健康[1]。T淋巴細胞是機體免疫調節的重要細胞，在正常生理狀態下其在體內的數量及構成比關系較為穩定，而當發生失調時可誘發多臟器系統疾病。臨床研究表明，在惡性疾病的發生及發展過程中均存在不同程度的T淋巴細胞亞群失衡，但關于其在惡性血液疾病患者中的變化特征，目前尚鮮見報道[2]。本文測定分析了40例惡性血液病患者的外周血T淋巴細胞亞群變化，并與34例良性血液病、30例正常對照組進行比較，旨在評估T淋巴細胞亞群變化在惡性血液病中的意義及檢測價值，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2012年1月-2015年12月筆者所在醫院收治的惡性血液疾病患者40例（A組）、良性血液病患者34例（B組）和正常人30例（C組）。A組中，男24例，女16例；年齡41～81歲，平均（53.90±3.35）歲；疾病類型： AL5例， CL6例， MM3例， LM18例，骨髓增生異常綜合癥3例，骨髓纖維化2例，骨髓增殖性疾病1例，霍奇金氏病1例，淋巴管瘤1例。B組中，男17例，女13例；年齡13～77歲，平均（49.76±3.36）歲；疾病類型：貧血10例，白細胞減少9例，血小板減少7例，血細胞減少3例，過敏性紫癜5例。C組中，男15例，女15例；年齡20～82歲，平均（52.13±3.45）歲。三組年齡與性別構成比較差異無統計學意義（P>0.05）。

1.2 方法

受試者常規于清晨9∶00-10∶00采集外周靜脈血2 ml，應用EDTA抗凝處理，在2 h內檢查。向試管中分別加入40 μl相應的單克隆抗體，包括CD3/CD4/CD8/CD16+CD56 TEST試劑，然后吸取100 μl待測樣本，加入1 ml PBS緩沖溶液，充分混勻以后，置于室溫避光條件下進行孵育處理，15 min以后加入適量榮雪茹，再次混勻后置于室溫避光條件下反應10 min，然后再加入2 ml PBS緩沖液進行洗滌，常規離心，留取下層溶液，再次洗滌1次，然后加入500μl PBS緩沖溶液。完成樣本處理后，將其置入流式細胞儀（BD公司生產 FACSCalibur型）進行全自動分析，測定CD3+、CD4+、CD8+、CD16+CD56，并計算CD4+/CD8+。正常參考范圍：CD3+為60%～80%，CD4+為35%～55%，CD8+為20%～30%，CD4+/CD8+為1.4～2.0，CD16+CD56為7%～40%。

1.3 統計學處理

采用SPSS 18.0統計學軟件包對本次研究相關數據進行處理與分析，計量資料以（x±s）表示，采用t檢驗，計數資料以率（%）表示，采用字2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

A組和B組的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+較C組均明顯降低，且A組明顯低于B組，差異有統計學意義（P<0.05）；A組和B組的CD8+及CD16+CD56較C組均明顯提高，且A組明顯高于B組，差異有統計學意義（P<0.05），見表1。

3 討論

免疫功能降低是惡性疾病患者普遍存在的現象，免疫功能紊亂程度與疾病的發生、發展及臨床轉歸均有緊密關系。臨床研究表明，惡性疾病患者的免疫功能紊亂以細胞免疫功能降低為主，可能是由于惡性疾病發生及發展過程中存在多種免疫因子合成或分泌增多，導致細胞功能免疫受到抑制[3]。T淋巴細胞是細胞免疫主要群體，主要由胸腺生成，可起到免疫功能執行與免疫功能調節雙重作用。其中，輔助性T細胞（Th）中主要標志性細胞為CD3+及CD4+，具有抗腫瘤作用。一旦發生Th細胞亞群比例降低，多提示免疫功能低下，導致機體抵抗腫瘤、感染的能力降低[4]。目前，臨床對T淋巴細胞亞群的研究多關注傳染性肝炎患者的檢測，而對于惡性血液疾病的檢測目前尚報道較少。

惡性血液系統疾病中，以白血病最為常見，其屬于造血干細胞克隆性惡性疾病，發病過程中由于白血病細胞的分化成熟能力喪失，繼而停滯在各個不同的細胞發育階段，導致造血組織中大量白血病細胞聚集，同時還可累及其他臟器組織，影響造血功能，從而導致機體免系統功能紊亂[5]。ML在臨床中也較為常見，其發生及發展均與淋巴組織免疫應答過程中，各類免疫細胞發生增殖分化有關，因此其實際上也是一種免疫系統相關性惡性腫瘤。臨床研究表明，免疫系統缺陷可能在ML的發生及發展過程中起著關鍵性作用。MM主要是由于骨髓中漿細胞發生異常增殖，導致骨骼被破壞，繼而造成單克隆免疫球蛋白產生，抑制正常多克隆免疫球蛋白的正常合成過程，繼而導致貧血等癥狀。相關研究資料顯示，MM患者存在多種免疫系統缺陷，其發生及發展與免疫細胞數量減少及免疫細胞功能障礙密切相關[6]。由此可見，免疫細胞紊亂在多種惡性血液疾病的發生及發展過程中均具有重要作用。外周血T淋巴細胞亞群能夠較為客觀地反應機體的細胞免疫功能狀態，且不同亞群的生理功能存在較大的差異，一旦T淋巴細胞亞群數量發生異常，多提示機體存在病理生理變化[7-8]。因此，測定外周血T淋巴細胞亞群比例能夠在較大程度上反映疾病狀態，這對于疾病的診斷、治療及病情評估均具有重要意義。甄禎等[9]研究表明，惡性血液病患者的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、CD3+CD16+CD56 T淋巴細胞比例均較正常對照組明顯降低，而CD8 T淋巴細胞明顯提高，其研究還發現，不同類型惡性血液疾病患者的T淋巴細胞亞群計數均與健康對照組比較差異顯著，表明惡性血液病患者存在明顯的細胞免疫功能失衡。本研究中，良性與惡性血液病（A組與B組）患者的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均較健康對照組（C組）明顯降低，CD8+及CD16+CD56+均較C組明顯提高，與上述報道一致，證明了血液病患者存在不同程度的細胞免疫功能紊亂。而A組與B組比較，A組的T淋巴細胞亞群紊亂更為明顯，組間比較差異均有統計學意義，進一步證實惡性血液病患者的T淋巴細胞亞群紊亂較為明顯，細胞免疫功能降低嚴重，這對疾病診斷與治療具有重要意義。

綜上所述，良、惡性血液病患者存在不同程度的細胞免疫功能降低，而惡性血液病患的免疫功能缺陷或障礙更為嚴重。T淋巴細胞亞群檢測和分析對于良、惡性血液病的診斷鑒別、臨床治療決策與預后評估具有重要參考價值。

參考文獻

[1]陸紫敏，顧鳳英，申遠，等.惡性血液病治療前后T細胞亞群和NK細胞活性測定分析[J].中國腫瘤臨床與康復，2002，9（2）：14-16.

[2]王春燕，譚獲，于寶丹，等.惡性血液病患者外周血CD_4～+ CD_（25）～+ FOXP3～+調節性T細胞的檢測[J].白血病·淋巴瘤，2010，19（5）：304-305.

[3]張帆，程育勝，姚紅，等.CD4+Foxp3+調節性T細胞在惡性血液病中的變化及機制研究[J].中國免疫學雜志，2011，27（12）：1109-1112.

[4] Kosmidis S，Baka M，Bouhoutsou D，et al.Longitudinal assessment of immunological status and rate of immune recovery following treatment in children with ALL[J].Pediatric Blood & Cancer，2008，50（3）：528-532.

[5]余壽益，田華琴，梁貴文，等.惡性血液病T淋巴細胞亞群及NK細胞活性檢測[J].醫藥論壇雜志，2006，27（15）：34-35.

[6]王艷峰，王菀菀，段軼鋆，等.惡性腫瘤繼發惡性血液病類型分析[J].中華臨床醫師雜志（電子版），2015，9（21）：3859-3864.

[7]趙雯，張子寧.王亞男，等.2862 例臨床患者 T 淋巴細胞亞群檢測結果分析[J].中國醫科大學學報，2012，41（11）：1026-1029.

[8]顧科峰，陳琳軍，鄧曉輝，等.惡性血液病患者治療前后外周血NK細胞亞群變化的特點及其臨床意義[J].實用醫學雜志，2013，29（13）：2154-2157.

[9]甄禎，葉芳，李國霞，等.惡性血液病患者T淋巴細胞亞群的檢測分析[J].中國當代醫藥，2014，21（9）：101-102.

（收稿日期：2016-07-28）