上皮性鈣黏蛋白在胃癌中的表達(dá)及與化療療效的關(guān)系

徐文思 劉紅丹 張 博 張慧宇

(齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院附屬第三醫(yī)院消化內(nèi)科，黑龍江 齊齊哈爾 161099)

上皮性鈣黏蛋白在胃癌中的表達(dá)及與化療療效的關(guān)系

徐文思 劉紅丹 張 博 張慧宇

(齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院附屬第三醫(yī)院消化內(nèi)科，黑龍江 齊齊哈爾 161099)

目的 探討上皮性鈣黏蛋白(E-cadherin)在胃癌發(fā)生、發(fā)展中的作用及其臨床應(yīng)用價(jià)值。方法 122例原發(fā)胃癌患者納入研究，手術(shù)或胃鏡活檢取出腫瘤組織，采用免疫組化方法檢測E-cadherin表達(dá)水平，統(tǒng)計(jì)分析E-cadherin表達(dá)水平與臨床病理各項(xiàng)參數(shù)的關(guān)系；并分析E-cadherin表達(dá)與化療療效和患者生存期的關(guān)系。結(jié)果 E-cadherin 主要在胃癌細(xì)胞膜呈現(xiàn)陽性表達(dá)。122例患者中有48例E-cadherin陽性表達(dá)，占患者總例數(shù)的39.34%。E-cadherin陽性表達(dá)在60歲以上胃癌患者中檢出率較高，且高、中分化的胃癌組織中E-cadherin 陽性表達(dá)率顯著高于低分化胃癌組織(P<0.05)。E-cadherin陽性表達(dá)組化療療效明顯優(yōu)于陰性組(P<0.05),生存期比較未見明顯差異(P>0.05)。結(jié)論 E-cadherin表達(dá)是胃癌的抑癌因素，E-cadherin陽性表達(dá)與年齡、腫瘤分化程度及療效相關(guān)，E-cadherin表達(dá)水平聯(lián)合其他胃癌標(biāo)志物可能會(huì)顯示出更加重要的臨床指導(dǎo)價(jià)值。

上皮性鈣黏蛋白；胃癌

胃癌是世界上癌癥致死的第二大病因，我國是胃癌高發(fā)國家，患病率及死亡率很高，均為世界平均水平的2倍多。我國每年胃癌新發(fā)病例占全世界新發(fā)病例半數(shù)以上〔1〕。且我國胃癌發(fā)病特征為早期癥狀不明顯，發(fā)展迅速，惡性程度高，大多數(shù)患者確診時(shí)已處于中晚期，往往錯(cuò)過最佳治療時(shí)期，失去手術(shù)機(jī)會(huì)，化療成為最重要的非手術(shù)治療方法。然而，目前臨床上胃癌化療方案的設(shè)置是根據(jù)以大樣本統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果為基礎(chǔ)選擇化療藥物，有效率偏低，多數(shù)患者不能從中獲益，胃癌的治療療效已逐漸達(dá)到一個(gè)平臺(tái)期。上皮性鈣黏蛋白(E-cadherin)是一種上皮細(xì)胞黏附分子，在惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中起抗轉(zhuǎn)移作用。研究發(fā)現(xiàn)，在多種不同類型的腫瘤細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移過程中E-cadherin下調(diào)，其表達(dá)下調(diào)與預(yù)后不良有關(guān)，其異常表達(dá)亦可能與腫瘤細(xì)胞化療敏感性有關(guān)聯(lián)〔2〕。本研究旨在研究E-cadherin在胃癌中的表達(dá)情況與化療療效的關(guān)系，以期為臨床決策提供有益幫助。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象 本研究已獲得學(xué)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，且所有入組受試對(duì)象均知情同意。研究對(duì)象選自2011年1月至2013年1月經(jīng)胃鏡和病理明確診斷為原發(fā)胃癌，且可按規(guī)定完成治療方案的患者122例，男98例，女24例，年齡42～76〔平均(67.73±6.05)〕歲。其中乳頭狀腺癌31例,管狀腺癌26 例,差分化腺癌42 例,黏液細(xì)胞癌/黏液腺癌23 例。臨床分期：Ⅱ期19例，Ⅲ期45例，Ⅳ期58例。分化類型：低分化46 例，中分化37 例，高分化39 例。

1.2 指標(biāo)檢測方法

1.2.1 E-cadherin免疫組化測定 經(jīng)胃鏡或行手術(shù)取得胃癌組織后，用4%多聚甲醛固定24 h，常規(guī)石蠟包埋，行4 μm連續(xù)切片，鼠抗人E-cadherin 抗體購自美國Sigma公司(U3254)，抗體工作濃度為1∶100，免疫組化(S-P)試劑盒及二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色劑均購自北京中杉生物技術(shù)有限公司，操作按照試劑盒說明進(jìn)行。胞膜或胞質(zhì)檢測到棕黃色顆粒判定為陽性結(jié)果，半定量分析以400倍光學(xué)顯微鏡下計(jì)數(shù)5個(gè)視野或1 000個(gè)細(xì)胞計(jì)算，陽性細(xì)胞數(shù)<10%為陰性，≥10%為陽性。

1.2.2 化療方法及療效判定 本研究采取 FOLFOX4化療方案對(duì)所有患者化療，即奧沙利鉑(Oxaliplatin)85 mg/m2，靜滴，第1天；亞葉酸鈣(Leucovorin，CF)200 mg·m-2·d-1，在氟尿嘧啶(5-FU)前2 h靜滴，第1～2天；5-FU 400 mg·m-2·d-1，靜脈注射，然后再用 600 mg·m-2·d-1，22 h持續(xù)泵入，第1～2天；14 d為一個(gè)周期〔3〕。臨床療效評(píng)估根據(jù)WHO 實(shí)體瘤療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)分為〔4〕:完全緩解(CR)；部分緩解(PR)；穩(wěn)定(SD)：疾病進(jìn)展(PD)四級(jí)。療效以CR + PR 為有效，以SD + PD 為無效〔4〕

1.3 隨訪 患者出院后，每月對(duì)患者進(jìn)行隨訪，生存時(shí)間以疾病診斷時(shí)間到最后隨訪時(shí)間或者死亡時(shí)間。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，E-cadherin表達(dá)與病理參數(shù)關(guān)系及療效分析行χ2檢驗(yàn)；生存曲線采用Kaplan-Meier分析。

2 結(jié) 果

2.1 免疫組化檢測胃癌組織標(biāo)本中 E-cadherin 蛋白表達(dá) 122例患者中有48例E-cadherin陽性表達(dá)，占總患者例數(shù)的39.34%。E-cadherin 主要在胃癌細(xì)胞膜呈現(xiàn)陽性表達(dá)。見圖1。

2.2 E-cadherin 陽性表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系 在發(fā)病年齡參數(shù)中，E-cadherin陽性表達(dá)在超過60歲發(fā)病的老年胃癌患者中檢出率較高(χ2=5.671，P=0.017)；在分化程度參數(shù)中，E-cadherin 陽性表達(dá)率在高、中分化的胃癌中顯著高于低分化胃癌(P<0.05)。見表1。

2.3 E-cadherin 陽性表達(dá)與化療療效的關(guān)系 患者按既定周數(shù)完成化療后，評(píng)價(jià)患者療效,E-cadherin陽性表達(dá)組化療療效優(yōu)于E-cadherin陰性表達(dá)組(χ2=4.972，P=0.026)，見表2。

2.4 E-cadherin 陽性表達(dá)與患者生存率關(guān)系 見圖2。隨訪1年內(nèi)，全組患者有12例失訪，其中E-cadherin 陽性組失訪4例，E-cadherin 陰性組失訪8例，E-cadherin 陽性表達(dá)患者生存率較E-cadherin 陰性表達(dá)高，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

表1 E-cadherin 陽性表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系(n)

表2 E-cadherin陽性表達(dá)與化療療效關(guān)系(n)

圖1 E-cadherin免疫組化結(jié)果(×400)

圖2 E-cadherin表達(dá)與患者生存率的關(guān)系

3 討 論

E-cadheirn 是一種介導(dǎo)同種細(xì)胞相互黏附的鈣依賴性跨膜糖蛋白,人E-cadheirn定位于16q22.1,由上皮鈣黏連素(CDH1) 基因編碼，屬于鈣黏蛋白家族成員，其功能對(duì)維持上皮細(xì)胞正常形態(tài)，并且介導(dǎo)細(xì)胞黏附,直接或間接介導(dǎo)細(xì)胞間信息傳遞，對(duì)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移發(fā)揮作用〔5〕。近年來，E-cadherin生物學(xué)功能和病理學(xué)意義不斷被拓展，其參與調(diào)控生命過程和發(fā)育過程的重要性不斷鞏固，同時(shí)發(fā)現(xiàn)它在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中是一個(gè)抑癌因子，受到越來越多研究的肯定。胃癌是起源于胃上皮的惡性腫瘤，其發(fā)病與上皮細(xì)胞功能失調(diào)關(guān)系非常密切。因此，研究E-cadherin在胃癌中的表達(dá)情況與化療療效的關(guān)系，對(duì)胃癌臨床治療具有非常重要的意義。

胃癌好發(fā)于中老年男性，青少年及女性患者所占比例較少,與流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果一致〔6〕。本實(shí)驗(yàn)中，入組病例臨床分期分布規(guī)律符合我國胃癌發(fā)病就診特點(diǎn)，即在我國，大多數(shù)胃癌患者就診時(shí)，腫瘤往往已進(jìn)展至中晚期。

本實(shí)驗(yàn)免疫組化結(jié)果顯示E-cadherin 蛋白的表達(dá)位置為細(xì)胞膜，與文獻(xiàn)〔7，8〕所報(bào)道E-cadherin在正常組織生長發(fā)育過程中起到維持上皮組織形態(tài)完整及細(xì)胞黏附作用結(jié)論符合。有部分病例樣本中表現(xiàn)出細(xì)胞質(zhì)的著色，顏色較淺，提示在胃癌組織中E-cadherin的表達(dá)能力下降或缺失，可能對(duì)于胃癌的產(chǎn)生和發(fā)展起到重要影響。E-cadherin 陽性表達(dá)率在高、中分化的胃癌中顯著高于低分化胃癌，提示E-cadherin可能起到腫瘤抑制因子作用。E-cadherin的表達(dá)的下降或缺失，可破壞細(xì)胞之間的黏附功能，從而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的生長和轉(zhuǎn)移。E-cadherin 表達(dá)缺失亦可誘導(dǎo)上皮細(xì)胞向間充質(zhì)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化，增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞的侵襲力和抗凋亡能力〔9〕。同時(shí)，研究表明〔10〕在浸潤型胃癌中E-cadherin 的表達(dá)能力普遍下調(diào)，而當(dāng)細(xì)胞間的黏附能力被抑制后，則會(huì)影響分化與浸潤表型，證明腫瘤組織的浸潤轉(zhuǎn)移與 E-cadherin 表達(dá)能力下調(diào)相關(guān)。

本研究中60歲以上老年患者居多，因此選用的是FOLFOX4化療方案，該方案老年胃癌患者的化療常規(guī)治療方案。E-cadherin陽性表達(dá)組化療療效明顯優(yōu)于陰性組，提示E-cadherin 的表達(dá)下調(diào)不僅可影響腫瘤的轉(zhuǎn)移、侵襲、浸潤，也可影響胃癌細(xì)胞對(duì)化療、放療的敏感性和耐藥性。

1 房靜遠(yuǎn),高琴琰.胃癌臨床診治的變遷與研究進(jìn)展〔J〕.中華消化雜志，2015;35(1)：4-6.

2 Singhai R，Patil VW,Jaiswal SR,etal.E-cadherin as a diagnostic biomarker in breast cancer〔J〕.N Am J Med Sci，2011；3(5):227-33.

3 王海英,鄭瑞鵬,姚志華,等.SOX方案與FOLFOX4方案治療老年晚期胃癌的臨床分析〔J〕.中國老年學(xué)雜志，2015;35(6):1525-7.

4 張賀龍.實(shí)體瘤療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)及演變〔J〕.現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2010;18(5):839-40.

5 Bezdekova M，Brychtova S，Sedlakova E，etal.Analysis of Snail-1，E-cadherin and claudin1 expression in colorectal adenornas and carcinomas〔J〕.J Int Mol Sci，2012;13(2):1632-43.

6 陳萬青,鄭榮壽,曾紅梅,等.1989-2008 年中國惡性腫瘤發(fā)病趨勢(shì)分析〔J〕.中華腫瘤雜志，2012;34(7)：517-24.

7 Chen X,Wang Y,Xia H,etal.Loss of E-cadherin promotes the growth,invasion and drug resistance of colorectal cancer cells and is associated with liver metastasis〔J〕.Mol Biol Rep,2012;39(6):6707-14.

8 Brouxhon SM,Kyrkanides S,Teng X,etal.Soluble E-cadherin:a critical oncogene modulating receptor tyrosine kinases,MAPK and PI3K/Akt/mTOR signaling〔J〕.Oncogene,2014;33(2):225-35.

9 Heindl S,Eggenstein E,Keller S,etal.Relevance of MET activation and genetic alterations of KRAS and E-cadherin for cetuximab sensitivity of gastric cancer cell lines〔J〕.J Cancer Res Clin Oncol,2012;38(5):843-58.

10 Wang ZS,Shen Y,Li X,etal.Significance and prognostic value of Gli-1 and Snail/E-cadherin expression in progressive gastric cancer〔J〕.Tumour Biol,2014;35(2):1357-63.

〔2015-12-09修回〕

(編輯 袁左鳴)

齊齊哈爾市科學(xué)技術(shù)計(jì)劃項(xiàng)目(SFZD-2014079)

徐文思(1984-)，女，碩士，主治醫(yī)師，主要從事消化系統(tǒng)常見病及疑難病的診斷及治療研究。

R735.2

A

1005-9202(2017)07-1663-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.07.041