血清 VEGF、 Ang-2對非小細胞肺癌診斷特異性及預后判斷準確性作用分析

梁月明 張培芳 劉劍 梅湛強 李敏菁

血清 VEGF、 Ang-2對非小細胞肺癌診斷特異性及預后判斷準確性作用分析

梁月明 張培芳 劉劍 梅湛強 李敏菁

目的 探討血清中血管內皮生長因子(VEGF)和血管生成素-2(Ang-2)對非小細胞肺癌(NSCLC)診斷特異性及預后判斷的作用。方法 選取2011年1月至2014年1月在我院治療的NSCLC患者178例(病例組)，同時選取100例健康者作為對照組，檢測血清VEGF和Ang-2含量，分析其與臨床病理、預后的關系。結果 病例組VEGF和Ang-2分別為(553.21±78.43)pg/mL和(390.12±90.70)pg/mL，明顯高于對照組(P<0.05)；NSCLC患者VEGF和Ang-2與患者年齡、性別及病理類型無關(P>0.05)；伴淋巴結轉移患者VEGF和Ang-2明顯高于無淋巴結轉移患者(P<0.05)；臨床分期為Ⅲ-Ⅳ期患者VEGF和Ang-2明顯高于Ⅰ-Ⅱ期患者(P<0.05)；VEGF高水平患者生存時間為(18.97±0.95)月，明顯低于VEGF低水平患者的(23.80±0.82)月(P<0.05)；Ang-2高水平患者生存時間為(19.42±0.91)月，明顯低于Ang-2低水平患者的(23.71±0.81)月(P<0.05)；VEGF曲線下面積為0.907，截斷值為442.45pg/mL，靈敏度為91.60%，特異度為89.00%；Ang-2曲線下面積為0.802，截斷值為312.43pg/mL，靈敏度為82.60%，特異度為85.00%。結論 血清 VEGF和Ang-2可作為NSCLC診斷以及預后判斷的分子標志物，具有重要的臨床應用價值。

非小細胞肺癌；血管內皮生長因子；血管生成素-2；預后；診斷

非小細胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)是臨床上較為常見的呼吸系統惡性腫瘤，近年來環境污染、吸煙、遺傳易感因素等均促進NSCLC的發生發展。研究顯示NSCLC的發病率可達0.05%以上，且近年來呈現出了一定上升的趨勢[1-2]。

對于NSCLC發病過程中生物學機制的研究，可以為患者的早期診斷及遠期臨床預后轉歸提供可靠的實驗室參考指標。血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)和血管生成素-2( angiogenin-2，Ang-2)在惡性腫瘤的發生發展中發揮了重要的調節作用，二者可以通過促進血管內皮細胞的分化進而促進腫瘤新生血管的形成，加劇惡性腫瘤的臨床進展[3-5]。本研究分析了2011年1月至2014年1月在我院治療的178例NSCLC患者，探討了VEGF及Ang-2與NSCLC的臨床病理特征的關系，并初步探討了其診斷及預后價值。

資料與方法

一 、一般資料

選取2011年1月至2014年1月在我院治療的NSCLC患者178例(病例組)，納入標準：① 均經手術或穿刺活檢病理證實為NSCLC；② 未接受過化療、放療或其他腫瘤治療；③ 入選前兩周無外傷或其他手術治療史；④ 患者及家屬知情同意并簽署同意書。排除標準：① 合并有視網膜病變、缺血性心臟病、糖尿病等疾病；② 妊娠、哺乳期或月經期女性。本次研究在設計之初是按照1 ∶1比例選取，但由于健康者的參與意愿、經費等問題，對照組最終僅同時選取100例健康者作為正常對照組，兩組患者一般資料比較差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性(見表1)。

組別n男/女年齡(歲)病例組178102/7657．43±12．04對照組10057/4356．50±11．73t/χ20．0020．624P>0．05>0．05

二、檢測方法

清晨采集空腹靜脈血，按照10000r/min的離心速度進行離心分離血清，-20℃保存待測，采集標本后1周內檢測VEGF和Ang-2，采用瑞士羅氏全自動生化分析儀E170模塊進行檢測，檢測試劑盒購自上海泰康生物科技有限公司。具體檢測方法參照試劑盒說明書，試劑盒內配有質控血清或質控標準品，所有操作嚴格按照操作說明完成。

三、統計學處理

結 果

一、兩組患者VEGF和Ang-2含量比較

病例組VEGF和Ang-2均明顯高于對照組，差異比較有統計學意義，P<0.05，(見表2)。

組別nVEGFAng?2病例組178553．21±78．43390．12±90．70對照組100320．40±68．70242．50±87．63t27．81113．182P<0．05<0．05

二、NSCLC患者VEGF和Ang-2與臨床病理參數關系

NSCLC患者VEGF和Ang-2與患者年齡、性別及病理類型無關(P>0.05)；伴淋巴結轉移患者VEGF和Ang-2明顯高于無淋巴結轉移患者(P<0.05)；臨床分期為Ⅲ-Ⅳ期患者VEGF和Ang-2明顯高于Ⅰ-Ⅱ期患者，P<0.05。(見表3)。

三、NSCLC患者VEGF和Ang-2與預后的關系

本次研究隨訪截止日期為2016年2月，失訪12例，失訪率為6.74%。按照NSCLC患者VEGF和Ang-2含量的平均值，將患者分為低水平組和高水平組。VEGF高水平組患者生存時間為(18.97±0.95)月，明顯低于VEGF低水平組患者的(23.80±0.82)月，差異比較有統計學意義(2=25.107，P<0.05)；Ang-2高水平組患者生存時間為(19.42±0.91)月，明顯低于Ang-2低水平組患者的(23.71±0.81)月，差異比較有統計學意義(2=19.444，P<0.05)，(見圖1)。

四、VEGF、Ang-2診斷價值

采用ROC曲線分析,結果顯示VEGF曲線下面積為0.907，截斷值為442.45pg/mL，靈敏度為91.60%，特異度為89.00%；Ang-2曲線下面積為0.802，截斷值為312.43pg/mL，靈敏度為82.60%，特異度為85.00%。(見圖2)。

相關因素nVEGFtpAng?2tP年齡 <60歲110556．81±80．100．488>0．05396．21±92．321．008>0．05 ≥60歲68550．72±82．30381．42±99．40性別 男102557．16±79．230．442>0．05394．20±95．700．497>0．05 女76551．73±83．34387．19±89．40病例類型 腺癌87570．41±87．561．475>0．05405．22±101．401．486>0．05 鱗癌98550．73±93．20382．70±104．22淋巴結轉移 否57422．70±79．26-11．769<0．05301．27±91．41-6．378<0．05 是121574．56±80．81397．66±95．30臨床分期 Ⅰ-Ⅱ92431．06±80．35-8．338<0．05310．41±89．40-6．32<0．05 Ⅲ-Ⅳ86567．10±89．30396．72±92．81

圖1 VEGF和Ang-2高低水平患者生存曲線

圖2 VEGF、Ang-2診斷NSCLC的ROC曲線圖

討 論

NSCLC占肺部惡性腫瘤的45%以上，早期容易發生淋巴結及臨近器官的轉移，研究顯示NSCLC的五年生存率不足35%、中位生存時間不足34個月[6]。通過對于NSCLC的早期診斷或者臨床預后轉歸的評估，可以為肺癌根治性手術爭取機會，同時可以為出院患者的院外隨訪提供參考。血清CA125、CEA等腫瘤指標雖然在診斷及預后方面具有一定的價值，但其單獨或者聯合診斷的靈敏度和特異度均不足35%，漏診率及誤診率較高，同時CA125、CEA等評估患者遠期生存預后的診斷學一致性指標較差[7-8]。

在NSCLC的發生發展過程中，腫瘤新生血管的形成對于維持或者促進疾病的進展具有重要的意義，新生血管的形成可以增加腫瘤組織的血流灌注、增強其增殖和侵襲活力，同時新生血管的內皮通透性較高，癌細胞容易形成癌栓并通過血管內皮層浸潤臨近組織[9-10]。VEGF可以促進血管內皮細胞的誘導分化，調節腫瘤血管的形成、提高內皮層的通透性，促進NSCLC病情的進展[11]；ANG-2由血管內皮細胞分裂，在正常人體中對于血管內皮功能的影響不大，而在胚胎組織、炎癥及惡性腫瘤等中，ANG-2作為生物活性較高的糖蛋白，具有趨化血管形成的作用，并可協同VEGF共同作用促進NSCLC的發展[12-13]。已有的研究雖然探討了VEGF及ANG-2在NSCLC中的異常表達，但對于其評估患者遠期生存預后及早期診斷的價值分析不足。

本研究發現，NSCLC患者血清中的ANG-2及VEGF均明顯高于正常對照組，差異具有統計學意義，一方面表明VEGF及ANG-2可能參與到了惡性腫瘤的發生發展過程中，另一方面表明通過檢測ANG-2及VEGF可以為NSCLC患者的早期診斷提供潛在的臨床指標。Giannopoulou E等[14-15]研究者通過回顧性分析了53例NSCLC患者的血清學資料，發現ANG-2及VEGF可平均上升25%、40%，這與本研究的結論較為一致。ANG-2及VEGF的上升可以促進新生血管內皮細胞的形成和趨化，促進腫瘤血流高灌注，從而導致腫瘤細胞容易發生侵襲和轉移。對于相關臨床病理特征關系的研究發現，發生淋巴結轉移及臨床分期較晚的NSCLC患者，其VEGF及ANG-2的表達水平較高，提示二者對于NSCLC的淋巴結或者組織侵襲轉移的病理過程中可能發揮了重要的促進作用，VEGF等可以誘導淋巴結內皮細胞生長因子的活化，促進癌細胞栓對于淋巴結內皮層的粘附和侵襲。但本研究并未發現NSCLC細胞來源與VEGF或者ANG-2的關系，考慮可能與樣本量不足、檢測方法的不統一及臨床資料的納入排除標準偏移等有關。預后隨訪觀察分析可見，高表達VEGF及ANG-2的患者，其遠期生存預后較差，生存時間較低，臨床上對于VEGF及ANG-2表達較高的患者，出院后應注意加強隨訪，從而改善預后。VEGF及ANG-2在診斷NSCLC中同樣具有重要的臨床價值，VEGF單獨檢測的靈敏度及特異度均高達90%，而ANG-2的靈敏度及特異度也可達80%以上，診斷學價值較為理想。

綜上所述，VEGF及ANG-2在NSCLC患者中異常高表達，二者與患者的淋巴結轉移及臨床分期具有密切的關系；臨床上通過隨訪觀察VEGF及ANG-2可以為評估患者的遠期生存預后提供參考，同樣可以為NSCLC的早期診斷提供依據。但本次研究存在以下不足；① 樣本量不足，缺乏多中心的回顧性分析；② 對于遠期生存預后的隨訪研究不夠深入，五年生存率等指標的探討不足。

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Diagnostic specificity and prognostic judgment accuracy of serum VEGF and Ang-2 on non-small cell lung cancer

LIANGYue-ming,ZHANGPei-fang,LIUJian,MEIZhan-qiang,LIMin-jing
DepartmentofRespiratoryMedicine,theFirstPeople’sHospitalofFoshan,Foshan,Guangdong528000,China

Objective To investigate the diagnostic specificity and prognostic judgment accuracy of serum VEGF and Ang-2 on non-small cell lung cancer (NSCLC). Methods From January 2011 and January 2011 in our hospital, 178 patients with NSCLC were selected as the case group, and 100 healthy people were taken as the control group. It used ELISA to detect serum VEGF and Ang-2 content to analyze its relationship with clinical pathology and prognosis. Results The levels of VEGF and Ang-2 were (553.21±78.43) pg/mL and (390.12 ± 90.70) pg/mL in the case group, which were significantly higher than those in the control group (P<0.05). The level of VEGF and Ang-2 had nothing to do with their age, gender and pathological type (P>0.05), but it was obviously higher in patients with lymph node metastasis than in patients without lymph node metastasis (P<0.05). It was significantly higher in patients at clinical stage Ⅲ -Ⅳ than in patients at stage Ⅰ-Ⅱ (P<0.05). The level of VEGF was significantly higher in patients with survival time of (18.97±0.95) months than in patients with (23.80±0.82) months survival time (P<0.05), and the level of Ang-2 was higher in patients with (19.42±0.91) months survival time than in patients with (23.71±0.81) months (P<0.05). For VEGF, the area under the curve of VEGF was 0.907, the cut-off value was 442.45 pg/mL, the sensitivity was 91.60%, and the specificity was 89.00%. For Ang-2, the area under the curve was 0.802, the cut-off value was 312.43 pg/mL, the sensitivity was 82.60%, and the specificity was 85.00%. Conclusion Serum VEGF and Ang-2 can be used as molecular markers in NSCLC diagnosis and prognosis judgment, which has important clinical value.

non-small cell lung cancer; vascular endothelial growth factor; angiopoietin-2; prognosis; diagnosis

10.3969/j.issn.1009-6663.2017.07.009

528000 廣東 佛山，佛山市第一人民醫院呼吸科

李敏菁，E-mail：liminglin_7588@126.com

2016-11-17]