ADA、T—spot聯合檢測對結核性胸膜炎疾病診斷的意義分析

劉鈴+孫曉娜+蔣偉光

【摘要】 目的 研究腺苷脫氨酶（ADA）、T 細胞斑點試驗（T-spot）聯合檢測對結核性胸膜炎疾病診斷的臨床意義。方法 選取80例疑似結核性胸膜炎患者， 采用ADA、T-spot聯合檢測， 利用ROC曲線探討胸腔積液ADA和T-spot聯合檢測的陽性率和本文確定的ADA臨界值與傳統的ADA臨界值進行比較。結果 ADA檢測診斷ROC曲線下胸腔積液的面積為0.959（95%CI：0.916～1.000）， ADA檢測對結核性胸膜炎胸腔積液有較高的診斷價值， 而當約登指數為最高值時， ADA的臨界值設定為22.5IU/L。經診斷， 確診的胸膜炎患者有45例， 非結核性胸膜炎患者有35例；采用T-spot檢測結核性胸膜炎的陽性率為91.11%， ADA檢測的陽性率為80.00%， ADA、T-spot聯合檢測的陽性率為97.78%；T-spot檢測的陽性率明顯高于ADA檢測的陽性率， 差異有統計學意義（P<0.05）；ADA、T-spot聯合檢測的陽性率明顯高于ADA和T-spot的單獨檢測， 差異有統計學意義（P<0.05）。結論 ADA、T-spot聯合檢測結核性胸膜炎的診斷具有較為重要的意義， 能夠快速、準確地檢測患者的胸膜炎， 且具有較高的靈敏度， 診斷效果較好， 可以在臨床上推廣。

【關鍵詞】 腺苷脫氨酶；T 細胞斑點試驗；結核性胸膜炎；診斷意義

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2017.14.023

結核病是由于結核桿菌引起的一種具有傳染性的疾病， 是世界上單一病菌導致死亡的最多的疾病， 中國也具有較高的發病率， 每年估計有新發的結核病患者130萬例， 占全球發病率的14.3%[1]。結核性胸膜炎是一種較為常見的疾病， 它并不具有特異的臨床表現， 對其采用細菌檢測的陽性率較低， 而胸膜活檢的使用又存在一定的局限性， 因此對結核性胸膜炎的檢測和診斷就成為了臨床醫生和學者重視的問題， 本文就結核性胸膜炎疾病采用ADA、T-spot聯合檢測， 觀察其效果， 為臨床檢測提供理論參考。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取2015年8月～2016年7月在本院進行治療的80例疑似結核性胸膜炎患者， 其中男52例， 女28例， 年齡22～78歲， 平均年齡（49.5±9.5）歲， 病程1～3個月， 平均病程（1.5±0.8）個月；患者出現咳嗽、咳痰、呼吸困難等癥狀， 與患者交談其家庭經濟水平一般。

1. 2 方法

1. 2. 1 T-spot檢測：采集患者外周血5ml于肝素鈉抗凝管中， 將外周血的單個細胞用淋巴細胞分離進行分離， 調整AIM-V培養液的濃度為2.5×106/ml。將T-spot試劑盒取出放在預先包被有抗γ-干擾素抗體的微孔板上， 在4個微孔中由上至下分別加入植物血凝素50 μl作為陽性對照孔， A孔中加入50 μl ESAT-6抗原， B孔中加入培養濾液蛋白-10（CEP-10）抗原50 μl， 加入50 μl AIM-V培養液作為陰性對照孔。最后分別再加入細胞稀釋工作液100 μl于4孔中， 調節培養箱溫度為37℃， 加入5% CO2， 然后將培養板放入后孵育16～20 h， 用磷酸緩沖液（PBS）將微孔板洗4次， 在其中加入二抗， 采用堿性磷酸酶標記， 調節溫度為2～8℃進行孵育， 時間為1 h， PBS洗板4次， 在常溫避光條件下加入底物后， 用7min進行顯色， 然后終止反應并用蒸餾水沖洗[2]。

1. 2. 2 ADA檢測 采用速率法進行ADA檢測， 選用深圳邁瑞生物醫療電子股份有限公司生產的試劑及全自動生化分析儀， 進行檢測并對結果進行分析。

1. 3 觀察指標 探討胸腔積液ADA和T-spot聯合檢測的準確性、特異性和陽性率。

1. 4 統計學方法 采用SPSS20.0統計學軟件進行數據統計分析。計數資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗。P<0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2. 1 ADA檢測臨界值與傳統ADA臨界值比較 利用ROC曲線計算胸腔積液， ADA檢測診斷ROC曲線下胸腔積液的面積為0.959（95%CI：0.916～1.000）， ADA檢測對結核性胸膜炎胸腔積液有較高的診斷價值， 而當約登指數為最高值時， ADA的臨界值設定為22.5 IU/L， 此時本文確定的ADA臨界值與傳統的ADA臨界值見表1。

2. 2 ADA和T-spot檢測結核性胸膜炎的陽性率比較 經診斷， 確診的胸膜炎患者45例， 非結核性胸膜炎患者35例。T-spot檢測的陽性率（91.11%）明顯高于ADA檢測的陽性率（80.00%）， 差異有統計學意義（P<0.05）；ADA、T-spot聯合檢測的陽性率明顯高于ADA和T-spot的單獨檢測， 差異有統計學意義（P<0.05）。見表2。

3 討論

結核性胸膜炎是由于肺部的結合炎癥累及到胸部從而引發的。有時結核性胸膜炎也可以通過血行感染， 與機體的變態反應有很大的關系[3]。它具有較多的發病原因， 原發性結核病是由于結核桿菌侵入人體造成的， 結核桿菌根據其不同的類型分為：人型、牛型、鳥型和鼠型， 而對人體具有致病力的是人型和牛型結核桿菌。大多數結核桿菌胸膜炎起病較急， 臨床表現主要為全身中毒癥狀和胸腔積液導致局部癥狀， 有發熱、乏力、出汗、食欲不振、盜汗等。而局部癥狀主要有胸痛、干咳和呼吸困難。有些患者隨著呼吸運動而產生胸痛， 深呼吸或咳嗽時疼痛較為明顯。若患者的胸腔內出現積液時， 聽診可有胸膜摩擦音。

T-spot是通過特異性T細胞數量來診斷結核感染的。由于結核分枝桿菌（MTB）的RD1基因序列合成了ESAT-6和CFP-10兩種蛋白， 而這兩種基因序列又只存在于MTB中， 其他的環境中均不含這種基因序列， 因此這兩種結合感染均可以采用特異性抗原刺激這種基因進行檢測， 致使T-spot的檢測具有高度特異性。ADA是一種輔助性T淋巴細胞的標志物， 當出現活動性結核時， 細胞受到刺激， 致使淋巴細胞增多， 從而導致細胞內的ADA進入胸腔積液中， 因此在發生結核性胸膜炎時， ADA活性的檢測在胸腔積液中的活性較高。

綜上所述， ADA、T-spot聯合檢測具有較高的特異性和靈敏度， 對結核性胸膜炎具有較高的診斷價值， 可以在臨床上推廣。

參考文獻

[1] 施健， 周麗榮， 孫寶華， 等. ADA聯合IFN-γ及LAM抗原檢測對結核性胸膜炎的診斷價值. 疑難病雜志， 2014， 13（1）：46-48.

[2] 廖兵， 丁顯平. T-SPOT.TB和ADA在結核性胸膜炎中的診斷價值. 國際檢驗醫學雜志， 2014， 35（17）：2323-2325.

[3] 鄭立恒， 柳曉金， 劉會， 等. 3種方法在診斷結核性胸膜炎中的價值. 河北醫科大學學報， 2016， 37（7）：822-824.

[收稿日期：2016-11-28]