急性缺血性卒中早期血漿miRNAs水平與房顫相關(guān)性研究

張宇　周石

[摘要] 目的 探討和分析急性缺血性卒中早期血漿miRNAs水平和房顫發(fā)生之間的相互關(guān)系。 方法 整群選取該院神經(jīng)內(nèi)科在2016年10月—2017年2月期間收治的急性缺血性卒中患者195例為分析對(duì)象，依據(jù)其是否合并有房顫又劃成持續(xù)性房顫組（65例）和陣發(fā)性房顫組（65例）以及非房顫組（65例），并以同期在該院進(jìn)行體檢的健康體檢者65名作為健康組，用2-ΔΔCt法來對(duì)miRNAs具有的相對(duì)表達(dá)量實(shí)施測試。 結(jié)果 持續(xù)性房顫組患者的miR-328為（5.51±0.76），顯著高于陣發(fā)性房顫組；持續(xù)性房顫組的miR-150為（0.63±0.52），顯著低于健康對(duì)照組；健康對(duì)照組和非房顫組的miR-29b分別為（1.00±0.39）、（0.91±0.27），均明顯高于陣發(fā)性房顫組；以上組間對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；持續(xù)性、陣發(fā)性房顫組的miR-29b分別為（0.50±0.39）、（0.49±0.41），該兩組的miR-29b對(duì)比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。 結(jié)論 早期血漿miRNAs水平中的miR-328、miR-29b和miR-150指標(biāo)與急性缺血性卒中合并房顫的發(fā)生呈顯著相關(guān)。因此，這些分子可能有望作為急性缺血性卒中患者是否合并房顫的有效預(yù)測指標(biāo)。在預(yù)測急性缺血性卒中患者是否具有陣發(fā)性房顫時(shí)，有望將miR-29b的實(shí)際水平作為有效的參考依據(jù)，應(yīng)引起足夠的重視。

[關(guān)鍵詞] 腦卒中；缺血性卒中；miRNAs水平；房顫

[中圖分類號(hào)] R743 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-0742（2017）07（c）-0046-03

[Abstract] Objective To study and analyze the correlation between the early plasma of acute ischemic stroke miRNAs level and atrial fibrillation. Methods 195 cases of patients with acute ischemic stroke admitted and treated in our hospital from October 2016 to February 2017 were cluster selected and divided into two groups with 65 cases in each according to whether the patients were with atrial fibrillation or not， and 65 cases of healthy people were selected as the healthy group at the same period， and the relative expression amount of the miRNA was tested by the 2-ΔΔCt method. Results The miR-328 was in the continuous group was obviously higher than that in the paroxysmal group， which was（5.51±0.76）in the continuous group， and the miR-150 was（0.63±0.52） in the continuous group， which was obviously lower than that in the healthy control group， and the miR-29b in the healthy control group and non- atrial fibrillation group was respectively（1.00±0.39） and（0.91±0.27）， which were obviously higher than those in the paroxysmal group， and the differences between groups were obvious with statistical significance（P<0.05）， and the miR-29b in the continuous and paroxysmal groups were respectively （0.50±0.39） and （0.49±0.41）， and the difference was obvious with statistical significance（P>0.05）. Conclusion The miR-328， miR-29b and miR-150 in the early plasma miRNAs level have an obvious correlation with the occurrence of acute ischemic stroke complicated with atrial fibrillation， therefore， which can be expected to be effective predictive indexes of whether the acute ischemic stroke patients are with atrial fibrillation or not， and the practical level of miR-29b can be used as an effective reference basis of prediction， and we should attach enough importance.

[Key words] Stroke； Ischemic stroke； miRNAs level； Atrial fibrillationendprint

據(jù)調(diào)研，有超過19%的缺血性卒中是由于房顫（即心房顫動(dòng)）導(dǎo)致的，伴有房顫的卒中患者在預(yù)后方面要比無房顫患者更差[1]。陣發(fā)性房顫盡管作用時(shí)間不長，可是其引發(fā)卒中的風(fēng)險(xiǎn)并不低于持續(xù)性房顫?，F(xiàn)階段，在臨床往往難以借助常規(guī)的心電圖來篩選陣發(fā)性房顫患者，而24 h動(dòng)態(tài)心電圖雖然屬于診斷陣發(fā)性房顫的常用手段，但其檢出率卻不是很高[2-3]。對(duì)于急性缺血性卒中患者來說，其miRNAs分子表達(dá)是否會(huì)發(fā)生改變，若同時(shí)伴有陣發(fā)性房顫或是合并房顫，則其血漿內(nèi)特異性miRNAs的改變是否也類似于單純房顫患者，為了解決以上問題，對(duì)房顫及其相關(guān)卒中的全面篩查，特別是miRNAs的測定，將會(huì)有著極大的臨床價(jià)值，該文主要對(duì)2016年10月—2017年2月期間收治的急性缺血性卒中患者195例進(jìn)行綜合的研究與檢測，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

整群選取該院神經(jīng)內(nèi)科在收治的急性缺血性卒中患者195例為分析對(duì)象，全部患者都達(dá)到了我國舉辦的第四屆腦血管病學(xué)術(shù)會(huì)議確立的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)。依據(jù)其是否合并有房顫又劃成2組，即房顫組（130例）和非房顫組（65例），同時(shí)，根據(jù)房顫在種類上的不同，再將房顫組細(xì)分成持續(xù)性房顫組（65例）和陣發(fā)性房顫組（65例）。并以同期在該院進(jìn)行體檢的健康體檢者65名作為健康組，持續(xù)性房顫組男性共34例，女性共31例，年齡均在26～79歲之間，平均年齡是（57.1±2.6）歲。陣發(fā)性房顫組患者男性共32例，女性共33例，年齡均在27～80歲之間，平均年齡是（58.2±2.3）歲。非房顫組患者男性共35例，女性共30例，年齡均在25～76歲之間，平均年齡是（58.5±2.2）歲。健康組男性共36名，女性共29名，年齡均在24～83歲之間，平均年齡是（54.4±2.1）歲。以上4個(gè)組無論在性別還是年齡等方面對(duì)比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），存在著可比性。

1.2 方法

在患者發(fā)病后的24 h之內(nèi)，抽取其空腹外周靜脈內(nèi)的血液6 mL，放在 EDTA抗凝管中。再抽提各取樣血漿里面的全部RNA，借助TaqMan反轉(zhuǎn)錄試劑盒來完成反轉(zhuǎn)錄，并選擇定量反轉(zhuǎn)錄-PCR法來對(duì)miR-150、以及miR-328和miR-29b的表達(dá)實(shí)施測試，同時(shí)將U6看作為內(nèi)部參考指標(biāo)。之后，運(yùn)用2-ΔΔCt法來對(duì)miRNAs具有的相對(duì)表達(dá)量實(shí)施測試，所有患者均反復(fù)測試3次。對(duì)照組體檢時(shí)根據(jù)上述方法進(jìn)行指標(biāo)測定。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法

借助SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件來對(duì)得到的全部資料做綜合的分析與處理。計(jì)量資料用（x±s）表示，以t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

持續(xù)性房顫組患者的miR-328為（5.51±0.76），顯著高于陣發(fā)性房顫組；持續(xù)性房顫組的miR-150為（0.63±0.52），顯著低于健康對(duì)照組；健康對(duì)照組和非房顫組的miR-29b分別為（1.00±0.39）、（0.91±0.27），均明顯高于陣發(fā)性房顫組；以上組間對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；持續(xù)性、陣發(fā)性房顫組的miR-29b分別為（0.50±0.39）、（0.49±0.41），該兩組的miR-29b對(duì)比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見表1。

3 討論

相關(guān)研究認(rèn)為miRNAs水平與急性缺血性卒中伴發(fā)房顫密切相關(guān)[4]。Khanna S等[5]通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，miR-328的過表達(dá)可誘發(fā)小鼠房顫的發(fā)生，而miR-328敲減小鼠或給予腺病毒連接的miR-328反義寡核苷酸則可減輕房顫的發(fā)生，提示miR-328升高是誘發(fā)心房顫動(dòng)的靶點(diǎn)。臨床研究發(fā)現(xiàn)，房顫患者的血漿miR-328水平較健康對(duì)照顯著升高。

梁健球[6]通過研究發(fā)現(xiàn)，房顫患者血漿中miR-328的實(shí)際水平在陣發(fā)性房顫組、以及永久性和持續(xù)性房顫組中均顯現(xiàn)了不同的表達(dá)。經(jīng)該研究證明，持續(xù)性房顫組患者的miR-328為（5.51±0.76），得到了顯著提升，但miR-150為（0.63±0.52），處于較低水平，不但顯著優(yōu)于健康對(duì)照組，而且優(yōu)于非房顫組，這和梁健球研究基本相符。此外，持續(xù)性房顫組患者血漿內(nèi)miR-328的實(shí)際水平為（5.51±0.76），顯著高于陣發(fā)性房顫組，這又和Giorgia Manina等[7]研究結(jié)果基本相符，該研究血漿內(nèi)miR-328值為（5.28±0.80），該結(jié)果提示：這并不是缺血性卒中的原因?qū)е碌模饕怯捎诜款澋膰?yán)重程度以及存在時(shí)間長短導(dǎo)致了持續(xù)性房顫組內(nèi)miRNAs的差異表達(dá)。

通過研究還發(fā)現(xiàn)，陣發(fā)性房顫組患者的miR-29b為（0.49±0.41），不僅明顯低于健康對(duì)照組，還明顯低于非房顫組，但是和持續(xù)性房顫組對(duì)比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，這提示：這并不是房顫的嚴(yán)重程度以及持續(xù)時(shí)間導(dǎo)致的，主要是由于受到房顫實(shí)際狀態(tài)的影響。這些結(jié)果也提示，缺血性卒中影響了miR-29b的表達(dá)，抑或是miR-29b水平的改變參與了缺血性卒中的病理發(fā)生機(jī)制，所以，在預(yù)測急性缺血性卒中患者是否具有陣發(fā)性房顫時(shí)，有望將miR-29b指標(biāo)的實(shí)際水平作為有效的參考依據(jù)[8]。

綜上所述，miR-328、miR-29b和miR-150與急性缺血性卒中合并房顫的發(fā)生呈顯著相關(guān)。因此，這些分子可能有望作為急性缺血性卒中患者是否合并房顫的有效預(yù)測指標(biāo)。在預(yù)測急性缺血性卒中患者是否具有陣發(fā)性房顫時(shí)，有望將miR-29b的實(shí)際水平作為有效的參考依據(jù)，應(yīng)引起足夠的重視。

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（收稿日期：2017-04-24）endprint