中藥對類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜細(xì)胞增殖與凋亡的研究

馬華　刁永紅

【關(guān)鍵詞】 類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎；中藥；滑膜細(xì)胞；增殖；凋亡

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2017.34.110

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（rheumatioid arthritis， RA）是一種以關(guān)節(jié)滑膜慢性炎癥病變?yōu)橹鞯娜硇宰陨砻庖咝约膊。?其最具有特征性的病理改變是滑膜炎和血管翳的形成， 具有類似于“局部惡性腫瘤”的增生性和破壞性的特點(diǎn)[1]， 導(dǎo)致關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)破壞、畸形及功能喪失。我國患病人群約占0.32%～0.36%， 該病5～10年的致殘率為60%， 是造成我國人民殘疾和喪失勞動力的主要疾病之一。因此抑制滑膜細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)滑膜細(xì)胞凋亡成為治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的主要策略之一。

1 單味中藥的研究

1. 1 白芍總苷（TGP） 白芍總苷是從白芍中提取的一組糖苷類物質(zhì)， 具有抗炎鎮(zhèn)痛、免疫調(diào)節(jié)、保肝等作用， 能從多途徑抑制自身免疫反應(yīng)， 臨床上用來治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、強(qiáng)直性脊柱炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、幼年特發(fā)性關(guān)節(jié)炎等。

賈曉益等[2]研究白芍總苷對膠原性關(guān)節(jié)炎（collagen induced arthritis， CIA）滑膜組織中Bcl-2、Bax基因表達(dá)的影響。將SD大鼠隨機(jī)分成正常組、模型組和白芍總苷大、小劑量組四組；采用雞Ⅱ型膠原皮內(nèi)注射誘導(dǎo)大鼠膠原性關(guān)節(jié)炎模型；運(yùn)用免疫組織化學(xué)法觀察Bcl-2、Bax參與膠原性關(guān)節(jié)炎的發(fā)病過程。結(jié)果顯示白芍總苷可下調(diào)滑膜組織中Bcl-2表達(dá)；上調(diào)Bax表達(dá)及降低Bcl-2/Bax的比值。Bax、腫瘤壞死因子等誘導(dǎo)凋亡， 而Bcl-2、p53等抑制凋亡的發(fā)生， 推測白芍總苷通過調(diào)控促凋亡基因及抑凋亡基因的表達(dá)， 以促進(jìn)滑膜細(xì)胞凋亡， 并認(rèn)為這可能是其治療膠原性關(guān)節(jié)炎的機(jī)制之一。

1. 2 雷公藤多苷（TWP） 雷公藤又名三棱花、黃藤根、斷腸草等， 功用舒經(jīng)活血、祛風(fēng)除濕、消腫解毒止痛。雷公藤多苷是從衛(wèi)茅科雷公藤屬雙子葉植物中提取的多苷類物質(zhì)， 具有止痛消炎、抑制免疫等作用， 對類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎具有良好的療效。

胡永紅等[3]觀察雷公藤甲素（triptolide）對膠原性關(guān)節(jié)炎大鼠滑膜細(xì)胞凋亡的影響， 選用Wistar大鼠造模， 流式細(xì)胞儀結(jié)果顯示正常組、模型組、雷公藤組的凋亡細(xì)胞分別為（0.87±0.24）%、（1.83±0.82）%和（3.98±1.16）%。三組S期細(xì)胞分別為（3.4±0.7）%、（8.0±1.4）%和（3.3±1.20）%。缺口末端標(biāo)記法（TUNEL）標(biāo)記結(jié)果顯示三組凋亡細(xì)胞分別為（1.0±0.4）%、（2.2±1.0）%和（4.5±0.9）%。雷公藤組與模型組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。本實(shí)驗(yàn)首次闡明雷公藤甲素可誘導(dǎo)膠原性關(guān)節(jié)炎大鼠滑膜細(xì)胞凋亡。

1. 3 青藤堿（SN） 青藤堿是從中藥青風(fēng)藤中提取的單體生物堿， 對自身免疫性疾病有較好的治療效果， 尤其在治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎方面具有較明確的療效， 具有抗炎止痛、免疫抑制、鎮(zhèn)靜、降壓等作用。

陳光星等[4]通過動物實(shí)驗(yàn)表明青藤堿可通過下調(diào)p53基因表達(dá)來誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡、抑制滑膜細(xì)胞增生， 改善佐劑性關(guān)節(jié)炎（AA）大鼠的關(guān)節(jié)炎癥。張瑩等[5]研究表明青藤堿在一定濃度及作用時間內(nèi)可抑制類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者成纖維樣滑膜細(xì)胞（FLS）增殖， 誘導(dǎo)凋亡。這可能是青藤堿治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎機(jī)制之一。

1. 4 昆明山海棠 昆明山海棠又稱六方藤、紫金藤、火把花等， 為衛(wèi)茅科雷公藤屬植物， 具有抗腫瘤、解毒抗炎等作用， 臨床上治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎已被證實(shí)有確切療效。

曾潤銘等[6]研究昆明山海棠對類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜細(xì)胞體外增殖和凋亡的影響。取6例類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者滑膜組織， 3例正常滑膜組織， 通過消化法獲得原代類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜細(xì)胞及正常滑膜細(xì)胞， 第2～4代細(xì)胞用免疫磁珠法篩選滑膜CD68+細(xì)胞和CD68-細(xì)胞， 72 h后加入昆明山海棠藥液， 結(jié)果顯示昆明山海棠對類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜成纖維樣細(xì)胞和巨噬樣細(xì)胞有明顯抑制異常增生和誘導(dǎo)凋亡的作用。

1. 5 白藜蘆醇（Res） 白藜蘆醇是一種多酚類化合物， 主要存在于果類和虎杖等多種植物中。白藜蘆醇是植物在真菌感染、紫外線照射、機(jī)械損傷等不利條件下產(chǎn)生的“植物補(bǔ)體”， 能保護(hù)植物， 具有抑制血小板聚集、抗血栓、抗炎、抗脂質(zhì)過氧化等作用。中醫(yī)常用虎杖根（主要成分為白藜蘆醇）來治療各類關(guān)節(jié)炎， 取得良好療效。近年來發(fā)現(xiàn)白藜蘆醇可通過誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡而起抗癌作用。

唐玲麗等[7]用不同濃度白藜蘆醇處理體外培養(yǎng)的類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜細(xì)胞24 h， caspase-3酶原的表達(dá)隨藥物濃度的增加而減少。白藜蘆醇在體外抑制類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜細(xì)胞增殖， 誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡， 可能與caspase-3酶原的活化有關(guān)。

1. 6 黃芪多糖 黃芪多糖是黃芪中含量最多、免疫活性較強(qiáng)的一類物質(zhì)， 是黃芪的主要活性成分。近年來對黃芪的藥理作用研究甚多， 具有增強(qiáng)機(jī)體的免疫機(jī)能， 并具有抗腫瘤作用。

李洪全等[8]研究黃芪雜多糖（AHPS）對佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠促炎因子分泌及關(guān)節(jié)滑膜細(xì)胞凋亡的調(diào)節(jié)作用。黃芪雜多糖和雷公藤多苷均可使佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠的膝關(guān)節(jié)滑膜細(xì)胞凋亡數(shù)目升高明顯， 顯著下調(diào)佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠膝關(guān)節(jié)滑膜Bcl-2的陽性表達(dá)和上調(diào)Bax的陽性表達(dá)。

2 復(fù)方中藥的研究

2. 1 桂枝芍藥知母湯 桂枝芍藥知母湯最早記載于張仲景《金貴要略·中風(fēng)歷節(jié)病脈證并治第五》， 是歷代醫(yī)家廣泛應(yīng)用治療痹證的主要方劑。

余闐等[9]以“桂枝芍藥知母湯濃縮液”為干預(yù)藥物研究其對佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠滑膜細(xì)胞凋亡、增殖的影響， 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組的作用均優(yōu)于對照組， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）， 實(shí)驗(yàn)組Fas抗原表達(dá)上調(diào)， 細(xì)胞凋亡增加；p53蛋白、Bcl-2蛋白表達(dá)下調(diào)， 為桂枝芍藥知母湯在臨床上治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。endprint