免疫組化染色法在對患者進行肝臟穿刺組織病理檢查中的應用效果

王平平

（陽泉市第一人民醫院病理科， 山西 陽泉 045000）

免疫組化染色法在對患者進行肝臟穿刺組織病理檢查中的應用效果

王平平

（陽泉市第一人民醫院病理科， 山西 陽泉 045000）

目的：研究免疫組化染色法在對患者進行肝臟穿刺組織病理檢查中的應用效果。方法：對2016年1月至2017年7月期間在陽泉市第一人民醫院接受肝臟穿刺組織病理檢查的120例患者的臨床資料進行回顧性研究。根據組織標本染色方式的不同將其分為HE組（n=60）和免疫組化組（n=60）。采用HE染色法對HE組患者的組織標本進行染色，采用免疫組化染色法對免疫組化組患者的組織標本進行染色。分析總結兩種染色方式對組織切片質量和檢查結果的影響。結果：免疫組化組患者組織切片質量的優良率、接受病情診斷的準確率分別為98.3%、96.7%，HE組患者組織切片質量的優良率、接受病情診斷的準確率分別為83.3%、80.0%，組間差異有統計學意義（P＜0.05）。結論：免疫組化染色法在對患者進行肝臟穿刺組織病理檢查中的應用效果顯著。

肝臟穿刺組織；病理檢查；免疫組化；HE

病理檢查是目前臨床上診斷惡性腫瘤的主要方式。進行病理檢查的操作環節較多，在任一環節中發生失誤都將影響檢查結果的準確性。免疫組化染色技術是一種新型染色技術。近年來，免疫組化染色技術在診斷惡性腫瘤方面得到了廣泛的應用。為了研究免疫組化染色法在肝臟穿刺組織病理檢查中的應用效果，筆者對在陽泉市第一人民醫院接受肝臟穿刺組織病理檢查的120例患者的臨床資料進行了回顧性研究。

1 資料與方法

1.1 基線資料

選取2016年1月至2017年7月期間在陽泉市第一人民醫院接受肝臟穿刺組織病理檢查的120例患者作為研究對象。根據組織標本染色方式的不同將其分為HE組（n=60）和免疫組化組（n=60）。HE組患者中有男33例，女27例；其年齡為32～79歲，平均年齡（53.4±9.7）歲；其中有轉移性肝癌患者7例，肝血管瘤患者16例，濾泡樹突細胞肉瘤患者5例，肝細胞癌患者32例。免疫組化組患者中有男32例，女28例；其年齡為32～78歲，平均年齡（53.3±9.8）歲；其中有轉移性肝癌患者8例，肝血管瘤患者16例，濾泡樹突細胞肉瘤患者5例，肝細胞癌患者31例。兩組患者的基線資料相比，P＞0.05，存在可比性。

1.2 研究對象的納入標準

疑似患有肝臟惡性腫瘤。2）具有進行肝臟穿刺組織病理檢查的指征。3）本人及其家屬均自愿參與本研究，并簽署了知情同意書。

1.3 研究對象的排除標準

處于妊娠期或哺乳期。2）患有精神障礙或意識障礙。

1.4 方法

采用HE染色法對HE組患者的組織標本進行染色。染色方法是：1）將患者的肝臟穿刺組織置于4%的中性甲醛組織固定液中進行固定，4 h后使用AF液將其浸泡1 h，然后依次使用75%的乙醇溶液、80%的乙醇溶液、90%的乙醇溶液、95%的乙醇溶液、100%的乙醇溶液（Ⅰ）、100%的乙醇溶液（Ⅱ）將其浸泡1 h。2）依次使用二甲苯溶液（Ⅰ）、二甲苯溶液（Ⅱ）將其浸泡30 min。3）對組織標本進行浸蠟、包埋、切片處理。4）在60℃的溫度下對組織切片進行烤片2 h，然后對其進行HE染色。5）完成染色后，在光學顯微鏡下觀測組織切片。采用免疫組化染色法對免疫組化組患者的組織標本進行染色。染色方法是：1）對組織標本進行固定、浸泡、浸蠟、包埋、切片處理的方法與HE組相同。2）對組織切片進行脫蠟處理，并將其置入3%的雙氧水中浸泡20 min。3）用PBS緩沖液對組織切片進行沖洗3次以上（沖洗的時間＞15 min），然后將700 ml的檸檬酸緩沖液（pH為6.0）置入燒杯內加熱。4）在檸檬酸緩沖液沸騰后，將組織切片置入燒杯內。15 min后將組織切片取出，在常溫下冷卻5 min后，使用PBS緩沖液（pH為7.4）對其進行沖洗3次以上（沖洗的時間＞15 min）。5）對組織切片進行一抗處理，然后將其置于4℃的冰箱中孵育。在第2 d，將組織切片取出，并再次使用PBS緩沖液（pH為7.4）對其進行沖洗。6）對組織切片進行二抗處理，對其進行常溫孵育10 min，然后使用PBS緩沖液（pH為7.4）對其進行沖洗。7）使用二氨基聯苯胺(DAB)顯色溶液對組織切片進行顯色處理，然后用清水對其進行沖洗。8）用蘇木精對組織切片進行襯染，并使用透明脫水樹膠對其進行封固。完成染色后，在光學顯微鏡下觀測組織切片。

1.5 觀察指標

觀察比較兩種染色方式對組織切片質量和檢查結果的影響[1]。

1.6 統計學處理

用SPSS 19.0軟件處理本文中的數據。計量資料用（±s）表示，采用t檢驗，計數資料用%表示，采用χ2檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

免疫組化組患者組織切片質量的優良率、接受病情診斷的準確率分別為98.3%、96.7%。HE組患者組織切片質量的優良率、接受病情診斷的準確率分別為83.3%、80.0%。免疫組化組患者組織切片質量的優良率、接受病情診斷的準確率均高于HE組患者，差異有統計學意義（P＜0.05）。詳見表1。

表1 兩組患者組織切片質量的優良率、接受病情診斷準確率的比較[n(%)]

3 討論

以往臨床上常采用HE染色法對組織切片進行染色，但效果一般。免疫組化染色技術是一種新型染色技術。近年來，免疫組化染色技術在診斷惡性腫瘤方面得到了廣泛的應用。相關的文獻報道指出，采用免疫組化染色法對組織切片進行染色時不會出現內源性生物素引起的背景染色，從而可顯著提高組織切片的質量[2]。本研究的結果顯示，與HE組患者相比，免疫組化組患者組織切片質量的優良率、接受病情診斷的準確率均更高。可見，免疫組化染色法在對患者進行肝臟穿刺組織病理檢查中的應用效果較為理想。筆者認為，采用免疫組化染色法對組織切片進行染色時應注意以下幾點：1）取材。保證取材病灶部位組織的厚薄一致，避免取到壞死、變性的組織。取材后應及時對組織標本進行相應的保存處理，以免其遭受污染或發生變質。2）固定。及時對組織標本進行固定，以免其發生自溶[3]。

綜上所述，免疫組化染色法在對患者進行 肝臟穿刺組織病理檢查中的應用效果顯著。此法值得在臨床上推廣應用。

[1]許紅英.免疫組化在肝臟穿刺組織病理診斷中的價值分析[J].世界臨床醫學,2016,10(21):224.

[2]陳素梅,鄧勇,林成祖,等.乙型肝炎e抗原陰性的慢性乙型肝炎病毒感染患者肝組織病理和免疫組化特點研究[J].中國基層醫藥,2016,23(2):204-207,208.

[3]方靜怡,朱正鵬,李凱,等.IgG、IgM抗體在自身免疫性肝病的表達研究[J].肝臟,2016,21(9):740-743.

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]2095-7629-（2017）21-0189-02