酶抑制法檢測蔬菜農藥殘留的效果探究

張寶華 魏巍

摘 要 隨著我國農業技術的不斷發展，蔬菜的生長期得到了縮短。但由于我國環境污染的加劇，蔬菜的病蟲害越來越重，導致了農藥的廣泛使用，蔬菜需要施放農藥后才能夠生長和成熟。蔬菜的農藥殘留問題以及食品安全問題已成為社會和群眾普遍關注的問題，加強對蔬菜農藥殘留的檢測，保證蔬菜食用的安全性是急需解決的問題之一。基于此，探討與分析酶抑制法在蔬菜農藥殘留檢測中的效果。

關鍵詞 酶抑制法；蔬菜；農藥殘留；檢測技術

中圖分類號：S481+.8 文獻標志碼：B DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2018.09.057

目前，由于市場上的生產者沒有嚴格遵守農藥的安全使用準則，導致了農藥的超量使用，甚至使用違禁的農藥，增加了中毒事件發生率[1-2]。為了確保我國人民群眾的生命安全，必須嚴格控制農藥的使用，加強對蔬菜農藥殘留的檢測。我國對于蔬菜農藥殘留主要通過酶抑制法進行檢測，酶抑制法具有時間短、效率高的特點，對于檢測人員技術要求水平較低，在我國蔬菜生產基地、農產品質量安全檢測機構中運用較為廣泛，能夠保證蔬菜產品的安全性。

1 蔬菜農藥殘留

農產品生產過程中施用農藥后都會殘留農藥，農藥可殘留于蔬菜產品中，也可以殘留于水或土中，此種現象則被成為農藥殘留[3]。農藥污染較為嚴重的有小白菜、油菜、韭菜等葉類蔬菜。相關文獻報道，目前世界上農藥的品種已經達到上千種，常見的有殺蟲劑、除草劑、生長調節劑等，農藥殘留嚴重危害人體的身體健康，嚴重者可能導致人體大腦、血液等受到損傷。

2 蔬菜農藥殘留檢測的必要性

近年來，隨著病蟲害發生頻率的增加，農藥的品種和毒性也在隨之增強，農藥的使用有效的防治了病蟲害，為農業帶來了巨大的豐收，但同時也嚴重破壞了生態系統的平衡，加重了生態壞境的惡化程度。殘留的農藥會通過蔬菜等食品進入人體，食用含有農藥殘留的蔬菜會導致人體急性中毒，長期食用農藥殘留超標的蔬菜，可能引起慢性中毒，嚴重者甚至誘發癌癥[4]。我國十分重視農藥的檢測，制定了一系列的法律法規來控制農產品中的農藥殘留值，如《農產品質量安全法》《農藥合理使用準則》等，降低農藥對蔬菜的污染，切實保障大眾人群的健康和安全。

3 蔬菜農藥殘留檢測技術

蔬菜農藥殘留的檢測方法大致可以分為快速檢測技術、色譜法、光譜法、酶抑制法等。1）快速檢測技術主要是以氧化還原反應為檢測依據，產物與檢測液發生作用后會變色，但該方法靈敏度較低，局限性較強，并且受到還原性物質的影響，因此應用價值較低。2）色譜法能夠對蔬菜中農藥的殘留進行定量分析，靈敏度較高，但該方法儀器投資大、檢測時間長，同時對技術的要求較高，不利于在基層中推廣使用。3）光譜法對樣品處理的要求較低、環境污染小、分析速度快，但光譜法只能檢測一種有機磷農藥，因此靈敏度較為缺乏，不能作為主要檢測方法。酶抑制法具有快速、靈敏、成本低、操作便利等特點，成為蔬菜農藥殘留檢查的標準方法之一。

4 酶抑制法檢測蔬菜農藥殘留

4.1 檢測原理

乙酰膽堿是生物神經傳導中重要的一種酶，能夠保證神經沖動的正常傳導，有機磷和氨基甲酸酯類農藥能夠抑制昆蟲的中樞和周圍神經系統中的乙酰膽堿活動，大量積累乙酰膽堿，對正常神經傳導造成影響，從而導致昆蟲中毒而死[5]。酶抑制法則是通過昆蟲中毒原理進行農藥殘留的檢測，將特異性抑制膽堿酯酶與樣品提取液進行反應，若特異性抑制膽堿酯酶受到抑制，則說明樣品中含有農藥殘留。

4.2 檢測范圍

1）蔬菜。綠葉菜、白菜、瓜菜、果菜、豆菜、根莖類、茄果類、蔥蒜類等，其中，小白菜、空心菜等極易殘留農藥，因此需要著重進行監測。

2）農藥。有機磷類農藥，如甲胺磷、對硫磷、馬拉硫磷、甲基內吸磷、甲基對硫磷、敵百蟲、敵敵畏等；氨基甲酸酯類農藥，如涕滅威、呋喃丹、葉蟬散、異索威、西維因等。

4.3 檢測條件

室溫保持在25～30 ℃，室內濕度不能高于85%[6]。

4.4 檢測方法

儀器主要采用農藥殘毒快速檢測儀、電子天平、蒸餾水機、玻璃儀器、電熱恒溫培養箱、微型樣品混合器、移液槍等，試劑需要準備乙醇膽堿酯酶、顯色劑、緩沖劑等。1）配制緩沖液、專用酶、底物、顯色劑，并置于合適的條件下保存。2）采集蔬菜樣品且隨后進行混合。采用電子天平稱取樣品4 g，置于玻璃儀器中，加入20 mL緩沖液震蕩后倒出提取液，放置5 min左右，采用移液槍移取酶于玻璃儀器后置于電熱恒溫培養箱內放置30 min。3）使用分光光度計進行吸光度測定。蔬菜農藥殘留的范圍要控制在-10%～110%，超過此范圍則表明操作失誤，需要重新檢測。

5 注意事項

5.1 選擇安全的蔬菜

采用酶抑制法進行檢測時，需要注意蔬菜的安全狀況，采用安全的蔬菜進行檢測。其中，抑郁率≥70%，則說明蔬菜不安全；當抑制率為50%～70%時，說明蔬菜存在一定的安全隱患；當抑制率為40%～50%時，說明蔬菜較為安全；當抑制率≤40%時，說明蔬菜安全[7]。對于抑制率≥50%以上的蔬菜，需要進一步采用色譜法定性定量進行檢測與分析，確定農藥殘留的真實超標情況。

5.2 選擇合適的酶源

酶抑制法檢測技術中，常用的酶有植物酶、家畜肝臟酶、人體血漿酶、蠅頭部腦酯酶等，不同酶的敏感性各不相同，對于蔬菜農藥檢測來說，采用蠅頭部乙酰膽堿的效果最好，將分離純化后的醇液作為乙酰膽堿酯酶源進行檢測，可靠性和準確性較高。

5.3 選擇合適的抑制劑

蔬菜農藥殘留檢測中，酶活性和農藥的濃度互相關聯，酶活性會對農藥殘留檢測結果的準確性和靈敏度造成一定的影響，部分有機磷農藥抑制乙酰膽堿酯酶的效果較為微弱，大部分乙酰膽堿酯酶抑制劑濃度為6～

10 mol·L-1，抑制5～50 min，即可抑制酶的活性。

5.4 注意酶的固定化

蔬菜農藥殘留檢測中需要注意酶的固定化，酶的固定化技術中常見的分為吸附法、交聯法、電聚合法等。隨著我國技術的不斷完善和發展，開始形成了以吸附-交聯法為主固定化技術，乙酰膽堿酯酶膜進行制備時，pH值會升高，從而達到了固定乙酰膽堿酯酶的目的，降低了酶分子之間的作用，減少了影響酶活動的因素，提高了酶膜的可用性。

5.5 做好酶的活動控制

酶的活性直接影響到蔬菜農藥殘留的檢測結果，保衛時間、溫度、pH值等都會對酶活性造成一定的影響，相關文獻報道，蠅頭部乙酰膽堿酯酶的最佳保溫時間為15 min、溫度為37 ℃、pH值為7.2～8.0；肝臟酶的最佳保溫時間為28 min、溫度為30 ℃、pH值為7.6；肌肉酶的最佳保溫時間為31 min、溫度為31 ℃、pH值為7.6；魚腦酶的最佳保溫時間為35 min、溫度為32 ℃、pH值為7.6[8]。檢測過程中，具體的保溫時間、溫度、pH值需要根據不同的酶進行控制。

6 結語

酶抑制法是目前常用的一種控制高殘留、高毒農產品流入市場的方法，蔬菜農藥殘留檢測技術能夠幫助人們掌握蔬菜生產的質量和安全，并且能夠防止不合格蔬菜進入市場，同時，通過對蔬菜進行檢測，能夠及時發現蔬菜生產中存在的問題，根據這些問題制定相應的解決措施，不斷完善和調整生產方案，指導蔬菜生產者科學合理的使用農藥，推動我國農產品事業的進步和發展。但在蔬菜農藥殘留的檢測中，酶抑制法只能檢測有機磷類和氨基甲酸酯類農藥殘留，對其他農藥的檢測無效，因此需要結合定性與定量的方式進行檢測。總體來說，酶抑制檢測法應通過在實踐和操作中不斷完善和發展，力求提高檢測數據的準確性，完善蔬菜農藥殘留的檢測技術，為市場農產品的質量安全提供保障。

參考文獻：

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[8] 金彬，沈群超，吳碧波，等.蔬菜農藥殘留速測酶制劑的比較[J].浙江農業科學，2016，57（4）：517-519.

（責任編輯：趙中正）