高效液相色譜法同時測定蔬果中6種農藥殘留方法確認

張佳音 王越

摘要：本文描述了用高效液相色譜法同時測定蔬果中的吡蟲啉、多菌靈、除蟲脲、滅幼脲、辛硫磷、阿維菌素6種農藥殘留的方法確認。結果表明，此方法標準曲線相關系數為0.99917～0.99999，方法檢出限為0.006mg/kg～0.01mg/kg，相對標準偏差在0%～4.88%之間，平均加標回收率在97.8%～104%之間。本文提供了一種簡便、高效的多農藥殘留檢測方法，適用于大批量樣品分析。

關鍵詞：高效液相色譜;農藥殘留;同時測定;方法確認

中圖分類號：TS255.7 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?文獻標識碼： ?A ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?DOI編號： 10.14025/j.cnki.jlny.2019.24.038

1 儀器與材料

1.1 儀器設備

高效液相色譜儀帶紫外檢測器： LC 1260;電子分析天平： PL602E/02;勻漿機： FA25;水浴鍋： XMTD-204;氮吹儀： TTL-DCII。

1.2 試劑材料

吡蟲啉、除蟲脲、滅幼脲、辛硫磷、阿維菌素標準品：農業部環境質量監督檢驗測試中心（天津），1000mg/L;多菌靈標準品：農業部環境質量監督檢驗測試中心（天津），500mg/L;乙腈、甲醇、二氯甲烷：色譜純;水：純凈水;氯化鈉：140℃烘烤4h;氨基柱;有機濾膜：孔徑0.22μm;黃瓜。

2 方法

2.1前處理方法

將蔬菜水果樣品充分粉碎混勻。稱取35.0g，加70.0mL乙腈，高速勻漿1min～2min，經濾紙過濾，將濾液完全收集到裝有6g氯化鈉的100mL具塞量筒內，劇烈震蕩使其充分萃取，室溫下靜置20min～30min，吸取10.0mL上層有機相溶液，轉移至50mL燒杯中，放入水浴鍋中70℃蒸發至近干，加入2.0mL甲醇+二氯甲烷（5+95），待凈化。

用4.0mL甲醇+二氯甲烷（5+95）預淋洗氨基柱，棄去淋洗液，立即加入待凈化溶液，將洗脫液收集到50mL燒杯中，用4.0mL甲醇+二氧甲烷（5+95）洗燒杯繼續洗脫，重復一次。將盛有10ml洗脫液的燒杯放入水浴鍋中，溫度37℃，蒸發近干，用甲醇+水（3+2）準確定容至5.0mL。混勻后，過有機濾膜，待測。

2.2 高效液相色譜儀測定條件

色譜柱：C18（3.0mm×250mm）;流動相：甲醇+乙腈（7+3），水;柱箱溫度：40.0℃;進樣體積：10μL;流速：0.8ml/min;外標法定量。

流動相時間程序：0.00min，水相+有機相（40+60）;7.00min，水相+有機相（40+60）;13.00min，水相+有機相（20+80）;19.00min，水相+有機相（10+90）;30.00min，水相+有機相（5+95）;30.01min，水相+有機相（60+40）;35.00min，水相+有機相（60+40）。

3 方法確認實驗內容

3.1 線性及校準確認實驗

3.1.1 分析步驟 將農藥標準溶液用甲醇稀釋配制成濃度分別為0.0mg/L、0.1mg/L、0.2mg/L、0.5mg/L、0.8mg/L、1.0mg/L的混合標準溶液。按照2.2條件測定，測定結果以峰面積為縱坐標，濃度為橫坐標繪制標準曲線，計算回歸方程與相關系數。

3.1.2 結果 吡蟲啉線性方程為y=64.5x，r=0.99917;多菌靈線性方程為y=30.7x，r=0.99990;除蟲脲線性方程為y=39.6x，r=0.99997;滅幼脲線性方程為y=41.4x，r=0.99999;辛硫磷線性方程為y=32.4x，r=0.99995;阿維菌素線性方程為y=29.8x，r=0.99972。

3.2 方法檢出限和方法定量限確認實驗

3.2.1 分析步驟 在黃瓜樣品中加入一定量的標準溶液，制成一系列低濃度的加標樣品，經2.1前處理方法處理，按2.2條件測定。記錄待測農藥的信噪比，當信噪比為3∶1時，則該溶液濃度為方法檢出限，當信噪比為10∶1時，則該溶液濃度為方法定量限。

3.2.2 結果 吡蟲啉、多菌靈、除蟲脲、滅幼脲、辛硫磷、阿維菌素的方法檢出限分別為0.006mg/kg、0.01mg/kg、0.008mg/kg、0.008mg/kg、0.008mg/kg、0.009mg/kg，方法定量限分別為0.02mg/kg、0.035mg/kg、0.025mg/kg、0.025mg/kg、0.025mg/kg、0.03mg/kg。

3.3 方法精密度試驗

3.3.1 分析步驟 在黃瓜樣品中按下述方法進行加標：吡蟲啉、多菌靈、除蟲脲、滅幼脲、辛硫磷、阿維菌素6種農藥設置一倍定量限、兩倍定量限、十倍定量限3個添加水平，每個濃度做6個平行。經2.1前處理方法處理，按2.2條件測定，計算RSD。

3.3.2 結果 一倍定量限、兩倍定量限、十倍定量限3個添加水平下，吡蟲啉的RSD分別為2.38%、0.99%、3.01%;多菌靈分別為1.17%、1.17%、1.59%;除蟲脲分別為2.99%、1.48%、2.99%;滅幼脲分別為2.01%、1.04%、0%;辛硫磷分別為2.04%、1.66%、2.15%;阿維菌素分別為4.88%、0.87%、1.76%。

3.4 方法加標回收試驗

3.4.1 分析步驟 在黃瓜樣品中按下述方法進行加標：6種農藥設置一倍定量限、兩倍定量限、十倍定量限3個添加水平，每個濃度做1個空白樣品和3個加標平行樣品。經2.1前處理方法處理，按2.2條件測定，計算加標回收率平均值。

3.4.2 結果 一倍定量限、兩倍定量限、十倍定量限3個添加水平下，吡蟲啉的平均加標回收率分別為110%、103%、103%;多菌靈分別為100%、101%、99%;除蟲脲分別為101%、101%、100%;滅幼脲分別為103%、100%、100%;辛硫磷分別為104%、103%、104%;阿維菌素分別為97.8%、100%、97.8%。

4 結果與討論

本文建立了高效液相色譜法同時測定蔬菜水果中吡蟲啉、多菌靈、除蟲脲、滅幼脲、辛硫磷、阿維菌素的含量，并進行了方法確認。結果表明，應用此方法同時測定6種農藥分離效果好，標準曲線相關系數高、方法檢出限及方法定量限低、方法精密度高、方法加標回收率良好。符合《實驗室質量控制范圍 食品理化檢測》（GB/T 27404-2008）檢測方法確認的技術要求。本方法具有前處理過程簡單、可操作性強的特點，可以快速、準確的同時測定大批量蔬果中6種農藥的殘留量，在一定程度上有助于提升實驗室農殘檢測的工作效率。

參考文獻

[1]GB/T 27404-2008，實驗室質量控制范圍 食品理化檢測[S].

[2]劉謙，顏紅，等.蔬菜、水果中的吡蟲啉、多菌靈和5種氨基甲酸酯類農藥殘留測定[J].農藥科學與管理，2013，34（02）：24-28.

作者簡介：張佳音，碩士研究生，實習研究員，研究方向：農產品檢測;王越，碩士研究生，助理研究員，研究方向：農產品檢測。