AZGP1在消化系統惡性腫瘤中的研究進展

，

消化系統癌癥是最常見的惡性腫瘤，約占所有惡性腫瘤中的30%，具有高發病率和高死亡率[1]。盡管近年來多學科治療的發展顯著改善了治療結果，但消化系統惡性腫瘤患者的總體預后依然不佳。目前的研究越來越多地集中在新的免疫治療策略上，這可能是癌癥治療領域的一個重大突破。鋅-α2-糖蛋白(AZGP1)是位于人染色體7q22.1上的40-kDa蛋白質，并分泌在各種體液中，主要在乳腺、前列腺、肝臟和各種胃腸器官的上皮細胞中表達，積極參與許多人體的重要功能，包括受精、免疫調節和脂質動員等[2]。AZGP1是巨球蛋白家族的成員，它積極參與抑制腫瘤生長和增殖，抑制酶介導的腫瘤侵襲并通過結合水解酶活化細胞凋亡[3]。一方面，由于其與腫瘤來源的脂質動員因子[4]具有高度的氨基酸序列同源性，AZGP1通過刺激脂肪細胞中的脂質降解而與癌癥惡病質有關。另一方面，由于其與主要組織相容性復合體I類家族的高度結構同源性，AZGP1通過參與免疫應答而發揮抗腫瘤作用[2]。AZGP1被認為是多種腫瘤診斷和預后的潛在標志物，起著腫瘤抑制劑作用[5-7]。為提高對AZGP1基因研究的認識，現對AZGP1與消化系統惡性腫瘤的相關性及其臨床意義做一概述。

1 AZGP1與肝癌

目前肝癌是全球癌癥相關死亡的第二大常見原因[8]，中國每年約有23萬人(占世界病例的53%)死于肝癌[9]。肝癌是一個復雜的過程，其發生是多因素共同作用的結果，目前主要的治療手段包括手術治療、射頻治療、化學治療和放療聯合治療，而治療后復發和轉移是肝癌治療效果及預后差的主要原因，因此尋找肝癌轉移進展有關的潛在分子機制已成為關鍵問題。HuaTian等[10]研究發現異位過表達的AZGP1或重組AZGP1蛋白在體外和體內均能抑制肝細胞癌(HCC)細胞的增殖、遷移和侵襲，而沉默AZGP1表達導致體外細胞增殖、遷移和侵襲增加。通過綁定轉錄因子Ikaros到AZGP1啟動子中發現在HCC中AZGP1和Ikaros的表達呈顯著正相關，并在經過組蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制劑曲古霉素A(TSA)處理的HCC細胞中發現AZGP1和Ikaros表達和蛋白質的分泌顯著上調，表明Ikaros介導的組蛋白乙酰化參與調節HCC細胞中的AZGP1表達。此外，AZGP1過表達增加了HCC細胞中PTEN的表達，抑制HCC細胞中的Akt磷酸化和CD44s表達。相反，低表達AZGP1抑制HCC細胞中的PTEN的表達，而Akt磷酸化水平的增加，促進了CD44s表達。由此可見AZGP1可以通過調控肝癌中的PTEN/Akt和CD44s途徑來抑制細胞遷移和侵襲調節HCC細胞中的腫瘤進展。同時通過比較72名健康個體和125名HCC患者中的血清AZGP1蛋白水平，發現血清AZGP1水平與乙肝病毒感染呈負相關，HCC患者血清AZGP1水平低與HCC預后不良有關,揭示了AZGP1在肝癌組織中的表達與復發和轉移有關，為肝癌進展機制提供新見解。MingYiXu等[11]研究發現在肝硬化患者的肝組織中AZGP1的表達水平較低，HCC患者在mRNA和蛋白水平上都幾乎不表達AZGP1。低表達AZGP1通過參與激活TGF-β1誘導的上皮 - 間質轉化(EMT)，促進生存信號(BCL2L1和CCND1基因上調)，抑制增殖(EGR1和CCL20基因下調)，增加葡萄糖分解代謝和能量需求(HK2和CEBPB基因上調)，降低Bel7402細胞中的葡萄糖合成代謝(GYS1基因下調)。由此可見AZGP1可阻斷TGFβ1-ERK2通路誘導的EMT，下調間充質標志物，上調上皮標志物，在體外抑制EMT和阻斷細胞侵襲的潛能。綜上可得AZGP1可作為HCC的預后生物標志物和治療的潛在目標。

2 AZGP1與胃癌

繼肺癌和肝癌之后，胃癌仍是全球癌癥死亡的第三大原因[12]。一直以來胃癌的治療方法以手術治療、化療為主，雖可使晚期/復發性胃癌患者的生存得到一定程度的改善，但其臨床療效仍有一定的局限性，為胃癌患者尋找新的靶點用于早期診斷及有效治療具有重要的臨床意義。HuangChunyu等[13]通過實時定量RT-PCR和免疫印跡的方法，檢測35對配對的癌旁和相鄰的非癌性胃粘膜組織中AZGP1的表達，研究AZGP1表達水平與臨床病理因素和患者存活率之間的關系，發現AZGP1表達在腫瘤組織樣本中的mRNA和蛋白質水平與相鄰的非癌性胃粘膜組織樣本中的表達相比較均顯著降低，AZGP1在胃癌中的低表達與惡性表型相關。而對AZGP1表達水平與胃癌患者的預后、T分期、N分期等傳統臨床病理因素間的相關性分析，提示AZGP1可能作為原發性胃癌的候選腫瘤抑制劑和預后生物標志物，成為治療干預的潛在靶點。

3 AZGP1和結直腸癌

結直腸癌是人類最常見的惡性腫瘤之一，是導致癌癥死亡的第四大原因，其發病率和死亡率逐年上升。目前已經認識到，晚期結直腸癌患者預后不良主要與化療耐藥有關，5年內約50%的結腸癌患者發生轉移[1]。I期患者的五年相對生存率大于90%。然而，對于IV期患者，生存率僅略高于10%[14,15]。因此，探索結直腸癌轉移的分子機制可能有助于預防和治療結腸癌。相關研究表明eIF4E和S6K1在促進細胞增殖方面起著重要的作用[16]，而FASN的過度表達與腫瘤惡性腫瘤表型的發展、維持和增強有關[17,18]。LigongChang等[19]通過RT-PCR和Westernblot檢測AZGP1在四種人類結直腸癌細胞系(LoVo，Caco-2，HT-29和HCT116)中的表達情況，發現LoVo細胞內AZGP1表達最低。并通過質粒轉染過表達AZGP1后，一方面降低了雷帕霉素(mTOR)信號傳導的重要下游靶點FASN，eIF4E，p-mTOR，p-S6和S6K1的表達，抑制LoVo細胞增殖和遷移能力，從而促進G2期阻滯和凋亡率增加。另一方面抑制mTOR途徑的活化和內源性脂肪酸合成酶(FASN)調節的脂肪酸合成，從而減輕LoVo細胞的惡性表型。充分說明AZGP1在影響LoVo細胞惡性行為中起重要作用。YingmingXue等[20]通過qPCR和WB評估發現AZGP1mRNA和蛋白在結腸癌組織中的表達水平均高于正常黏膜組織，AZGP1在轉錄水平和轉錄后水平的表達也均有上調。并通過ELISA檢測120例結腸癌患者血清中AZGP1的濃度明顯高于40例健康對照者(P<0.001)，而AZGP1的診斷價值介于傳統血清生物標志物CEA和碳水化合物19-9(CA19-9)之間，與CEA和CA19-9的組合診斷比單獨診斷結果更準確。上述結果說明AZGP1可能是一個新的分子標志物，對直結腸癌的早期診斷具有重要意義，可能構成LoVo結直腸癌細胞的新型腫瘤抑制因子。

4 AZGP1和食管癌

食管癌是世界上第八大常見癌癥，也是導致癌癥相關死亡的第六大原因[21]。原發性食管癌占所有食管惡性腫瘤的大部分(超過95%), 組織學類型主要是食管鱗癌(ESCC)，而食管腺癌是罕見的[22]。盡管食管癌最近在診斷和治療方案方面取得了進展，但由于高復發轉移率，預后仍不佳，5年生存率平均為10%-41%[23-25]。HongTang等[26]通過qRT-PCR檢測中國北方45例ESCC患者腫瘤組織與配對的非腫瘤組織中AZGP1mRNA的表達，發現與正常對照組相比，AZGP1的相對表達水平在腫瘤組織中顯著下調。分析結果顯示AZGP1下調與有無淋巴結轉移(P= 0.035)和晚期臨床分期(P= 0.018)顯著相關。食管癌組織AZGP1的下調表明侵襲性的腫瘤行為，并預測惡化的臨床結果，提示了AZGP1可能作為ESCC患者候選腫瘤抑制因子和預后標志物，也是ESCC患者潛在的治療靶點。

5 AZGP1和胰腺癌

胰腺癌是世界上惡性腫瘤死亡的第五大原因[27]，是一種侵襲性很強的惡性腫瘤，發病率高，具有快速進展、侵襲性和對放化療敏感度較低的特點[28]。主要的組織學亞型是胰腺導管腺癌(PDAC)，占所有胰腺癌的90%。胰腺癌患者的中位總生存期為2-8個月，五年生存率為7.7%[1]。近幾十年來人類在克服胰腺癌侵襲和轉移方面沒有顯著改善，尚無有效的根治方法[29]。BKong[30]等研究發現AZGP1在正常胰腺的腺泡和胰島外周細胞中均有表達，而在原發性及轉移性PDAC中的表達顯著降低。使用TSA處理在高侵襲性胰腺癌系Panc-1細胞后發現其上皮標志物(KRT19和CDH1)的表達增加，伴隨間充質標志物(VIM)的下調，在阻斷細胞侵襲的同時促進PDAC細胞中的EMT，細胞增殖沒有明顯影響，而AZGP1過表達可維持胰腺癌的上皮表型。并通過侵襲測定顯示外源性TGF-β1增加了Panc-1細胞的侵襲性，發現TGF-β1介導的ERK2磷酸化被ZAG阻斷，這種效應與EMT息息相關。充分驗證AZGP1可通過阻斷TGF-b介導的Ras/ERK信號傳導誘導EMT影響胰腺癌的分化狀態抑制細胞侵襲。因此AZGP1可能作為一種新型腫瘤抑制基因在胰腺癌中。

綜上所述，AZGP1在消化道惡性腫瘤的發生和發展中起到調控作用，但目前AZGP1參與消化道腫瘤中的確切調控分子機制尚不清楚。因此，深入探索AZGP1在消化道腫瘤中的具體機制可為消化系統腫瘤的早期診斷、治療、判斷預后等提供新的思路。