嗜酸性粒細胞在腺樣體肥大患兒診治中的臨床價值

張奇雪，曹媛，張桂敏，趙秀娟，阮宏瑩△，鄭永哲，杜建群，魯宏華，林鵬

腺樣體肥大（Adenoidal hypertrophy，AH）是兒童上呼吸道阻塞最常見的原因［1］。盡管發生機制不明，人們普遍認為反復的慢性炎癥刺激是AH 的重要原因［2］。變態反應亦是一種慢性炎癥反應過程，國內外研究表明變應原的刺激以及機體對不同變應原的高敏感性是AH 的危險因素，對于變態反應性疾病的早期診斷和治療有助于減少AH 的發生［3-4］。嗜酸性粒細胞（EOS）水平是評估變態反應性疾病的一個比較穩定的指標［5］。Shin 等［6］研究發現，在AH患兒中，合并變態反應性疾病的患兒血清總IgE 和外周血EOS水平明顯高于非變態反應性患者。本研究旨在通過觀察AH患兒外周血和組織中EOS分布情況，探討變態反應與AH 的關系，為臨床上AH 患兒的病因診斷、綜合治療、療效評估以及為該類患兒分類研究提供依據。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取2017年10月—2018年7月天津市第一中心醫院耳鼻咽喉頭頸外科行腺樣體切除手術的患兒112例，其中男59例，女53例，年齡4～17歲，平均（8.32±3.14）歲。經手術切除組織病理回報：鼻咽頂部淋巴組織增生，符合AH，受試者均無慢性鼻-鼻竇炎、支氣管哮喘、特異反應性皮炎等其他系統嚴重疾病。術前1個月未行藥物等其他治療。根據血清特異性IgE 檢測結果及2010年中華醫學會小兒變態反應性鼻炎診斷標準，將患兒分為2 組：單純腺樣體肥大（AH）組62例和腺樣體肥大伴變態反應性鼻炎（AH+AR）組50例。2 組性別、年齡、家族史等差異無統計學意義（P＞0.05），見表1。

Tab.1 Comparison of general data between AH and AH+AR groups表1 AH與AH+AR組一般資料比較

1.2 方法

1.2.1 血清IgE 檢測 采用德國Allergy Screen Test Kit 變應原特異性IgE 抗體檢測試劑，免疫印跡法檢測。共檢測吸入性變應原10類，食入性變應原9類。檢測結果由計算機自動進行量化分析并進行0～5級分級評估，1級及以上為陽性。

1.2.2 變態反應性鼻炎診斷標準及VAS 評分 根據2010年中華醫學會小兒變態反應性鼻炎診斷標準［7］，由患者根據局部及全身不適癥狀進行視覺模擬量表（visual analogue scales，VAS）評分。評價標準：0≤輕度＜4，4≤中度＜7，7≤重度＜10［8］。

1.2.3 外周血和腺樣體組織中EOS 水平檢測 患兒于入院后空腹抽取外周血檢測EOS 在全血細胞中的百分比。腺樣體組織病理切片經HE 染色后隨機讀取10 個視野，40×10 倍放大觀察，統計EOS的數量。

1.3 統計學方法 采用SPSS 22.0統計軟件進行分析。正態分布計量資料采用均數±標準差（）表示，2組間比較采用t檢驗；非正態分布計量資料采用M（P25，P75）表示，兩組及多組間比較均采用非參數Kruskal-WallisH檢驗。分類變量采用例表示，組間比較采用χ2檢驗。采用受試者工作特征（ROC）曲線評價EOS對腺樣體肥大合并變應因素的診斷價值。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 血清IgE檢測結果 在AH+AR組患兒中，27例（54.0%）對室內塵螨過敏，等級以1、2 級為主；8例（16.0%）對淡水魚組合過敏；對艾蒿和點青霉過敏各7例；其次為貓、黃豆。17例（34.0%）多種過敏原檢測結果陽性，33例（66.0%）單一過敏原檢測結果陽性。過敏原檢測等級1 級以上39例（78.0%），見表2。

2.2 外周血和組織EOS 水平 AH+AR 組EOS 水平明顯高于AH 組（P＜0.05），見圖1、表3。不同過敏原等級外周血及組織中EOS比例差異無統計學意義（P＞0.05）；不同等級的VAS 評分外周血及組織中EOS水平差異有統計學意義（P＜0.05）；表現為在外周血中，伴重度變態反應性鼻炎組EOS 水平明顯高于輕度變態反應性鼻炎組（P＜0.05），重度與中度、中度與輕度組間差異無統計學意義（P＞0.05）；在組織中，變態反應性鼻炎癥狀愈嚴重，EOS 水平愈高（均P＜0.05），見表4。

Tab.2 Allergen spectrum results of AH+AR表2 AH伴AR變應原譜

Fig.1 Distribution of EOS in sections of adenoid tissues(HE staining,×400)圖1 EOS在AH患兒腺樣體病理組織切片的分布情況（HE染色，×400）

Tab.3 Comparison of EOS levels in peripheral blood and tissue between two groups表3 2組外周血及組織中EOS水平比較［M（P25，P75）］

Tab.4 Comparison of EOS levels between different levels of VAS scores表4 不同VAS評分等級EOS水平比較 ［M（P25，P75）］

2.3 EOS 診斷AH 伴AR 的ROC 曲線分析 通過繪制ROC 曲線來確定EOS 對AH 伴AR 的診斷效果。外周血和組織中EOS對AH伴AR診斷的敏感度、特異度、最佳截斷點（cut-off值）及AUC見表5、圖2。

Tab.5 The ROC curve of EOS in tissue and peripheral blood for the diagnosis of AH+AR表5 ROC曲線對外周血及組織中EOS評價AH伴AR的診斷價值

Fig.2 The ROC curves of EOS in tissue and peripheral blood for the diagnosis of AH+AR圖2 ROC曲線對外周血及組織中EOS評價AH伴AR的診斷價值

3 討論

3.1 腺樣體肥大與變態反應性鼻炎的關系 腺樣體是位于鼻咽頂部的外周血淋巴器官，是Waldeyer's環的一部分，對抵御吸入性微生物具有重要免疫作用［9］，同時也是上呼吸道重要組成部分，呼吸道變應性致敏反應的發生導致呼吸道致敏器官黏膜或鄰近的淋巴濾泡間組織結構中大量EOS浸潤。國內外研究表明，腺樣體肥大與變態反應密切相關。張迎俊等［3］研究表明，AH 患兒血清總IgE 增高比例為66.8%，提示約2/3 的AH 兒童是易致敏體質。Evcimik 等［10］研究發現，在有變應性疾病的患兒中，12.4%存在AH，而在無變態反應性疾病患兒中僅3%存在AH。Modrzynski 等［11］研究表明，在變態反應性疾病中，僅僅變態反應性鼻炎是患兒AH 的危險因素，而腺樣體是與鼻黏膜最接近的淋巴器官。此次研究結果表明，在AH 伴變態反應性鼻炎患兒過敏原檢測結果中，以室內塵螨為主，這與他人之前研究結果一致，說明在易致敏體質的腺樣體肥大患兒中，室內塵螨仍是主要的致敏因素。

3.2 EOS與腺樣體肥大的關系 EOS在變態反應中是重要的釋放促炎因子和上皮損害因子的細胞，組織和外周血中EOS 的浸潤是變態反應性疾病的標志。變態反應發生導致組織EOS 浸潤，釋放各種炎癥或促炎因子［12］，長期的慢性炎癥刺激是造成腺樣體增生肥大的重要原因。已有研究報道，在變態反應性疾病中，包括變態反應性鼻炎、變態反應性哮喘、特異變態反應性皮炎，外周血EOS 輕度升高，組織中、鼻腔分泌物、痰液、肺泡灌洗液中EOS 顯著升高［13］。EOS數量與變應性疾病發生的頻率和病情的惡化程度直接相關［14］。同樣，本研究表明，EOS分布與過敏原等級無關，而與變態反應性鼻炎癥狀嚴重程度密切相關。尤其是組織中EOS 水平，變態反應性鼻炎癥狀越嚴重，組織中EOS 浸潤愈明顯。這可能由變態反應性鼻炎癥狀愈嚴重，鼻腔分泌物愈多，流經咽后壁長期刺激鼻咽頂部淋巴組織所致。本研究結果提示，在AH患兒中，伴有變態反應性鼻炎患兒外周血EOS 水平明顯高于單純AH 患兒，且組織中EOS 水平亦是如此。ROC 分析結果表明，組織中EOS水平較外周血對于變應因素的鑒別更具有診斷意義，說明組織中EOS 浸潤是變態反應中穩定固有的表現。本研究因無法取到正常組織標本，因而存在一定缺陷。其中血清特異性IgE 的檢測，因為檢測種類局限，商業上可用的過敏原提取物中含有不同程度的異質成分，可能導致假陰性或假陽性結果。根據組織病理切片結果中細胞浸潤的類型和特點是診斷疾病的金標準，EOS作為與IgE相關變態反應密切相關的細胞類型，在鑒別診斷變態反應因素存在的腺樣體肥大患兒中應具有較強的診斷價值。而在ROC 曲線結果中，EOS 在診斷變應因素存在的cutoff值對應的敏感度和特異度均不是很高，可能與本研究樣本數量有限相關。

綜上所述，EOS 作為重要的促炎因子分泌細胞可能在腺樣體肥大患兒中扮演重要角色。本研究表明，根據AH患兒組織和外周血EOS的水平，可以判斷變應因素的存在，為后期進一步探討與EOS 相關的炎癥因子對腺樣體肥大的影響提供分類研究的客觀依據。在臨床上，臨床醫師可以根據AH 患兒組織和外周血EOS的水平，判斷變應因素的存在，了解患兒的過敏狀態，囑其遠離變應因素，指導術后合理應用抗過敏藥物，改善患兒預后，減少疾病復發。