喹乙醇檢測方法研究

摘要：喹乙醇是一種人工合成的喹噁啉類藥物，具有良好的抗菌效果和蛋白同化作用，常用來提高動物飼料轉化率、促進動物生長，也常用于獸藥添加治療仔豬。但不規范使用喹乙醇會直接引起食品安全問題，喹乙醇具有蓄積毒性，有三致危害。本文就當前常用的喹乙醇殘留檢測方法進行綜述，為開展相關檢測工作提供技術支持。

關鍵詞：喹乙醇;危害;檢測

隨著現代養殖技術的快速發展，獸藥在畜禽養殖過程中的使用比例逐漸增加。有些獸藥不僅能用于殺菌、畜禽疫病的防治，還有促進畜禽生長的作用。然而，由于養殖人員的技術和知識水平參差不齊或追求更多利益，因此經常出現盲目用藥、重復給藥、藥物亂用、實驗性用藥等現象，這不僅導致畜禽體內殘留大量的獸藥，還給食品安全帶來了巨大隱患[1]。

喹乙醇是一種人工合成的喹啉類藥物，是德國拜爾藥廠于1965年研究合成的飼料添加劑，商品名為快育靈，可作為抗菌促生長劑，抗菌譜廣。喹乙醇為淺黃色結晶性粉末，無臭味苦，可溶于熱水，微溶于冷水。喹乙醇可以促進蛋白質同化，能提高飼料在動物體內的轉化率，加快動物的生長發育，因此被廣泛添加在獸藥及飼料中。

1976年，歐盟批準可在畜禽飼料中添加喹乙醇。1981年，國內成功研制出喹乙醇并廣泛應用于養殖業。但毒理學研究表明，喹乙醇具有蓄積毒性，有致畸、致癌、致突變的危害，導致畜禽體內殘留大量獸藥。喹乙醇的毒性對不同種屬的動物不同，對其危害也有很大的差異。比如，對于水產品來說，喹乙醇對于部分魚類有明顯的致畸作用;對于禽類動物，則有明顯的蓄積毒性和一定程度的遺傳毒性。由此可見，喹乙醇給食品健康帶來了巨大的安全隱患。歐盟于1998年禁止喹乙醇繼續用于可食用性動物;2005年版《中華人民共和國獸藥典》明確規定禁止在家禽及水產品飼料中使用喹乙醇[2]。以下將對當前常用的檢測喹乙醇殘留的方法進行綜述。

一、光譜分析法

光譜法是基于物質與輻射能作用時，測量由物質內部發生量子化的能級之間的躍遷而產生的發射、吸收或散射輻射的波長和強度進行分析的方法。光譜法可分為原子光譜法和分子光譜法[3]。

可采用紫外分光光度法檢測復合制劑喹乙醇的含量，先使用適當的分能力方法將喹乙醇分離出來，并稀釋若干倍，在380 nm波長處檢測其吸收度，并與標準品對比回收率。此方法操作簡便、快捷，且所需儀器簡單[4]。

二、液相色譜—質譜聯用法

液相色譜—質譜聯用法（HPLC-MS）是以液相色譜系統用于分離，質譜檢測系統用于檢測。樣品在質譜部分和流動相分離，被離子化后，經質量分析器將離子碎片按質量分開，并經檢測器得到質譜圖。液相色譜—質譜聯用技術體現了色譜和質譜的優勢互補，同時具有高靈敏度、高選擇性、高精密度等特點。目前，該技術被最廣泛應用于喹乙醇的檢測[5-6]。

常用于液相系統的流動相有0.1%乙酸∶乙腈（70∶30）、甲醇∶0.1%甲酸水∶乙腈（20∶70∶10）、甲酸水∶乙腈（15∶85）、甲酸水∶甲醇（15∶85）。常用的提取液為甲醇溶液、乙腈溶液等。按照一定濃度梯度繪制標準曲線，曲線的R2值需達到0.99。本檢測方法雖然操作方法較為復雜，但是精密度、準確性良好。

三、電化學分析法

電化學分析法包括電導法、極譜分析法、電位分析法、電位滴定法。其中，電位分析法中溶出伏安法常被用于測定飼料中喹乙醇的含量，此方法測得喹乙醇的檢出限為0.7 mol/L。

四、色譜法

色譜法是一種分離和分析技術，主要的分離方法有柱色譜法、紙色譜法、薄層析法、高效液相色譜法和氣相色譜法等，常用于檢測喹乙醇殘留的方法是高效液相色譜法和薄層色譜法[7-8]。

先將樣品進行前處理，用反向高效液相色譜法在380 nm波長處檢測，可選擇0.1%乙酸∶乙腈（70∶30）、甲醇∶0.1%甲酸水∶乙腈（20∶70∶10）、甲酸水∶乙腈（15∶85）、甲酸水∶甲醇（15∶85）等可作為流動相，選用分離效果較好的流動相，繪制梯度濃度曲線，R2值需達到0.99，回收率在85%～90%。

五、免疫法

（一）膠體金免疫層析法

膠體金免疫層析法是近年來迅速發展的一種免疫學檢測方法，使用被純化過的喹乙醇多克隆抗體與膠體金結合生成的金標抗體涂抹在硝酸纖維墊上，并將包被抗原和二抗分別結合在纖維素膜上，組裝制得免疫層析快速檢測試紙條，可用此試紙條檢測含喹乙醇樣品[8]。此方法簡捷方便，檢測時間短，設備便攜，適用于快速檢測和現場檢測，可廣泛推廣。

（二）酶聯免疫技術（ELISA）

酶聯免疫檢測技術具有高靈敏度和選擇性，高于大多數理化分析技術，非常適合用于復雜基質中痕量組分的分離和檢測[9]。常采用間接競爭ELISA法檢測喹乙醇含量，檢測限低于行業標準（SN 0197—93）液相色譜法的最低檢出限，可檢測含有較低喹乙醇含量的樣品，且可用于大批樣品檢測。

（三）熒光微球免疫層析法

熒光微球免疫層析法于2016年被提出，是將新型標記物熒光微球與喹乙醇克隆抗體偶聯，將其復合物作為檢測試劑制成熒光微球免疫層析試紙條，可用肉眼檢測的同時，也可將試紙條與熒光微球定量側向層析讀數儀聯合使用，可用于飼料中喹乙醇含量的定量快速檢測[10]。該試紙條的特異性和準確性高，可保存較長時間，檢測時間較短。

參考文獻：

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[5]高嶸.高效液相色譜法測定豬肉中的喹乙醇殘留量的研究[J].中國衛生檢驗雜志，2014（22）：23-25.

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[7]張憬，梁斌，吳志奇，等.乙腈提取液相色譜法測定飼料中喹乙醇含量[J].飼料廣角，2016（4）：54-55.

[8]高嶸.高效液相色譜法測定豬肉中的喹乙醇殘留量的研究[J].中國衛生檢驗雜志，2014（22）：23-25.

[9]周彤，危麗俊，程祥磊.喹乙醇殘留速測金標試紙條的研制[J].中國衛生檢驗雜志，2013（17）：3322-3324.

[10]霍如林，朱愛榮，張林，等.膠體金免疫層析法快速定量檢測豬肝中喹乙醇殘留[J].食品工業科技，2014（9）：299-302.

通訊作者：李曉丹。