50%雙環(huán)磺草酮懸浮劑的HPLC分析

饒鐳 李保同

摘要：采用Zorbax Eclipse XDB-C18反相色譜柱建立一種利用HPLC測定50%雙環(huán)磺草酮懸浮劑中有效成分的分析方法，以乙腈+水（體積比60 ∶ 40）為流動相，在檢測波長323 nm條件下測定待測試樣中雙環(huán)磺草酮的含量。雙環(huán)磺草酮的線性相關系數(shù)（r2）為0.999 9，標準偏差為0.480，變異系數(shù)為0.954%，平均回收率為99.95%。該分析方法具有操作簡便、分離效果好、精密度和準確度較高、線性相關性好的優(yōu)點，可用于雙環(huán)磺草酮懸浮劑的定量分析。

關鍵詞：雙環(huán)磺草酮;懸浮劑;高效液相色譜;分析

Abstract：An analytical method for the determination of active ingredients in 50% bicyclosulfone suspension by HPLC using Zorbax Eclipse XDB-C18 reversed phase column was developed，using a mixture solution of acetonitrile and water （60 ∶ 40，by vol） as the mobile phase under a detection wavelength of 323 nm. The linear correlation coefficient was 0.999 9，the standard deviation was 0.480，the coefficient of variation was 0.954%，and the average recovery rate was 99.95%. The analytical method has the advantages of simple operation，good separating effect，high precision and accuracy，and a good linear relationship. It can be used for the quantitative analysis of dicyclosulfone suspension agents.

Key words：benzobicyclon; SC; HPLC; analysis

1 材料與方法

1.1 試劑和溶液

雙環(huán)磺草酮標準品（≥98.0%，江西農業(yè)大學理學院），50%雙環(huán)磺草酮懸浮劑（日本SDS生物公司），乙腈（色譜純），超純水。

1.2 儀器

Agilent 1260高效液相色譜儀，帶全波長紫外檢測器（DAD檢測器）和自動控溫進樣器;色譜柱：Zorbax Eclipse XDB-C18色譜柱（4.6 mm×150 mm，5 μm）不銹鋼柱;紫外分光光度計（德國Eppendorf公司）;萬分之一天平（日本島津公司）;SB-5200DT超聲波清洗器;0.22 μm有機濾膜。

1.3 色譜條件

流動相：乙腈-水（體積比60 ∶ 40）;流速 0.8 mL/min;檢測波長323 nm;柱溫30 ℃;進樣量10 μL;雙環(huán)磺草酮的保留時間為4.577 min。典型的雙環(huán)磺草酮標準品高效液相色譜圖見圖2。

1.4 測定步驟

1.4.1 標準品溶液的配制 稱取0.010 5 g雙環(huán)磺草酮標準品（精確至0.000 2 g）于50 mL容量瓶中，加入適量乙腈溶解，超聲波水浴助溶 10 min，冷卻至室溫，乙腈定容，配制成200 mg/L母液，搖勻備用。

1.4.2 試樣溶液的配制 稱取50%雙環(huán)磺草酮懸浮劑0.020 0 g（精確至0.000 2 g）于50 mL容量瓶中，適量乙腈溶解，超聲波水浴助溶，冷卻至室溫，乙腈定容，搖勻，上清液過0.22 μm有機濾膜，備用。

1.4.3 測定 在上述色譜條件下，待儀器泵的壓力和基線穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標樣溶液，當相鄰2針峰面積變化小于1.5%時，按照標準品溶液、試樣溶液、試樣溶液、標準品溶液的順序進樣，進行分離與測定。

1.4.4 計算 根據(jù)標準品和試樣溶液中雙環(huán)磺草酮的峰面積，采用外標法定量，根據(jù)公式計算試樣溶液中雙環(huán)磺草酮的含量W2（%），計算公式如下：

W2（%）=A2×m1×W1A2×m2。

式中：A1為標準品溶液中雙環(huán)磺草酮峰面積的平均值，A2為試樣溶液中雙環(huán)磺草酮的峰面積平均值，m1為雙環(huán)磺草酮標準品的質量（g），m2為雙環(huán)磺草酮試樣的質量（g），W1為雙環(huán)磺草酮標準品的質量分數(shù)（%）。

2 結果與分析

2.1 檢測波長的選擇

采用紫外可見分光光度計對配制的雙環(huán)磺草酮標準品溶液進行光譜掃描，得到紫外吸收光譜（圖3）。從圖3可以看出，雙環(huán)磺草酮在323 nm附近吸收波長最大，各種雜質對組分測定不干擾，因此確定323 nm為檢測波長。

2.2 流動相的確定

采用Zorbax Eclipse XDB-C18反相色譜柱反復測試不同比例的乙腈-水、甲醇-水體系作為流動相，發(fā)現(xiàn)使用乙腈-水為流動相（體積比 60 ∶ 40）、流速為0.8 mL/min、柱溫30 ℃時，雙環(huán)磺草酮能與雜質能較好地分離，基線平穩(wěn)，峰形對稱，分離時間適中，可滿足分析的需要。

2.3 線性相關性的測定

用乙腈將雙環(huán)磺草酮標準品溶液進行再稀釋，逐步配制成質量濃度分別為50.00、10.00、5.00、1.00、0.50、0.10、0.05、0.01 mg/L的標準溶液，在上述色譜檢測條件下，用外標法（峰面積）進行定量分析。以雙環(huán)磺草酮的質量濃度作為橫坐標，以色譜峰的峰面積作為縱坐標作標準曲線圖。雙環(huán)磺草酮檢測方法的線性回歸方程為y=14.534 0x+4.247 5，r2=0.999 9（圖4）。結果表明，在質量濃度為0.01～50.00 mg/L時，峰面積與質量濃度線性關系良好。表明該方法可用于雙環(huán)磺草酮的分析和檢測。

2.4 精密度測定

按照上述色譜條件，從同一雙環(huán)磺草酮懸浮劑中稱取5份樣品測定雙環(huán)磺草酮的質量分數(shù)，得到標準偏差和變異系數(shù)（表1）。該方法的標準偏差為0.480，變異系數(shù)為0.954%，變異系數(shù)滿足國際農藥分析協(xié)作委員會（CIPAC）的要求（<1.71%）。

2.5 準確度測定

稱取5份已知質量分數(shù)的50%雙環(huán)磺草酮懸浮劑于 50 mL 容量瓶中，分別加入一定量的雙環(huán)磺草酮標準品，在上述色譜條件下進行測定，根據(jù)理論添加量與實際測得量計算其回收率，結果表明雙環(huán)磺草酮的回收率在99.37%～100.80%之間，平均回收率為99.95%（表2）。

3 結論

本研究以C18反相色譜柱為分離柱，乙腈+水（體積比60 ∶ 40）為流動相， 323 nm為檢測波長，建立了50%雙環(huán)磺草酮懸浮劑的高效液相色譜定量分析方法。該方法操作簡便，分離效果好，線性相關性良好，精密度和準確度較高，適用于雙環(huán)磺草酮懸浮劑的質量檢測。

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