50%雙環磺草酮懸浮劑的HPLC分析

饒鐳 李保同

摘要：采用Zorbax Eclipse XDB-C18反相色譜柱建立一種利用HPLC測定50%雙環磺草酮懸浮劑中有效成分的分析方法，以乙腈+水（體積比60 ∶ 40）為流動相，在檢測波長323 nm條件下測定待測試樣中雙環磺草酮的含量。雙環磺草酮的線性相關系數（r2）為0.999 9，標準偏差為0.480，變異系數為0.954%，平均回收率為99.95%。該分析方法具有操作簡便、分離效果好、精密度和準確度較高、線性相關性好的優點，可用于雙環磺草酮懸浮劑的定量分析。

關鍵詞：雙環磺草酮;懸浮劑;高效液相色譜;分析

Abstract：An analytical method for the determination of active ingredients in 50% bicyclosulfone suspension by HPLC using Zorbax Eclipse XDB-C18 reversed phase column was developed，using a mixture solution of acetonitrile and water （60 ∶ 40，by vol） as the mobile phase under a detection wavelength of 323 nm. The linear correlation coefficient was 0.999 9，the standard deviation was 0.480，the coefficient of variation was 0.954%，and the average recovery rate was 99.95%. The analytical method has the advantages of simple operation，good separating effect，high precision and accuracy，and a good linear relationship. It can be used for the quantitative analysis of dicyclosulfone suspension agents.

Key words：benzobicyclon; SC; HPLC; analysis

1 材料與方法

1.1 試劑和溶液

雙環磺草酮標準品（≥98.0%，江西農業大學理學院），50%雙環磺草酮懸浮劑（日本SDS生物公司），乙腈（色譜純），超純水。

1.2 儀器

Agilent 1260高效液相色譜儀，帶全波長紫外檢測器（DAD檢測器）和自動控溫進樣器;色譜柱：Zorbax Eclipse XDB-C18色譜柱（4.6 mm×150 mm，5 μm）不銹鋼柱;紫外分光光度計（德國Eppendorf公司）;萬分之一天平（日本島津公司）;SB-5200DT超聲波清洗器;0.22 μm有機濾膜。

1.3 色譜條件

流動相：乙腈-水（體積比60 ∶ 40）;流速 0.8 mL/min;檢測波長323 nm;柱溫30 ℃;進樣量10 μL;雙環磺草酮的保留時間為4.577 min。典型的雙環磺草酮標準品高效液相色譜圖見圖2。

1.4 測定步驟

1.4.1 標準品溶液的配制 稱取0.010 5 g雙環磺草酮標準品（精確至0.000 2 g）于50 mL容量瓶中，加入適量乙腈溶解，超聲波水浴助溶 10 min，冷卻至室溫，乙腈定容，配制成200 mg/L母液，搖勻備用。

1.4.2 試樣溶液的配制 稱取50%雙環磺草酮懸浮劑0.020 0 g（精確至0.000 2 g）于50 mL容量瓶中，適量乙腈溶解，超聲波水浴助溶，冷卻至室溫，乙腈定容，搖勻，上清液過0.22 μm有機濾膜，備用。

1.4.3 測定 在上述色譜條件下，待儀器泵的壓力和基線穩定后，連續注入數針標樣溶液，當相鄰2針峰面積變化小于1.5%時，按照標準品溶液、試樣溶液、試樣溶液、標準品溶液的順序進樣，進行分離與測定。

1.4.4 計算 根據標準品和試樣溶液中雙環磺草酮的峰面積，采用外標法定量，根據公式計算試樣溶液中雙環磺草酮的含量W2（%），計算公式如下：

W2（%）=A2×m1×W1A2×m2。

式中：A1為標準品溶液中雙環磺草酮峰面積的平均值，A2為試樣溶液中雙環磺草酮的峰面積平均值，m1為雙環磺草酮標準品的質量（g），m2為雙環磺草酮試樣的質量（g），W1為雙環磺草酮標準品的質量分數（%）。

2 結果與分析

2.1 檢測波長的選擇

采用紫外可見分光光度計對配制的雙環磺草酮標準品溶液進行光譜掃描，得到紫外吸收光譜（圖3）。從圖3可以看出，雙環磺草酮在323 nm附近吸收波長最大，各種雜質對組分測定不干擾，因此確定323 nm為檢測波長。

2.2 流動相的確定

采用Zorbax Eclipse XDB-C18反相色譜柱反復測試不同比例的乙腈-水、甲醇-水體系作為流動相，發現使用乙腈-水為流動相（體積比 60 ∶ 40）、流速為0.8 mL/min、柱溫30 ℃時，雙環磺草酮能與雜質能較好地分離，基線平穩，峰形對稱，分離時間適中，可滿足分析的需要。

2.3 線性相關性的測定

用乙腈將雙環磺草酮標準品溶液進行再稀釋，逐步配制成質量濃度分別為50.00、10.00、5.00、1.00、0.50、0.10、0.05、0.01 mg/L的標準溶液，在上述色譜檢測條件下，用外標法（峰面積）進行定量分析。以雙環磺草酮的質量濃度作為橫坐標，以色譜峰的峰面積作為縱坐標作標準曲線圖。雙環磺草酮檢測方法的線性回歸方程為y=14.534 0x+4.247 5，r2=0.999 9（圖4）。結果表明，在質量濃度為0.01～50.00 mg/L時，峰面積與質量濃度線性關系良好。表明該方法可用于雙環磺草酮的分析和檢測。

2.4 精密度測定

按照上述色譜條件，從同一雙環磺草酮懸浮劑中稱取5份樣品測定雙環磺草酮的質量分數，得到標準偏差和變異系數（表1）。該方法的標準偏差為0.480，變異系數為0.954%，變異系數滿足國際農藥分析協作委員會（CIPAC）的要求（<1.71%）。

2.5 準確度測定

稱取5份已知質量分數的50%雙環磺草酮懸浮劑于 50 mL 容量瓶中，分別加入一定量的雙環磺草酮標準品，在上述色譜條件下進行測定，根據理論添加量與實際測得量計算其回收率，結果表明雙環磺草酮的回收率在99.37%～100.80%之間，平均回收率為99.95%（表2）。

3 結論

本研究以C18反相色譜柱為分離柱，乙腈+水（體積比60 ∶ 40）為流動相， 323 nm為檢測波長，建立了50%雙環磺草酮懸浮劑的高效液相色譜定量分析方法。該方法操作簡便，分離效果好，線性相關性良好，精密度和準確度較高，適用于雙環磺草酮懸浮劑的質量檢測。

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