種植體周圍炎中NF-κB的表達及其與RANKL的相關性初探

李洪波　黃鶴　李巧梅　石磊

【摘要】 目的：探究種植體周圍炎中NF-κB的表達及其與RANKL的相關性。方法：選取本院2017年1月-2018年6月間行種植修復后發生種植體周圍炎的患者45例（種植體61顆），納入觀察組;同時選擇同時期行種植治療且無種植體周圍炎發生的患者45例（種植體52顆），納入對照組。記錄并對比種植體周圍探診深度（PPD）、牙槽骨喪失深度（DSB）、改良齦溝探診出血指數（mSBI）和改良菌斑指數（mPLI），同時測定齦溝液中核轉錄因子（Nuclear factor-κB，NF-κB）和核因子受體活化因子配體（Receptor activator of NF-κB ligand ，RANKL），并分析兩者的相關性。結果：輕、中、重度種植體周圍炎及健康種植體的PPD、DSB、mSBI及mPLI比較差異均有統計學意義（F=0.214，0.233，0.257，0.313;P=0.012，0.011，0.008，0.024），且各指標組內比較差異均有統計學意義（P<0.05）;各組齦溝液中NF-κB、RANKL比較，差異均有統計學意義（F=0.872，1.017;P=0.001，0.000）。Pearson相關分析顯示種植體周圍炎齦溝液中NF-κB及RANKL存在正相關（r=0.631，P=0.000）。結論：種植體周圍炎齦溝液中NF-κB表達顯著增高，且與RANKL存在明顯相關，其隨炎癥嚴重程度的增加而升高。

【關鍵詞】 NF-κB; RANKL; 種植體周圍炎; 相關性

【Abstract】 Objective：To explore the expression of NF-κB and its correlation with RANKL in peri-implantitis.Method：From January 2017 to June 2018，45 patients（61 implants）with peri-implantitis after implant restoration were selected into the observation group，45 patients（52implants）with no peri-implantitis after implant restoration were selected into the control group.The periimplant detection depth（PPD），alveolar bone loss depth（DSB），modified sulcus bleeding index（mSBI）and modified plaque index（mPLI）were recorded and compared，the Nuclear Factor-KappaB（NF-κB）and the Receptor activator of NF-κB ligand（RANKL）in gingival crevicular fluid were measured and the correlation was analyzed.Result：There were significant differences in PPD，DSB，mSBI and mPLI in light，medium and severe periimplant inflammation and healthy implants（F=0.214，0.233，0.257，0.313;P=0.012，0.011，0.008，0.024），and there were significant differences within each indicator group（P<0.05）.There were significant differences in NF-κB and RANKL in gingival crevicular fluid of each group（F=0.872，1.017;P=0.001，0.000）.Correlation analysis showed that there was a positive correlation between NF-κB and RANKL in gingival crevicular fluid of peri-implantitis（r=0.631，P=0.000）.Conclusion：The expression of NF-κB in gingival crevicular fluid is significantly increased，has a significant correlation with RANKL，and it related to the severity of inflammatory.

【Key words】 NF-κB; RANKL; Peri-implantitis; Correlation

First-authors address：Shenzhen Dental Hospital to Southern Medical University（Guangdong Shenzhen Dental Medical Center），Shenzhen 518001，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2019.10.004

隨著種植牙體技術的不斷探索及發展[1]，使用種植牙體技術修復牙缺失的患者也越來越多，同時種植體周圍炎作為種植修復后常見的并發癥之一[2]，在臨床工作中也越來越常見，其嚴重影響了種植修復效果及治療后咬合功能，極大降低了患者治療滿意度及生活質量[3]，為此尋求種植體周圍炎的發生機制及治療途徑已成為當前研究熱點。文獻[4-5]指出NF-κB和RANKL在骨性相關疾病患者中的表達顯著增加，并與種植體周圍炎的發生存在一定相關性，可能成為治療種植體周圍炎的方向，但其兩者在種植體周圍炎中的表達及關系尚不明確，本研究主要探究種植體周圍炎中NF-κB與RANKL的表達及其相關性，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 采用前瞻性對照研究，選取本院2017年1月-2018年6月間行種植修復后發生種植體周圍炎的患者45例（種植體61顆）納入觀察組。納入標準：（1）符合種植體周圍炎診斷標準[6]，種植體周圍軟組織存在炎癥并累及骨組織，可表現為探查出血及骨組織吸收，PPD≥4 mm，放射骨損失量≥2 mm;（2）種植修復過程順利，術中未出現明顯并發癥;（3）治療依從性好。排除標準：（1）既往存在口腔疾病及治療史;（2）伴有全身代謝或免疫系統相關疾病;（3）未服用抗生素、免疫抑制劑或非甾體消炎藥;（4）女性患者在非妊娠期或月經期。本研究已充分告知患者并經過本院倫理委員會審批。同時根據種植體周圍炎嚴重程度進行分組[7]，觀察組1共21例，輕度種植體周圍炎，4 mm≤PPD<6 mm，DSB<種植體長度25%;觀察組2共14例，中度種植體周圍炎，6 mm≤PPD<8 mm，DSB<種植體長度50%;觀察組3共10例，重度種植體周圍炎，PPD>8 mm，DSB>種植體長度50%。同時選擇同時期行種植治療且無種植體周圍炎發生的患者45例（種植體52顆）納入對照組。

1.2 方法 由同一人員測量患者PPD、DSB，并記錄患者mSBI和mPLI[8]，mSBI分為0～3級：0級，種植體表面無菌斑;1級，種植體表面用探針輕柔劃過可發現菌斑;2級，種植體表面肉眼可見菌斑;3級，種植體表面有大量的軟垢堆積。mPLI分為0～3級：0級，探診種植體齦緣沒有出血;1級，探診種植體齦緣有分散的點狀出血;2級，探診種植體齦緣在齦溝內呈線狀出血;3級，種植體齦緣有重度或者自發出血。齦溝液的收集：去除牙齦周邊菌斑及軟垢，使用干燥無菌棉球擦拭種植體齦溝周邊，放置棉卷隔濕，并用氣槍空氣吹干，以防止唾液污染，將合適大小的消毒濾紙條插入種植體的牙冠近中、遠中頰側和舌（鄂）1 mm并維持30 s，隨后放入樣品稀釋管中，于-70℃保存，使用NF-κB及RANKL的ELISA試劑盒（R&D Systems公司）檢測其中含量。

1.3 統計學處理 采用SPSS 23.0進行數據處理，計量資料用（x±s）表示，多組比較使用F檢驗，組間比較使用LSD-t檢驗，并使用Pearson相關性分析，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 觀察組與對照組基線資料比較 各組一般資料比較差異均無統計學意義（P>0.05），具有可比性。見表1。

2.2 各組患者種植情況對比 四組的PPD、DSB、mSBI及mPLI比較差異均有統計學意義（F=0.214，0.233，0.257，0.313;P=0.012，0.011，0.008，0.024），且各指標組內比差異均有統計學意義（P<0.05）。見表2。

2.3 齦溝液中NF-κB及RANKL比較 各組齦溝液中NF-κB、RANKL比較，差異均有統計學意義（F=0.872，1.017;P=0.001，0.000）。見表3。

2.4 觀察組齦溝液中NF-κB及RANKL相關性分析 Pearson相關分析顯示觀察組齦溝液中NF-κB與RANKL存在正相關（r=0.631，P=0.000）。見圖1。

3 討論

文獻[9]顯示我國種植體周圍炎于患者間發生率為28%～56%，于種植體間發生率為12%～43%，其本質為口腔感染類疾病，病理改變為種植體周圍軟、硬組織的炎癥反應[10]，局部可見典型充血水腫反應，嚴重影響種植體及口腔功能;此外炎癥會破壞種植體周圍組織對種植體的支持作用，導致種植體穩定性下降[11]。因此探究其發生機制、危險因素對于指導臨床治療顯得尤為重要，NF-κB及RANKL在許多骨性相關疾病中存在著數量和功能的異常，但與種植體周圍炎的關系尚不明確，且兩者間相互關系也未見報道，為此本研究主要探究種植體周圍炎中NF-κB與RANKL的表達及其相關性。

NF-κB最早由Baltimore于1986年報道[12]，是一類能與多種基因啟動子發生特異性結合并增強其轉錄的蛋白質因子，已有研究表明其在免疫應答、炎性反應、細胞黏附、細胞增殖與凋亡等方面扮演著重要角色[13]，其在外界某些刺激下被激活并進入細胞核，并與特定基因的啟動子或增強子上相應位點結合，啟動或調控特定基因的轉錄，最終促使IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8、IFN-γ等炎癥因子的釋放[14]，從而造成局部或全身的炎癥狀態，其中RANKL正是激活NF-κB的細胞因子之一。有研究發現，RANKL在骨吸收、骨壞死等方面扮演著重要角色，RANKL活性的失控將導致哺乳動物某些系統骨組織疾病如骨質疏松、類風濕性關節炎、牙周炎等的發生[15]。同時有研究，表明RANKL與種植體周圍炎關系密切，RANKL的過度活化可能在種植體周圍炎中發揮重要作用[16]。

PPD、DSB、mSBI及mPLI可直觀反應種植體周圍炎癥嚴重程度，是臨床檢查中最直觀、簡便的方法[17]。本研究結果表明，發生種植體周圍炎的上述指標明顯高于健康種植體，證明種植體周圍炎確實存在炎性反應，且種植體周圍炎越嚴重，其上述炎癥指標也越來越高，這與鄭德春等[18]研究結果一致。

通過測定不同組別齦溝液中NF-κB及RANKL含量，結果表明輕、中、重度種植體周圍炎齦溝液中NF-κB及RANKL均顯著高于健康種植體，且重度種植體周圍炎中含量顯著高于中、低度炎癥，中度顯著高于低度炎癥，表明NF-κB及RANKL通路在種植體周圍炎的發生中具有一定作用，且隨著炎癥程度增加，其表達水平也顯著增加，李巖等[12]對犬類種植體周圍炎模型中NF-κB的研究也得出了類似結論。相關性分析顯示種植體周圍炎齦溝液中NF-κB與RANKL存在正相關，Li等[19]研究發現，RANKL與其受體的結合，可導致NF-κB的活化，進而引發破骨細胞分化和促進炎性細胞因子的產生，同時阻止炎性細胞的凋亡，增加局部破骨性炎癥的發生。

綜上所述，種植體周圍炎齦溝液中NF-κB表達顯著增高，且與RANKL存在明顯相關，其隨炎癥嚴重程度的增加而升高。

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（收稿日期：2018-09-30）（本文編輯：周亞杰）