HBV攜帶孕婦經替比夫定治療后Th1和Th2細胞因子變化情況

孟曉慶

洛陽北方企業集團有限公司職工醫院婦產科，河南省洛陽市 471000

乙型肝炎病毒(HBV)感染女性約占HBV感染者的45%[1]，7%的孕期女性為慢性乙型肝炎患者，其中半數以上為HBeAg陽性[2]。目前，該領域研究多集中于HBV攜帶孕婦母嬰阻斷方面，而對產后肝功能水平和HBV血清學變化的研究較少[3]。Th1和Th2細胞因子分別介導細胞免疫和體液免疫反應，Th1和Th2細胞因子相互抑制，維持體內正常免疫平衡狀態。免疫耐受期HBV感染的孕婦體內以Th2型應答模式為主，Th1/Th2失衡是無法正常清除病毒和相關感染細胞的主要原因之一[4]。本研究在孕中晚期給予HBV攜帶孕婦替比夫定干預治療，觀察治療前后ALT、HBV血清學指標以及Th1、Th2細胞因子的動態變化情況，為HBV攜帶孕婦的干預治療提供參考。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取2016年5月—2017年12月在本院就診并分娩的HBV攜帶孕婦58例。入選標準：(1)HBV-DNA陽性≥1年，孕前≥3次、孕期≥2次檢查血清ALT、AST在正常范圍；(2)無抗病毒治療史；(3)分娩后在本院肝內科隨診。排除標準：(1)存在HBV之外其他肝炎病毒感染者；(2)存在HIV、梅毒、皰疹病毒感染者；(3)長期服用免疫抑制劑，合并肝癌或其他惡性腫瘤者。患者年齡21～37歲，平均年齡(29.3±2.5)歲。本研究經倫理委員會批準，研究對象均簽署知情同意書。

1.2 方法 患者于孕中晚期(26～30周)開始接受替比夫定(諾華制藥有限公司，國藥準字H20070028)治療，600mg/d，服藥至產后4～8周，轉入肝內科進行下一步治療。分別于治療前、分娩前、產后4～8周，抽取患者空腹肘靜脈血5ml，使用全自動生化分析儀檢測ALT水平；Elisa法定量檢測HBsAg、HBeAg水平，試劑盒購于上海康朗生物科技有限公司；實時熒光定量PCR 檢測HBV-DNA水平。多亞基細胞因子檢測試劑盒檢測血清Th1細胞因子(γ干擾素、IL-2、TNF-α)水平和Th2細胞因子(IL-4、6、10)水平，試劑盒購于上海寶英生物科技有限公司。上述操作嚴格按試劑盒說明進行。

2 結果

2.1 不同時間段孕產婦血清ALT水平 替比夫定治療前ALT水平為(22.9±7.4)U/L，分娩前為(19.8±6.2)U/L，產后復診時為(35.1±6.6)U/L。產后ALT正常水平34例(58.62%)；≥1×ULN 24例(41.38%)，其中(1～2)×ULN 15例、≥2×ULN 8例、>10×ULN 1例。

2.2 HBsAg、HBeAg、HBV-DNA水平比較 見表1。替比夫定治療前、分娩前、產后患者HBeAg水平之間差異無統計學意義(P>0.05)；分娩前和產后HBsAg水平均明顯低于治療前，差異有統計學意義(P<0.05)；分娩前和產后HBV-DNA水平均明顯低于治療前，產后HBV-DNA水平明顯高于分娩前，差異有統計學意義(P<0.05)。

表1 不同時間段HBsAg、HBeAg、HBV-DNA水平比較

注：與治療前相比，aP<0.05；與分娩前相比，bP<0.05。

2.3 Th1和Th2細胞因子水平比較 見表2。分娩前和產后γ干擾素水平均明顯低于治療前，產后γ干擾素水平明顯低于分娩前，差異有統計學意義(P<0.05)；治療前和分娩前IL-2、TNF-α水平間差異無統計學意義(P>0.05)，產后IL-2、TNF-α水平明顯高于治療前，差異有統計學意義(P<0.05)。治療前和分娩前IL-4、IL-6、IL-10水平間差異無統計學意義(P>0.05)，產后IL-4、IL-6、IL-10水平明顯高于治療前，差異有統計學意義(P<0.05)。

表2 不同時間段Th1和Th2細胞因子水平比較

注：與治療前相比，aP<0.05；與分娩前相比，bP<0.05。

3 討論

HBV感染患者妊娠始終是一個廣泛關注的問題，孕期HBV的活性和免疫狀態均會出現變化。相關研究顯示，HBeAg在免疫耐受期呈陽性且HBV-DNA≥106拷貝/ml的孕期女性分娩后ALT水平升高率為30%～40%，且多發于產后1～2個月；HBeAg陽性女性產后ALT水平升高率為65%～70%，而HBeAg陰性女性產后ALT水平升高率約為30%[5]；孕中晚期給予拉米夫定治療的HBV感染女性產后ALT水平升高率為65%[6]。本研究顯示，HBV感染女性產后ALT維持在正常水平的比例為58.62%，高出正常水平的比例為41.38%，略低于上述研究，說明孕中晚期使用替比夫定干預治療有助于降低HBV感染女性產后ALT水平異常的發生率。

本次研究中分娩前孕婦HBV-DNA水平明顯低于替比夫定治療前，說明替比夫定有助于降低HBV-DNA拷貝數；產后HBV-DNA水平較分娩前明顯升高，但與替比夫定治療前相比明顯降低，而HBsAg水平與分娩前相比略有上升，可能與產后體內免疫水平變化有關。Th1細胞及相關因子可活化巨噬細胞，介導高強度的遲發型變態反應，發揮細胞殺傷作用，與細胞免疫和炎癥組織損傷有關。Th2細胞及相關因子可誘導肥大細胞、嗜酸性粒細胞分化和抗體形成，抑制體內炎癥反應進程，避免對機體的過度損傷[7]。相關研究顯示，免疫應答中Th2細胞因子限制了Th1細胞因子介導的病理性損傷，在維持體內免疫系統的平衡中發揮重要作用[8]。健康女性孕期體內細胞免疫功能下降，免疫耐受性提升，對維持正常妊娠狀態具有促進作用。本研究顯示，替比夫定干預治療前和分娩前Th1細胞因子中IL-2、TNF-α均呈低表達，產后表達水平明顯提升，處于高表達狀態；替比夫定干預治療前γ干擾素水平最高，之后逐漸下降，產后水平最低；干預治療前和分娩前Th2細胞因子中IL-4、IL-6、IL-10均呈低表達狀態，產后表達水平明顯升高；Th1細胞因子中IL-2、TNF-α和IL-4、IL-6、IL-10的變化趨勢一致，總體呈動態平衡狀態。相關研究顯示，HBeAg陽性的乙肝患者接受替比夫定治療過程中，用藥12周起完全應答組患者Th1細胞因子水平明顯提升，Th2細胞因子水平明顯降低，提示替比夫定治療后可通過調節Th1/ Th2細胞因子的平衡狀態，提升Th1細胞因子的免疫反應，抑制HBV-DNA的復制。本研究中孕中晚期給予替比夫定干預治療，產后Th1和Th2細胞因子呈同步上升趨勢，與上述研究結論存在差異，可能與孕期免疫耐受有關，具體機制需進一步深入研究。