宮頸癌患者巖藻糖基轉移酶4的表達特點及與介入治療預后的關系

胡睿 王映霞 陽光輝 李青春 黃婷 唐圣魏

[摘要] 目的 探討宮頸癌患者巖藻糖基轉移酶4（FUT4）的表達特點及與介入治療預后的相關性。 方法 選取2012年2月～2017年2月在湖南省婦幼保健院治療的宮頸癌患者74例（宮頸癌組），均給予介入治療聯合子宮切除術，同時選取因子宮肌瘤行子宮切除患者40例作為對照（對照組）。采用Western blot法檢測兩組患者FUT4蛋白表達水平，同時隨訪觀察患者預后情況。 結果 宮頸癌組FUT4蛋白相對表達明顯高于對照組，差異有統計學意義（P < 0.05）;腫瘤直徑>4 cm、有淋巴結轉移的宮頸癌患者FUT蛋白相對表達明顯高于腫瘤直徑≤4 cm、無淋巴結轉移患者（P < 0.05）;FUT蛋白表達下調患者中位無疾病進展期和總體生存時間明顯高于FUT蛋白表達不變患者和上調患者（P < 0.05）。 結論 宮頸癌患者FUT4蛋白呈高表達，與患者臨床病理特征有一定關系;介入治療后FUT4蛋白表達下調者預后較好。

[關鍵詞] 巖藻糖基轉移酶4;宮頸癌;介入治療;預后

[中圖分類號] R737.33? ? ? ? ? [文獻標識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1673-7210（2019）09（b）-0089-04

Expression of fucoidyltransferase 4 in cervical cancer and its relationship with prognosis after interventional therapy

HU Rui? ?WANG Yinxia? ?YANG Guanghui? ?LI Qingchun? ?HUANG Ting? ?TANG Shenwei

Department of Radiology， Hu′nan Maternal and Child Health Care Hospital， Hu′nan Province， Changsha? ?410008， China

[Abstract] Objective To investigate the clinical significance of expression of fucoidyltransferase 4 （FUT4） in cervical cancer and its relationship with prognosis after interventional therapy. Methods Seventy-four cases of cervical cancer （cervical cancer group） in Hu′nan Maternal and Child Health Care Hospital from February 2012 to February 2017 were selected and treated with interventional therapy combined with hysterectomy， and 40 cases of hysterectomy with hysteromyoma were selected as control （control group）， the expression of FUT4 protein was detected by Western blot， and the prognosis of patients was followed up. Results The relative expression of FUT4 protein in cervical cancer cervical cancer group was significantly higher than that in the control group （P < 0.05）. The relative expression of FUT protein in patients with tumor diameter > 4 cm and lymph node metastasis were significantly higher than the tumor diameter ≤ 4 cm and no lymph node metastases （P < 0.05）. The median duration of disease free progression and the total survival time in down regulation of FUT protein expression patients were higher than those in patients with the invariant and up-regulated expression of FUT protein （P < 0.05）. Conclusion FUT4 protein is highly expressed in cervical cancer patients， which is related to the clinicopathological characteristics of patients. Patients with down-regulation of FUT4 protein after interventional therapy has a good prognosis.

[Key words] Fucoidyltransferase 4; Cervical cancer; Interventional therapy; Prognosis

近年來宮頸癌的整體臨床發病率具有顯著的上升表現，流行病學研究證實，我國大陸地區2010～2017年宮頸癌的發病率持續性維持在（262～483）/10萬人[1]。臨床上宮頸癌的臨床轉歸不佳，治療后的病死率仍然較高[2]。在探討宮頸癌的發病機制的過程中發現，腫瘤相關生物學因子的變化，能夠導致腫瘤細胞的生物學活性的改變，促進了腫瘤細胞的早期增殖浸潤過程[3-4]。巖藻糖基轉移酶4（fucoidyltransferase 4，FUT4）的表達能夠通過對效應蛋白的翻譯激活作用，誘導體內腫瘤細胞的激活，增強腫瘤信號通路NOTCH的上調程度，從而參與到惡性腫瘤的發生過程[5-6]。部分研究者報道了FUT4在消化系統及血液系腫瘤發生過程中的作用，認為FUT4的高表達是促進患者臨床轉歸惡化的重要風險因素[7]，但在宮頸癌中的研究不足。為了揭示FUT4與宮頸癌的關系，從而為臨床上宮頸癌的診斷和免疫靶向治療提供參考，本研究收集了湖南省婦幼保健院（以下簡稱“我院”）宮頸癌患者，探討了FUT4在宮頸癌病灶組織中的異常表達情況，報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2012年2月～2017年2月在我院接受治療的宮頸癌患者74例（宮頸癌組）。納入標準：①均經病理組織學確診;②初次介入治療患者;③FIGO分期ⅠB～Ⅱ期;④臨床隨訪資料完整;⑤患者及家屬知情同意并簽署知情同意書。排除標準：①合并其他惡性腫瘤者;②有化療禁忌證者。同時選取因子宮肌瘤行子宮切除患者40例作為對照組。兩組患者年齡、體重指數比較，差異無統計學意義（P > 0.05），具有可比性。見表1。

表1? ?兩組患者一般資料比較（x±s）

1.2 治療方法

于股動脈處行子宮動脈化療栓塞導管插管至子宮動脈，注入奧沙利鉑（江蘇恒瑞醫藥股份有限公司，生產批號：11010612）200 mg + 氟尿嘧啶（江蘇恒瑞醫藥股份有限公司，生產批號：11010573）15 g，治療后48～72 h給予全子宮切除術，術后常規給予補液、預防感染等治療。

1.3 檢測方法

所有組織標本經石蠟包埋后作連續切片，厚度約為4 mm，采用免疫組化鏈霉卵白素-生物素復合體法（strep avidin-biotin complex，SABC法）染色，二氨基聯苯胺（diamionben zidene，DAB）顯色。FUT4蛋白通用型二抗以及SP試劑盒（生產批號：1018555）和DAB顯色盒（生產批號：1017596）均購自北京中杉金橋生物技術開發公司。以陽性片及PBS代替一抗分別作為陽性及陰性對照，高倍顯微鏡下觀察FUT4蛋白的表達情況，具體染色步驟嚴格按照SP試劑盒說明書進行操作。

1.4 統計學方法

采用SPSS 19.0統計學軟件進行數據分析，計量資料用均數±標準差（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗;計數資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗。生存曲線采用Kaplan-Meier分析，比較采用Log-rank檢驗。以P < 0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 宮頸癌組和對照組FUT4蛋白表達比較

宮頸癌組FUT4蛋白相對表達為（0.922±0.067），明顯高于對照組（0.217±0.097），差異有統計學意義（t = 45.615，P < 0.05）。見圖1。

A：對照組;B：宮頸癌組

圖1? ?Western blot檢測FUT4蛋白表達情況

2.2 FUT4蛋白表達與宮頸癌臨床病理特征關系

FUT4蛋白表達與宮頸癌腫瘤直徑和淋巴結轉移有關（P < 0.05），與年齡、FIGO分期、組織類型、分化程度和浸潤深度無關（P > 0.05）。見表2。

表2? ?FUT4蛋白表達與宮頸癌臨床病理特征的關系（x±s）

2.3 FUT4蛋白表達變化與宮頸癌預后的關系

根據患者介入治療前后FUT4蛋白表達變化情況，將患者分為上調、不變、下調三組，FUT4蛋白表達下調患者26例，不變患者30例，上調患者18例。截至隨訪日期2018年4月，FUT蛋白表達下調患者中位無疾病進展期和總生存時間分別為44個月和56個月，明顯高于不變患者的28個月和34個月（χ2=12.544、20.165，均P < 0.05）和上調患者的29個月和35個月（χ2=15.630、24.555，均P < 0.05）。見圖2。

2 討論

多基因遺傳突變或者后天性的環境因素，均能夠導致宮頸柱狀上皮細胞惡變的發生，特別是在具有人乳頭瘤狀病毒（HPV）感染的人群中，宮頸癌的發生風險可進一步上升[8]。長期的臨床隨訪研究證實，手術、放化療等綜合措施治療后，胃癌患者的5年生存率不足35%，治療后的無瘤生存時間不足36個月[9-10]。免疫靶向治療能夠在惡性腫瘤的治療中發揮重要作用，能夠特異性地阻斷相關蛋白受體的表達，抑制腫瘤的復發，改善腫瘤患者的臨床癥狀。而本研究對于宮頸癌患者病灶組織中的生物學因子的表達研究，能夠為宮頸癌的免疫靶向治療提供作用靶點。

FUT4蛋白是重要的腫瘤相關膜表面糖蛋白，其氨基酸序列的羧基末端結構上包含了多個可結合的氨基、甲基等基團，能夠通過結合上皮細胞膜表面的糖蛋白配體，進而促進細胞膜上跨膜轉運蛋白，激活細胞內腫瘤信號通路。基礎領域的研究證實，FUT4蛋白表達濃度的上升能夠促進AKT或者MAPK信號通路的上調，增加了癌細胞DNA的轉錄激活的風險。FUT4蛋白還能夠影響癌細胞的生物學特征，導致癌細胞變形能力增強，促進癌細胞向宮旁組織的浸潤[5]。部分研究者報道了FUT4蛋白的表達與宮頸癌患者的病情關系，認為FUT4的表達上升與宮頸癌患者的臨床病理分期的進展密切相關[11]，但對于FUT4蛋白在宮頸癌治療后的表達變化研究不足。

免疫組化的結果顯示，在宮頸癌病灶組織中，FUT4蛋白的表達陽性率顯著上升，高于正常宮頸組織，差異較為明顯，提示了FUT4蛋白可參與宮頸癌的病情進展。通過薈萃相關文獻，筆者認為FUT4蛋白的表達與宮頸癌的關系可能與下列幾個方面的因素有關[12-14]：①FUT4蛋白的高表達可增強宮頸柱狀上皮細胞的浸潤能力，促進癌細胞對宮頸基底膜組織的浸潤;②FUT4蛋白的表達上升能夠導致宮頸癌細胞凋亡過程的障礙，抑制凋亡過程。朱雨彤等[15]研究者也認為，在宮頸鱗癌病灶組織中，FUT4蛋白的表達陽性率可上升18%以上，同時在合并有明顯宮旁組織浸潤的宮頸癌患者中，FUT4蛋白的表達陽性率可進一步上升。在探討FUT4蛋白的表達與宮頸癌患者臨床病理特征的關系過程中發現，FUT4蛋白的表達與宮頸癌病灶組織的直徑或者淋巴結轉移密切相關，提示了FUT4蛋白的表達與宮頸癌患者的病情關系，這主要由于FUT4蛋白的表達能夠促進腫瘤細胞的增殖，并提高柱狀上皮細胞對于淋巴結的黏附能力。但本研究并未發現FUT4蛋白的表達與宮頸癌患者的FIGO分期、組織類型、分化程度和浸潤深度的關系，這與朱雨彤等[15]的結論存在一定的不同，考慮可能與FUT4蛋白的檢測靈敏度或者宮頸癌患者的基礎病情的差異有關[16-18]。在探討FUT4的表達與宮頸癌患者生存預后的關系過程中發現，FUT蛋白表達下調患者中位無疾病進展期和總生存時間分別為44個月和56個月，明顯高于FUT4蛋白上升或者不變患者，差異較為明顯，提示了FUT4蛋白的表達與宮頸癌臨床預后的關系，考慮主要由于FUT4蛋白的低表達水平往往預示著癌細胞的增殖相對活躍度較低且侵襲能力不高有關[19-20]。

本次研究的創新性在于探討了FUT蛋白的表達與宮頸癌患者臨床預后的關系。綜上所述，宮頸癌患者FUT4蛋白呈高表達，與患者臨床病理特征有一定關系;介入治療后FUT4蛋白表達下調者預后較好。

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（收稿日期：2018-09-25? 本文編輯：任? ?念）