隨機尿沉渣檢測對社區獲得性尿路感染診斷價值分析

田曉波,于 珊,金 靜,魯辛辛

(首都醫科大學附屬北京同仁醫院，北京 100176)

尿路感染是由各種病原體入侵泌尿系統引起的疾病，根據感染部位可分為上尿路感染(腎盂腎炎、輸尿管炎)和下尿路感染(膀胱炎、尿道炎)[1]。尿培養是尿路感染診斷的金標準，臨床上診斷社區獲得性尿路感染需要根據臨床癥狀以及尿培養結果，才能做出最終的診斷[2-3]。但尿培養對標本的留取方法要求高[4-5]，需要嚴格的無菌操作且培養時間長，往往需要24 h以上,真菌感染甚至需要48 h以上[6]，患者會因此錯過最佳治療時機。尿常規中的尿沉渣檢測，標本留取簡單，檢測的自動化程度高，耗時短，但上皮細胞、裸核的上皮細胞甚至滴蟲等[7]，因與白細胞大小相近，儀器無法區別而會被計為白細胞，造成沉渣檢測白細胞假性增高[8-9]。另外，因為男性和女性生理結構的差異，尿沉渣檢測的影響因素也不盡相同。本研究通過對白細胞和細菌計數，分析靈敏度、特異度和一致性，旨在評估尿沉渣檢測是否可以用于尿路感染的初步診斷，以便盡早進行藥物治療[10-11]。

1 資料與方法

1.1一般資料 將2017年1月至2018年6月于首都醫科大學附屬北京同仁醫院診治的107例泌尿外科門診患者納入研究。納入標準：患者有尿頻、尿急等尿路感染指征；排除孕婦及慢性腎臟疾病患者。納入研究者均行尿培養和隨機中段尿沉渣檢測，年齡19～71歲；男性組45例，年齡22～71歲；女性62例，年齡19～68歲。

1.2儀器與耗材 主要包括Sysmex UF1000i型尿沉渣儀、Olympus BX41型顯微鏡、白洋BY-600A型離心機、基質輔助激光解吸-電離飛行時間質譜儀(MALDI-TOF-MS，Bruker)、VITEK-2 Compact微生物分析系統(Biomerieux)、LabServ LS-C0150型CO2培養箱、培養皿(Oxoid)。

1.3質控菌株 質控菌株包括大腸埃希菌ATCC 25922、金黃色葡萄球菌ATCC 25923、糞腸球菌ATCC 29212，白色假絲酵母菌ATCC90029等。

1.4方法

1.4.1尿培養和鑒定 按照中國衛生行業標準《尿路感染臨床微生物實驗室診斷(WS/T489-2016)》進行尿培養，革蘭陰性桿菌菌落計數>105CFU/mL、革蘭陽性球菌計數>104CFU/ mL者有診斷意義[12]；使用質譜儀和VITEK-2 Compact進行細菌和真菌鑒定；以尿培養的結果作為金標準。

1.4.2Sysmex UF1000i檢測尿沉渣 清潔尿管留取隨機中段尿10 mL，尿沉渣檢測白細胞和細菌。1 500 r/min(離心力340×g)、離心5 min，傾去上清留0.2 mL沉渣混均，吸取1滴計數白細胞和細菌，高倍鏡檢查10個視野。凡Sysmex UF1000i檢測白細胞結果與顯微鏡鏡檢不一致者需排除。白細胞參考區間為0～30/μL，細菌參考區間為0～131/μL。

1.5統計學處理 采用SPSS20.0軟件計算靈敏度、特異度、χ2值和Kappa系數(K值)，Kappa一致性判定標準：0.00～0.20為極低；0.21～0.40為一般；0.41～0.60為中等；0.61～0.80為高度；0.81～1.00為幾乎完全一致。

2 結 果

2.1尿培養和尿沉渣檢測 107例患者中，尿培養(金標準)陽性共45例，男15例、女30例；陰性共62例，男30例、女32例。尿培養致病菌種類和對應沉渣檢測結果見表1、2。男性組30例培養陰性患者中，白細胞陽性3例，白細胞計數均≤170/μL；細菌陽性4例，細菌計數均≤150/μL。男性組15例培養陽性患者中，白細胞陽性13例，細菌陽性8例。女性組32例培養陰性患者，白細胞陽性12例，白細胞計數均≤186/μL，細菌陽性11例，細菌值均≤260/μL；30例培養陽性患者，白細胞陽性22例，細菌陽性28例。

表1 尿培養不同結果對應的沉渣檢測結果

續表1 尿培養不同結果對應的沉渣檢測結果

注：*表示大腸埃希菌在尿培養3種菌中的比例≥90%；△表示屎腸球菌在尿培養2種菌中的比例≥95%

表2 尿培養陽性分離的致病菌種類

2.245例男性組 尿培養陽性率為33.3%(15/45)。尿沉渣檢測：白細胞陽性率為35.6%(16/45)，靈敏度為86.7%，特異度為90.0%，K=0.753；細菌陽性率為26.7%(12/45)，靈敏度為53.3%，特異度為86.7%，K=0.422，白細胞檢測靈敏度、特異度和一致性均優于細菌檢測。見表3、4。

表3 男性組尿沉渣白細胞和尿培養的檢測結果(n)

表4 男性組尿沉渣細菌和尿培養的檢測結果(n)

2.362例女性組 尿培養陽性率48.4%(30/62)，白細胞陽性率54.8%(34/62)，靈敏度為73.3%，特異度為62.5%，K=0.357，細菌陽性率62.9%(39/62)，靈敏度為93.3%，特異度為65.6%，K=0.584，白細胞檢測靈敏度低于細菌檢測，特異度與細菌檢測相似，一致性低于細菌檢測，見表5、6。

表5 女性組尿沉渣白細胞和尿培養的檢測結果

表6 女性組尿沉渣細菌和尿培養的檢測結果

2.4兩組間的比較 男性組和女性組尿培養陽性率差異無統計學意義(χ2=2.42，P>0.05)，白細胞陽性率差異有統計學意義(χ2=3.89,0.01

3 討 論

尿培養作為尿路感染的金標準，標本留取要求嚴格，對培養結果要做全面分析判斷，減少污染是保證尿液標本質量的關鍵,這也是困擾尿培養的難題。清潔中段尿是臨床最易獲得的尿液標本，本實驗尿培養采集方法是清潔中段尿采集法，留取中段尿液約10 mL于無菌容器中，立即送檢，采集后于0.5 h內進行尿培養，但尿液標本質量的影響因素較多，即使導尿管進行導尿，也無法避免體內和皮膚的正常菌污染[13-14]，因此要進行污染菌的排除。男性組30例培養陰性患者中，有4例培養出表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、糞腸球菌、白色假絲酵母菌等單一菌株，但尿培養細菌計數<104CFU/ mL，2例培養出2種或2種以上的凝固酶陰性葡萄球菌(CNS)、解谷氨酸棒桿菌、草綠色鏈球菌、白色假絲酵母菌等皮膚正常菌，尿培養每種細菌計數均<104CFU/ mL；女性組32例培養陰性患者中，有7例培養出溶血葡萄球菌、糞腸球菌、白色假絲酵母菌、乳桿菌等單一菌株，但尿培養細菌計數<104CFU/ mL，3例培養出2種或2種以上的CNS、陰道加德納菌、草綠色鏈球菌、白色假絲酵母菌、乳桿菌等皮膚或陰道正常菌，尿培養每種細菌計數均<104CFU/ mL，這部分均要判斷屬于污染菌。對于男性組15例培養陽性患者，有1例培養出大腸埃希菌、白色假絲酵母菌和解谷氨酸棒桿菌等3種菌，大腸埃希菌比例≥90%，根據臨床癥狀判定致病菌為大腸埃希菌[15]；女性組30例培養陽性患者，有1例培養出屎腸球菌和乳桿菌等2種菌，屎腸球菌比例≥95%，根據臨床癥狀判定致病菌為屎腸球菌。總體而言，男性組比女性組尿培養效果更好，這與女性身體結構特殊性有關，而且陰道等生殖器官含有大量正常菌群，對培養結果的判斷造成了困擾。

尿沉渣檢測對樣本的采集、檢測和結果的判讀更簡單，更快速，更有優勢，對標本留取要求不如尿培養嚴格。患者留取中段尿，在2 h內完成沉渣檢測，全自動批量檢測，檢測耗時短，基本上幾分鐘至十幾分鐘可檢測出白細胞和細菌。同時，細胞直方圖還可以判斷尿路感染中的白細胞類型，以及對藥物治療后療效的觀察[16]。研究中排除了孕婦及慢性腎臟疾病患者。慢性腎臟疾病患者尿液中的小紅細胞和變形紅細胞，會造成細菌、真菌檢測假陽性。男性組有1例致病菌為白色假絲酵母菌，類酵母菌計數為6 670/μL，女性組1例致病菌為熱帶假絲酵母菌，類酵母菌計數為3 154/μL，而沉渣檢測污染性真菌的類酵母菌計數均低于100/μL，尿路感染患者和非尿路感染患者類酵母菌計數呈現出明顯的差別。體積小的草酸鈣結晶、小紅細胞以及其他顆粒或碎塊會被檢測為類酵母菌，影響檢測結果，本實驗中107例患者中，出現4例小紅細胞報告為類酵母菌情形，需要用顯微鏡檢查才能鑒別[17]。

男性組尿培養陽性率33.3%，尿沉渣檢測白細胞陽性率35.6%，靈敏度(86.7%)和特異度(90.0%)均較高，K=0.753，與金標準比較呈現出高度一致性；尿沉渣檢測細菌陽性率26.7%，靈敏度(53.3%)低，特異度(86.7%)高，K=0.422，中等一致性。女性組尿培養陽性率48.4%，白細胞陽性率54.8%，靈敏度(73.3%)和特異度(62.5%)均較低，K=0.357，一致性一般，細菌陽性率62.9%，靈敏度(93.3%)高而特異度(65.6%)低，K=0.584，中等一致性。男性組和女性組白細胞陽性率差異均有統計學意義，細菌陽性率差異有統計學意義。可見，對于男性，沉渣白細胞檢測無論靈敏度、特異度和一致性均優于細菌檢測，白細胞檢測更有價值；對于女性，沉渣白細胞檢測靈敏度低于細菌檢測，特異度與細菌檢測相似，一致性低于細菌檢測，細菌檢測對女性尿路感染的診斷優于白細胞檢測；對于白細胞檢測，男性白細胞陽性靈敏度、特異度和一致性均優于女性組，白細胞檢測對男性尿路感染診斷優于女性；對于細菌檢測，男性組靈敏度和一致性低于女性組，而特異度高于女性組，細菌檢測對男性和女性尿路感染診斷無顯著差異。

UF-1000i使用流式細胞計數法從前向散射光的發光度即可獲知細胞的大小和表面狀態等，從染色尿細胞發出的熒光能夠反映量化的細胞表面和胞質內的性狀，以及細胞核的性質(核糖核酸和脫氧核糖核酸的數量)[18-19]。基于流式細胞計數原理分析尿樣中的5種有機成分并可定量顯示。尤其是白細胞和細菌的定量檢測，可以輔助診斷尿路感染。UF細菌檢測通道核酸熒光試劑能對尿液中的細菌進行特異性染色，能排除細胞碎片、雜質顆粒對細菌染色的干擾。實驗中尿培養陰性病例中，尿培養非致病菌計數均<104CFU/ mL，同時沉渣細菌計數處于比較低的水平，兩者相吻合。

本實驗尿培養陽性率為42.1%(45/107)，略高于其他學者的報道，可能與嚴格要求患者無菌留取尿培養樣本有關，培養結果主要是大腸埃希菌、銅綠假單胞菌和腸球菌為主，與其他研究相似[20]；與其他學者不同的是，本實驗著重研究了尿培養不同結果對應的尿沉渣白細胞和細菌的具體數值，使得對比更加細化，同時，考慮到隨機中段尿是患者最常留取的方式，采用了尿沉渣檢查與尿培養不同的留取方式，更具有代表性和實用性[21]。

4 結 論

與金標準比較，男性白細胞檢測靈敏度和特異度均較高，一致性高，細菌檢測特異度高；女性組細菌檢測靈敏度高，一致性中等。隨機尿沉渣檢測對社區獲得性尿路感染有一定的診斷價值。