探討酶聯(lián)免疫法和金標(biāo)免疫法在檢測(cè)乙肝五項(xiàng)中的應(yīng)用

李靚

【摘要】目的：對(duì)比分析金標(biāo)免疫法和酶聯(lián)免疫法在乙肝五項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值。方法：本研究自2018年3月開(kāi)始，總研究時(shí)間為1年，選取96名乙肝疑似受檢者為研究對(duì)象，隨機(jī)分為X組（n=90）和Y組（n=90），X組應(yīng)用金標(biāo)免疫法進(jìn)行乙肝五項(xiàng)測(cè)定，Y組應(yīng)用酶聯(lián)免疫法進(jìn)行乙肝五項(xiàng)的測(cè)定，對(duì)兩組各檢測(cè)指標(biāo)的陽(yáng)性率進(jìn)行對(duì)比分析，以對(duì)比兩種檢測(cè)方法的診斷價(jià)值。結(jié)果：Y組HBsAg、HBeAg、HBsAb、HBeAb、HBcAb等乙肝五項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)陽(yáng)性率數(shù)值均高于X組，對(duì)比均顯示P<0.05，即差異顯著。結(jié)論：與金標(biāo)免疫法相比，酶聯(lián)免疫法用于乙肝五項(xiàng)的診斷，其診斷結(jié)果更加準(zhǔn)確，并且能夠有效避免外界因素的影響，值得進(jìn)行推廣應(yīng)用。

【關(guān)鍵詞】金標(biāo)免疫法;酶聯(lián)免疫法;乙肝五項(xiàng);應(yīng)用

乙肝是威脅人類健康的一種主要疾病，其能致使患者出現(xiàn)嚴(yán)重的肝功能損傷，如不及時(shí)診斷和治療，會(huì)致使患者發(fā)生肝硬化和肝癌，并且臨床數(shù)據(jù)表明乙肝的發(fā)生率呈現(xiàn)不斷上升的趨勢(shì)[1]。當(dāng)前臨床上多采用對(duì)HBsAg、HBeAg、HBsAb、HBeAb、HBcAb等乙肝五項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)進(jìn)行乙肝疾病的診斷，采用的主要方法包含金標(biāo)免疫法和酶聯(lián)免疫法等。為有效確定這兩種方法在乙肝五項(xiàng)指標(biāo)診斷中的應(yīng)用價(jià)值。下文中筆者選取96名乙肝疑似受檢者為研究對(duì)象，對(duì)比分析金標(biāo)免疫法和酶聯(lián)免疫法在乙肝五項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值，具體研究?jī)?nèi)容如下所示：

1資料與方法

1.1臨床資料

本研究自2018年3月開(kāi)始，總研究時(shí)間為1年。研究對(duì)象為期間診治的96名乙肝疑似受檢者為研究對(duì)象，共將其隨機(jī)分為兩組，其中X組48名和Y組48名。其中男、女患者數(shù)量X組為26名和22名;Y組為25名和23名。X組年齡為（30.74±5.42）歲，Y組為（30.79±5.68）歲。兩組各基礎(chǔ)指標(biāo)比較結(jié)果均顯示P>0.05，即差異不顯著。本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)本次研究，并取得所有研究者同意，與醫(yī)院簽訂同意書。

1.2研究方法

X組應(yīng)用金標(biāo)免疫法進(jìn)行乙肝五項(xiàng)測(cè)定，Y組應(yīng)用酶聯(lián)免疫法進(jìn)行乙肝五項(xiàng)的測(cè)定，對(duì)兩組各檢測(cè)指標(biāo)的陽(yáng)性率進(jìn)行對(duì)比分析，以對(duì)比兩種檢測(cè)方法的診斷價(jià)值。

在血液樣本采集前，告知所有受檢人員在接受檢查前一天，晚上10時(shí)以后不要進(jìn)食和飲水。于第二天清晨在患者空腹?fàn)顟B(tài)下采集患者靜脈血4ml于試管中，進(jìn)行血清分離后置于-20℃下冷藏以備檢測(cè)[2]。

金標(biāo)免疫法檢測(cè)中所采用的金標(biāo)快速檢測(cè)板和試劑由哈爾濱德遠(yuǎn)科技開(kāi)發(fā)有限公司生產(chǎn)，HBsAg，HBeAg 指標(biāo)檢測(cè)所應(yīng)用的方法為雙抗體夾心法，HBsAb 指標(biāo)檢測(cè)所應(yīng)用的方法為雙抗原夾心法，HBeAb，HBcAb 指標(biāo)檢測(cè)所應(yīng)用的方法為競(jìng)爭(zhēng)抑制法，所有檢測(cè)操作均嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作過(guò)程和注意事項(xiàng)進(jìn)行，并依據(jù)說(shuō)明書的要求進(jìn)行檢測(cè)結(jié)果的判斷。

酶聯(lián)免疫法檢測(cè)中所采用的檢測(cè)試劑盒由深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司生產(chǎn)，其采用的檢測(cè)設(shè)備為KHB ST-360 自動(dòng)多功能酶標(biāo)儀檢測(cè)，所有檢測(cè)操作均嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作過(guò)程和注意事項(xiàng)進(jìn)行，并依據(jù)說(shuō)明書的要求進(jìn)行檢測(cè)結(jié)果的判斷。具體操作步驟包含：加樣：依次將陰性對(duì)照樣品、陽(yáng)性對(duì)照樣品、外部質(zhì)控樣品和檢測(cè)樣品加入;孵育： 封板，將檢測(cè)板置于37℃條件下進(jìn)行時(shí)間為1h的孵育;洗板： 應(yīng)用洗板機(jī)按照5 次程序進(jìn)行洗板，隨后進(jìn)行拍干;將酶結(jié)合物加入并有效混勻，封板，將檢測(cè)板置于37℃條件下進(jìn)行時(shí)間為30min的孵育;洗板： 應(yīng)用洗板機(jī)按照5 次程序進(jìn)行洗板，隨后進(jìn)行拍干;分別將顯色液A和顯色液B加入到檢測(cè)板中并有效混合均勻，加入量均為50 μl，封板，將檢測(cè)板置于37℃條件下進(jìn)行時(shí)間為30min的孵育;加入到檢測(cè)板中并有效混合均勻，加入量均為50 μl;用酶標(biāo)儀讀數(shù)，取波長(zhǎng)450 nm，雙波長(zhǎng)，參考波長(zhǎng)630 nm，先用空白校零，然后讀取各孔OD 值。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

SPSS20.0分析，計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)（%）采用X2檢驗(yàn)，計(jì)量數(shù)據(jù)（x±s）采用t檢驗(yàn)，以P<0.05為差異顯著。

2結(jié)果

X組和Y組各檢測(cè)指標(biāo)陽(yáng)性率對(duì)比分析結(jié)果如下表所示：

注：a表示與X組指標(biāo)數(shù)值比較結(jié)果為P<0.05。

結(jié)果顯示，Y組HBsAg、HBeAg、HBsAb、HBeAb、HBcAb等乙肝五項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)陽(yáng)性率數(shù)值均高于X組，對(duì)比均顯示P<0.05，即差異顯著。

3討論

當(dāng)前乙肝五項(xiàng)檢測(cè)是判斷乙肝疾病的主要依據(jù)，臨床檢測(cè)中金標(biāo)免疫法和酶聯(lián)免疫法均為乙肝五項(xiàng)檢測(cè)的常用方法。其中第一種方法檢測(cè)所需要的花費(fèi)較少，經(jīng)濟(jì)優(yōu)勢(shì)明顯，第二種方法檢測(cè)所需要的花費(fèi)較高，但其檢測(cè)過(guò)程均是在封閉條件下進(jìn)行，能夠有效減少檢測(cè)中可能發(fā)生的感染，并且其檢測(cè)時(shí)間更短，尤其適應(yīng)于急診患者的快速檢測(cè)。因此兩種檢測(cè)方法在乙肝五項(xiàng)檢測(cè)中均具有各自的優(yōu)勢(shì)。但通過(guò)上述結(jié)果我們可以看出，相同條件下，酶聯(lián)免疫法HBsAg、HBeAg、HBsAb、HBeAb、HBcAb等乙肝五項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)陽(yáng)性率數(shù)值均高于金標(biāo)免疫法，對(duì)比均顯示P<0.05，即差異顯著，說(shuō)明酶聯(lián)免疫法用于乙肝五項(xiàng)的檢測(cè)具有更高的準(zhǔn)確性和敏感度。

綜上所述，與金標(biāo)免疫法相比，酶聯(lián)免疫法用于乙肝五項(xiàng)的診斷，其診斷結(jié)果更加準(zhǔn)確，并且能夠有效避免外界因素的影響，值得進(jìn)行推廣應(yīng)用。

【參考文獻(xiàn)】

[1]黃秀香，葉迎賓，董志平，等.慢乙肝患者的乙肝五項(xiàng)、HBV-DNA和甲狀腺參數(shù)的結(jié)果分析[J].標(biāo)記免疫分析與臨床，2017，24（5）：559-563.

[2]邢美榮.探討乙肝五項(xiàng)酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)結(jié)果常見(jiàn)影響因素分析[J].醫(yī)藥前沿，2016，6（12）：55-56.