彝族藥白草莓抗胃炎有效部位篩選及藥效學(xué)研究

李海艷

【摘 要】本實(shí)驗(yàn)選用彝藥白草莓萃取5個(gè)有效部位進(jìn)行幽門螺旋桿菌的體外抗菌實(shí)驗(yàn)，測(cè)定各部位的最小抑菌濃度（MIC），結(jié)果石油醚部的MIC為281.25?g.ml-1，二氯甲烷部的MIC為1125?g.ml-1，乙酸乙酯部的MIC為35.16?g.ml-1，正丁醇部的MIC為562.5?g.ml-1，水層的MIC為17.5?g.ml-1，對(duì)照藥克拉霉素的MIC為0.0075?g.ml-1，其中水層的抗菌活性最強(qiáng)，驗(yàn)證了白草莓用于治療慢性胃炎的民間驗(yàn)方的科學(xué)性。

【關(guān)鍵詞】白草莓;慢性胃炎;有效部位;抗菌

【中圖分類號(hào)】R29【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A【文章編號(hào)】1005-0019（2020）06--02

白草莓為薔薇科草莓屬Fragaria植物黃毛草莓的干燥全草，白草莓（云南中草藥選），異名白泡兒、白蒲草、白地莓等，又名：銹毛草莓（秦嶺植物志）[1]。多年生草本，粗壯，密集成叢，高5-25cm，莖密被黃棕色柔毛，幾與葉等長(zhǎng)。藥味甘、苦，性涼。主治肺熱咳喘，解毒消腫，百日咳，口舌生瘡，痢疾，小便淋痛，蛇毒咬傷，骨折損傷[2-3]。《云南中草藥》記載主治口腔潰瘍，血尿，尿路感染，腰椎結(jié)核，骨折。其具有較高的藥用價(jià)值，資源豐富，但目前對(duì)其藥效研究較少，但為民間驗(yàn)方常用藥。本文根據(jù)民間用其治療頑固性慢性胃痛立題，慢性胃炎為臨床常見疾病及多發(fā)疾病，臨床表現(xiàn)癥狀較多表現(xiàn)為上腹部疼痛或飽脹、惡心、噯氣等，隨著病情的發(fā)展會(huì)發(fā)生上皮分化致腺體萎縮，進(jìn)而發(fā)展成胃癌。選取慢性胃炎的主要致病菌幽門螺旋桿菌做體外抗菌實(shí)驗(yàn)，確定藥材不同有效部位的最小抑菌濃度，為今后用民族藥預(yù)防、治療慢性胃炎提供有力依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)材料及儀器

1.1 材料

1.1.1 藥材 采自云南省玉溪市江川區(qū)，經(jīng)中國(guó)科學(xué)院昆明植物研究所鑒定為薔薇科草莓屬（Fragaria）植物黃毛草莓的全草。

1.1.2 菌種 幽門螺旋桿菌（H.pylori）標(biāo)準(zhǔn)菌株ATCC11637，由云南省楚雄州藥檢所微生物實(shí)驗(yàn)室提供。

1.1.3 培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件 選用腦心浸液肉湯（BHI）培養(yǎng)基，美國(guó)Sigma公司，加入10%的無菌脫纖維兔血，加入聯(lián)合抗生素Timp 5mg/L，萬(wàn)古霉素5mg/L，兩性霉素2mg/L，制成選擇性血試管備用。菌株經(jīng)過活化、接種后，將試管置于含5% CO2 37℃條件培養(yǎng)3—5天，選擇陽(yáng)性者用于實(shí)驗(yàn)。

1.2 樣品提取 白草莓藥材5kg用8倍量70%乙醇回流提取3次混合得2500ml為總提物，用極性從小到大的5種溶劑順序萃取，得有機(jī)溶劑部分和水層部分，后者再用其2倍量的有機(jī)溶劑萃取兩次，即得石油醚萃取部（30.075g）、二氯甲烷萃部（109.342g）、乙酸乙酯萃部（126.032g）、正丁醇萃取部（155，320g）、剩余水層（184.721g）、對(duì)照藥品為克拉霉素（幽門螺旋桿菌的特效藥）。

2 試驗(yàn)方法

2.1 樣品稀釋方法 采用二倍稀釋法[6-8]：取無菌試管11支，每支加BHT培養(yǎng)基2ml，第1管加入抗菌藥2ml，從第1支管取2ml至第2管，混勻。依次取至第9管，第9管取2ml棄去。第10管不加抗菌藥為陽(yáng)性對(duì)照管，第11支管加受試藥不菌液為陰性對(duì)照管，混勻后去2ml棄去，1—10管加100 ?L菌液。菌液用0.5號(hào)麥?zhǔn)媳葷峁鼙葷?，將其濃度調(diào)至4×105—5×105 cfu.ml-1之間。第1管至第9管中的藥物終濃度由高到低為：3000、1500、750、375、187.5、93.75、46.88、23.44、11.72 ?g.ml-1，克林霉素濃度由高向低依次為0.64、0.32、0.16、0.08、0.04、0.02、0.01、0.005、0.0025 ?g.ml-1。

2.2 試驗(yàn)結(jié)果觀察標(biāo)準(zhǔn) 幽門螺旋桿菌接種后置于37℃，5% CO2 條件頂微需氧環(huán)境中培養(yǎng)3—5天，讀取MIC值，以無菌生長(zhǎng)的試管中所含藥物最低濃度為藥物對(duì)該菌的最低抑菌濃度。

3 結(jié)果

4 討論

本實(shí)驗(yàn)提取彝族藥白草莓經(jīng)石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇、水層萃取所得的不同有效部位進(jìn)行慢性胃炎的主要致病菌幽門螺旋桿菌的體外抗菌研究，選用克拉霉素為對(duì)照抗菌藥。結(jié)果顯示白草莓石油醚萃取物對(duì)致病菌的MIC均數(shù)為281.25 ?g.ml-1、二氯甲烷的MIC均數(shù)為1125 ?g.ml-1、乙酸乙酯的MIC均數(shù)為35.16 ?g.ml-1、正丁醇的MIC均數(shù)為562.5 ?g.ml-1 、水層的MIC均數(shù)為17.5 ?g.ml-1，克拉霉素的MIC均數(shù)為0.0075 ?g.ml-1。其中白草莓水層的抗菌活性最強(qiáng)，其次是乙酸乙酯萃取部位效果也較好。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果為今后于民族藥中篩選出治療慢性胃炎特效藥提供有力依據(jù)，同時(shí)也證明本實(shí)驗(yàn)選用的彝藥白草莓在民間長(zhǎng)期用于預(yù)防、治療慢性胃炎是科學(xué)的、合理的。

參考文獻(xiàn)

王麗，李學(xué)芳.白草莓的生藥學(xué)研究[J].云南中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2011，34（5）：11-14.

江紀(jì)武，靳朝東.藥用植物詞典[M].天津：天津科技出版社，2005：335.

國(guó)家中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會(huì).中華本草（第4卷）[M].上海：上海科技出版社，1999：149.