桑葉水煎醇沉液對小鼠鎮痛作用的研究

何喆　鮑翠俊

桑樹為桑屬植物桑科多年生落葉小喬木植物，每年可摘3～6次。生命力很強，中國是蠶絲業的發源地，栽桑養蠶具有500多年的悠久歷史。本文通過小鼠鎮痛實驗，觀察了桑葉乙醇沉淀物不同劑量組對小鼠的鎮痛作用，為進一步研究桑葉乙醇沉淀物的有效成分及其鎮痛作用奠定了基礎，也為發現桑葉乙醇沉淀物的類型及其開發利用提供了實驗依據。

一、材料與方法

1、動物

昆明種小鼠（普通級）200只。25～30g，由安徽科技學院實驗動物中心提供（普通級）。

2、儀器

R20-型旋轉蒸發器（上海申生科技有限公司）;SHB-Ⅲ型循環水式多用真空泵（鄭州長城科工貿有限公司）;FA-1004型電子天平（上海天平儀器廠）;TDL80-IB型臺式離心機（上海安亭科儀器廠）;YP600型電子分析天平（上海精科電子廠）;RB-200型智能熱板儀（成都泰盟科技有限公司）。

3、藥材與試劑

（1）藥材。桑葉：安徽科技學院中藥園5月份采集，烘干，備用。

（2）試劑。無水乙醇（分析醇，上海建業化工有限試劑廠）;生理鹽水（安徽環球藥業限公司）;安乃近注射液（蕪湖原奇制藥有限公司）;冰乙酸（上海化學試劑有限公司）。

4、桑葉水煎醇沉液的制備

稱取桑葉200g，置于不銹鋼鍋中，按照藥物與蒸餾水1：8的比例往鍋內加入1600mL蒸餾水浸泡30min，用電爐煎煮，先用武火水開后再用文火煮30min，使用8層紗布過濾。藥渣復煎1次，第二次20min，合并2次煎液，濃縮、離心、定容至200mL，即得含生藥1g/mL桑葉水煎液。取桑葉水煎液200mL，以3：7的比例加無水乙醇，使醇含量達70%，密封于4℃冰箱冷藏24h。濾液用旋轉蒸發器回收乙醇（轉速100 r/min，50℃），離心10min（轉速3800r/min），最后定容為200mL（含生藥1g/mL），即得桑葉水煎醇沉液，裝瓶，備用。

5、試驗方法

（1）熱板法鎮痛試驗。從100只雌鼠中選取合格雌鼠50只，隨機分5組，每組10只。

（2）扭體法鎮痛試驗。從100只小鼠中隨機選取50只合格小鼠（雌雄均可），將選取的50只合格小鼠隨機分5組，每組10只。

6、統計學處理

應用SPSS 17.0 統計軟件進行統計學處理，其結果以（±SD）表示，統計學處理采用t檢驗。

二、結果與分析

1、桑葉水煎醇沉液對熱板法所致小鼠鎮痛作用的影響

表1的結果表明：給藥前各劑量組差異不顯著（p>0.05），給藥后各組的痛閾值都有提高，陽性對照組痛閾值最高，生理鹽水組最低。陽性對照組、高劑量組和中組劑量組與生理鹽水組比較，差異極顯著（p<0.01），低劑量組與生理鹽水組比較，差異顯著（p<0.05）;生理鹽水組與陽性對照組比較，差異極顯著（p<0.01），低劑量組與陽性對照組，比較差異顯著（p<0.05），高劑量組和中劑量組與陽性對照組，比較差異不顯著（p>0.05）;各劑量組之間差異不顯著（p>0.05）。以上結果表明桑葉水煎醇沉液對小鼠有鎮痛作用，中劑量組效果明顯。

2、桑葉水煎醇沉液對扭體法所致小鼠疼痛的影響

表2結果表明：在第一次出現扭體反應15min內的扭體次數的比較中，陽性對照組與生理鹽水組比較，差異顯著（p<0.05），各劑量組與生理鹽水組比較差異極顯著（p<0.01）;生理鹽水組和高劑量組與陽性對照組比較，差異顯著（p<0.05），中劑量組和低劑量組與陽性對照組比較差異極顯著（p<0.01）;各劑量組之間差異不顯著（p>0.05），各劑量組之間扭體數降低。上述結果表明腹腔注射不同劑量的桑葉水煎醇沉液對小鼠有鎮痛作用，其中高劑量、中劑量、低劑量組效果明顯。

（作者單位：1.245702安徽省黃山市黃山區耿城鎮農業綜合服務站;2.245720安徽省黃山市黃山區永豐鄉農業綜合服務站）