HS-SPME-GC-MS分析商陸及其炮制品揮發(fā)性成分

馬銀宇 盧金清 鄧雅倩

摘要：利用頂空固相微萃取技術(shù)（HS-SPME）與氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（GC-MS）對(duì)比分析商陸（Phytolacca acinosa Roxb.）不同炮制品揮發(fā)性成分，并通過面積歸一化法計(jì)算每種成分的相對(duì)百分含量。結(jié)果表明，從商陸生品中檢測(cè)出39個(gè)峰，鑒定出29種成分，占揮發(fā)性成分的76.52%;從醋商陸中檢測(cè)出33個(gè)峰，鑒定出27種成分，占揮發(fā)性成分的68.78%。共有揮發(fā)性成分有14種，與商陸生品相比，醋商陸減少15種成分，新增13種成分。商陸不同炮制品中揮發(fā)性成分的組成和含量均發(fā)生了變化。

關(guān)鍵詞：商陸（Phytolacca acinosa Roxb.）;炮制品;頂空固相微萃取;氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù);揮發(fā)性成分

中圖分類號(hào)：Q949.745.4 ? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：0439-8114（2020）06-0153-04

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2020.06.031 ? ? ? ? ? 開放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識(shí)碼（OSID）：

Analysis of volatile components of different processed products of

Phytolacca acinosa Roxb. by HS-SPME-GC-MS

MA Yin-yu，LU Jin-qing，DENG Ya-qian

（Research and Development Center of Medicinal Plant in Hubei Province，Hubei University of Chinese Medicine，Wuhan 430065，China）

Abstract： The volatile components of different processed products of Phytolacca acinosa Roxb. were compared and analyzed by headspace solid phase microextraction （HS-SPME） and gas chromatography-mass spectrometry （GC-MS）. The relative percentage of each component was calculated by area normalization method. Results showed that 39 peaks were detected and 29 constituents were identified， accounting for 76.52% of the volatile constituents. 33 peaks were detected and 27 constituents were identified from vinegar Phytolacca acinosa Roxb.， accounting for 68.78% of the volatile constituents. There were 14 volatile components in both. Compared with Phytolacca acinosa Roxb. vinegar Phytolacca acinosa Roxb. has 15 components reduced and 13 components added.

Key words： Phytolacca acinosa Roxb.; processed products; HS-SPME; GC-MS; volatile component

商陸為商陸科（Phytolaccaceae）植物商陸（Phytolacca acinosa Roxb.）或垂序商陸（P.americana L.）的干燥根，別名夜呼、山蘿卜、當(dāng)陸、野蘿卜等。性苦，寒，有毒;歸肺、脾、腎、大腸經(jīng)。有逐水消腫、通利二便、外用解毒散結(jié)等功效[1]?，F(xiàn)代臨床研究表明，商陸經(jīng)醋制后其毒性明顯降低，有利于臨床安全用藥[2，3]。2015年版《中國藥典》雖記載有商陸炮制品，對(duì)商陸及其炮制品的研究報(bào)道非常少，尤其是利用HS-SPME-GC-MS對(duì)商陸及其不同炮制品的揮發(fā)性成分研究鮮有報(bào)道。

本研究采用HS-SPME-GC-MS分析商陸及其不同炮制品揮發(fā)性成分，探討不同炮制方法對(duì)商陸揮發(fā)性成分的影響，以期為商陸及其炮制品在臨床用藥過程中提供參考。

1 ?材料與方法

1.1 ?材料

1.1.1 ?藥材 ?商陸飲片購于武漢強(qiáng)康藥業(yè)有限公司，經(jīng)湖北中醫(yī)藥大學(xué)生藥教研室張秀橋教授鑒定為商陸科（Phytolaccaceae）植物商陸（Phytolacca acinosa Roxb.）的干燥根。

1.1.2 ?儀器 ?手動(dòng)固相微萃?。⊿PME）進(jìn)樣器（IKA，德國）;Agilent 6890/5973型氣相-質(zhì)譜-計(jì)算機(jī)聯(lián)用儀（Hewlett-Packard公司）;頂空瓶（15 mL）;65 μm聚二甲基硅氧烷-二乙烯基苯（PDMS/DVB）萃取纖維頭（Supelco公司）;ALC-210.2電子天平（北京賽多利斯天平有限公司，d=0.01 g）。

1.2 ?方法

1.2.1 ?醋商陸的制備 ?商陸醋制品炮制方法參照2015年版《中國藥典》四部0213炮制通則中規(guī)定的處理方法。精確稱取100 g商陸生品，然后再加入適量米醋攪拌均勻，悶透，再放入炒制容器內(nèi)，炒制至規(guī)定的程度時(shí)，取出，放涼備用。

1.2.2 ?GC-MS色譜與質(zhì)譜條件 ?GC條件：色譜條件HP-5MS石英毛細(xì)管柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm）;升溫程序?yàn)椋?0 ℃開始，以8 ℃/min升溫至90 ℃，然后再以1 ℃/min升溫至100 ℃，然后以15 ℃/min升溫至190 ℃，最后再以10 ℃/min升溫至230 ℃，保留3 min;載氣：高純度氦氣（99.999%），柱流速：0.8 mL/min，進(jìn)樣口溫度：230 ℃。

MS條件：EI源;離子源溫度230 ℃，電離電壓70 eV;四級(jí)桿溫度150 ℃;掃描質(zhì)量范圍35～550 m/z。

1.2.3 ?頂空固相微萃取條件 ?經(jīng)過對(duì)被測(cè)樣品的用量、萃取時(shí)的平衡時(shí)間，萃取揮發(fā)性成分時(shí)的溫度、萃取時(shí)間以及解吸附時(shí)間等綜合考察，最佳萃取條件確定為：商陸樣品1.5 g置于15 mL的頂空瓶中，輕輕插入帶有萃取纖維頭（65 μm PDMS/DVB）的手動(dòng)進(jìn)樣器，在120 ℃下預(yù)平衡15 min后，再壓縮手柄伸出萃取頭萃取20 min，取出后立即插入氣相色譜儀進(jìn)樣口（溫度230 ℃）解吸附3 min，進(jìn)樣模式為不分流進(jìn)樣。

商陸醋制品試驗(yàn)條件同上。

2 ?結(jié)果與分析

通過化學(xué)工作站數(shù)據(jù)處理和面積歸一化法計(jì)算總離子流中各組分的相對(duì)百含量，通過質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫NIST08檢索各峰的質(zhì)譜數(shù)據(jù)，再結(jié)合各峰的相對(duì)保留時(shí)間來確定各個(gè)組分。

從商陸生品中分離出39個(gè)峰，鑒定出29種成分，占總揮發(fā)性成分的76.52%。從商陸醋制品中分離出33個(gè)峰，鑒定出27種成分，占總揮發(fā)性成分的68.78%（圖1、圖2及表1）。

3 ?小結(jié)與討論

從商陸生品中鑒定出的29種成分，占總揮發(fā)性成分的76.52%;從商陸醋制品中鑒定出27種成分，占總揮發(fā)性成分的68.78%。商陸生品中占揮發(fā)性成分相對(duì)百分含量最高的是α-蒎烯（32.40%），其次為正己酸（4.79%）、羅漢柏烯（3.39%）、乙酸松油酯（3.14%）、姜黃素（2.95%）、右旋萜二烯（2.72%）、左旋乙酸冰片酯（2.30%）、（+）-花側(cè)柏烯（1.92%）、α-松油醇（1.41%）等。在商陸醋制品中，揮發(fā)性成分相對(duì)百分含量最高的是雪松烯（22.86%），其次為壬醛（6.90%）、正己酸（5.57%）、羅漢柏烯（3.44%）、左旋乙酸冰片酯（2.92%）、右旋萜二烯（2.48%）、乙酸松油酯（2.33%）、合成右旋龍腦（1.78%）等。商陸炮制前后共有揮發(fā)性成分有14種，其中含量較高的分別是正己酸、羅漢柏烯、乙酸松油酯、右旋萜二烯、左旋乙酸冰片酯等，其中商陸醋制后正己酸、羅漢柏烯、左旋乙酸冰片酯的含量明顯增多，而乙酸松油酯、左旋乙酸冰片酯的含量卻明顯減少。

商陸醋制后揮發(fā)性成分中醇類成分相對(duì)百分含量有所降低，醛類成分相對(duì)百分含量有所升高。商陸中薄荷醇和丹皮酚是中藥中的重要有效成分，其中薄荷醇是一種飽和的環(huán)萜醇。研究表明，薄荷醇具有清涼止癢、抗菌、抗腫瘤和保護(hù)胃腸道等功效[4];丹皮酚具有抗腫瘤、保肝護(hù)腎、降血糖、抗菌消炎、抗心律失常、抗過敏、保護(hù)心血管、保護(hù)神經(jīng)、增強(qiáng)免疫力等多種藥理作用[5，6]。同時(shí)，在醋商陸中檢測(cè)到樟腦。樟腦是樟科植物樟的根、莖、葉經(jīng)水蒸氣蒸餾法取得揮發(fā)油后，再用分餾法從中提取得到或用化學(xué)方法制得的一種飽和環(huán)狀酮，具有興奮、消炎鎮(zhèn)痛、抗炎止咳等藥理作用[7]。從揮發(fā)性成分的角度考慮，商陸炮制前后藥理作用大致相同，但活性物質(zhì)的改變必然引起臨床療效的改變。研究發(fā)現(xiàn)，苯甲醛、冰片、（+）-花側(cè)柏烯3種成分在醋商陸中的含量明顯減少，苯甲醛廣泛存在于植物中，具有醛類的通性，易被氧化，有低毒;冰片即為2-茨醇，吸收后有微毒，有致敏性，接觸后會(huì)出現(xiàn)頭暈、惡心、嘔吐甚至驚厥等;（+）-花側(cè)柏烯也有一定刺激性，吞咽后有毒。三者的含量明顯減少甚至消失，可見經(jīng)炮制后商陸毒性有所降低，可為臨床安全應(yīng)用商陸提供一定的參考[8]。

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