FN1在68例胃癌組織中的表達及臨床意義分析

許雄鋒 鐘麗園

【摘 要】目的：本文旨在探討FN1在胃癌組織中的表達及其臨床意義。方法：運用免疫組化技術檢測胃癌組織及癌旁正常組織中FN1的表達水平并分析其與患者臨床參數的關系。結果：在68例胃癌組織中FN1陽性表達率為73.53%（50/68例），癌旁正常組織中FN1陽性表達率為35.29%（24/68例），差異有統計學意義（P<0.05）;在胃癌組織中，FN1的表達水平在胃癌患者的TNM分期與淋巴結轉移呈正相關（P<0.05），與患者年齡、腫瘤大小、病理分級無統計學意義（P>0.05）。結論：FN1在胃癌組織中表達上調，其可能是胃癌患者病情進展預測的潛在生物學標志。

【關鍵詞】：FN1;胃癌;臨床意義

【中圖分類號】R735.2【文獻標識碼】A【文章編號】1672-3783（2020）07-21--01

胃癌是第四大最常見的癌癥，是癌癥死亡的第三大主要原因，已經成為世界范圍內重要的健康問題，尤其是在中國，韓國和日本。根據國際癌癥研究機構的數據，2012年約診斷出950，000例胃癌新病例，和70萬例死亡病例[1]。通常，該疾病被診斷已為晚期，并且大多數患者中可用的治療方法有限。目前，盡管外科手術結合放療，化學療法和靶向治療可以延長患者生存期，但晚期胃癌患者的5年總生存率仍然很差。因此，迫切需要開發新的診斷方法和新療法以降低與胃癌相關的死亡率并改善患者的臨床療效。

纖維連接蛋白（FN）是一種高分子量的糖蛋白，分子量介于220，000和250，000之間。作為一種粘附分子，FN最初是從人血漿和成纖維細胞的細胞表面分離出來的，并以高水平存在于細胞外基質中，包括存在于膠質瘤在內的多種腫瘤中。纖維連接蛋白1（FN1）是FN家族的成員，它參與多種細胞生物學過程，包括細胞粘附，遷移，生長和分化在內的多個細胞過程中起著至關重要的作用。研究還發現FN1與多種疾病的發生相關，如癌癥，關節炎和動脈粥樣硬化等。研究已證實FN1在食道鱗狀細胞癌，口腔鱗狀細胞癌，鼻咽癌，結直腸癌，卵巢癌，腎癌和甲狀腺癌中促進細胞增殖和遷移[2]。然而，關于FN1在胃癌中的研究尚少，且意見不一。因此有必要進一步驗證和闡明FN1在胃癌中的作用。

1 材料與方法

1.1 一般資料選擇2016年4月至2018年10月在我院住院患者手術切除的胃癌標本68例，所有病例術前均未采取放療、化療治療，同一患者手術標本通過切緣正常組織作為正常對照組織。其中，≥60歲的患者42例，<60歲的患者26例;男性患者46例，女性患者22例;高、中分化患者28例，低分化或未分化患者40例;TNM分期I-II期患者30例，III-IV期患者38例;有淋巴結轉移者50例，無淋巴結轉移者18例。上述組織標本的使用經本院倫理委員會同意。

1.2 試劑免疫組化試劑盒（武漢博士德），DAB顯色試劑盒（北京中杉金橋），FN1抗體購自北京中杉金橋生物技術有限公司，二抗購自上海長島生物技術有限公司。

1.3 方法免疫組化采用SP 法。一抗為兔抗人FN1（稀釋倍數為1∶1000），稀釋后滴加于切片上，濕盒4 ℃過夜。第2天以羊抗兔二抗室溫下孵育半個小時，操作嚴格按說明書進行。使用DAB顯色液室溫孵育10min，再用蘇木精復染，脫水，封片。

1.4 結果判定：FN1染色陽性產物呈棕黃色顆粒狀，均定位于胞質中，根據光學顯微鏡下觀察陽性染色細胞數占瘤細胞總數比例以及染色程度分為：①陰性，陽性細胞數小于10%;②陽性染色，陽性細胞數在10%～50%之間;③強陽性染色，陽性細胞數大于等于50%。

1.5 統計學處理

應用SPSS16.0統計軟件進行分析，計數資料的比較采用χ2檢驗分析，當P<0.05時，為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 FN1在胃癌與正常胃組織中的表達

在68例胃癌組織中，其中50例FN1呈陽性表達（圖1），陽性率為73.53%;相應的癌旁正常胃組織中FN1陽性表達僅24例，陽性率為35.29%，之間差異有統計學意義（P<0.05）。

2.2 胃癌組織中FN1表達與臨床參數的關系

在68例胃癌組織中，FN1的表達在TNM分期I-II期患者中明顯低于III-IV期患者的表達，差異有統計學意義（P=0.005）;在有淋巴結轉移的組織中FN1的表達明顯高于無淋巴結轉移的組織中表達，差異有統計學意義（P=0.001）;而FN1的表達與患者年齡、性別和病理分級無統計學意義 （P > 0.05）（見表1）。

3 討論

FN1介導細胞與細胞外基質之間的相互作用，并在細胞粘附，遷移，生長和分化中起重要作用。FN1是整聯蛋白受體家族眾多成員的配體，參與各種腫瘤的發生和發展。有研究表明，乳腺癌中與腫瘤相關的FNs的表達明顯高于正常組織相關的FNs [3]。并且研究顯示，在抗癌藥物治療之前神經膠質瘤細胞中FN呈高表達狀態，因此，當FN功能成為治療目標時，這種豐富程度的提高可能有助于腫瘤靶向效率[4]。FN是一種普遍存在的細胞外基質糖蛋白，在整個人的一生中都被組裝到所有組織的原纖維基質中。膠質瘤微環境中大量的細胞外基質對膠質瘤形態的維持至關重要，并且與膠質瘤細胞的增殖和分化有關。有報告表明，PI3K / AKT / mTOR途徑在FN轉錄和選擇性剪接中起重要作用，從而調節細胞行為[5]。

研究表明，FN1參與多種腫瘤的發生和發展，并在多種癌癥中表達上調，例如食道鱗狀細胞癌，結腸直腸癌，口腔鱗狀細胞癌和甲狀腺癌。例如，FN1在口腔鱗狀細胞癌中與淋巴結轉移密切相關，FN1通過FAK激活增加血管內皮生長因子C，淋巴管生成，并促進EMT的發生。據報道，FN1過表達是頭頸癌預后不良的指標。FN1是頭頸部鱗狀細胞癌對放療耐藥性的潛在生物標志物，FN1在具有順鉑耐藥性的卵巢癌中差異表達[6]。目前已有研究確定癌癥進展的分子機制涉及FN誘導的基因表達變化。例如，FN1可以增強基質金屬蛋白酶（MMPs）的表達，這是促進癌癥侵襲和轉移的關鍵因素。在結直腸癌中，FN1可以下調P53并抑制細胞凋亡[7]。FN1在鼻咽癌中也被認為是預后因子。據報道，鼻咽癌中的FN1過度表達與疾病晚期和生存期短有關[8]。

在本次研究中通過免疫組化實驗發現，在68例胃癌患者組織中FN1以高表達為主。我們還觀察到，FN1在胃癌中的高表達與患者的年齡、性別、腫瘤大小以及病理分級無關，但卻與胃癌患者的TNM分期和淋巴結轉移的臨床病理特征密切相關。提示FN1的高表達可能與胃癌的發生、發展有關，與文獻的報道基本相一致。綜上所述，FN1表達水平在胃癌分期中發揮了重要作用，其可能與胃癌病情進展密切相關，FN1可作為預測胃癌病情進展的一個潛在分子標志物，同時也為胃癌的治療及預后提供新的理論依據。

參考文獻

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