免疫檢驗中電化學發光免疫分析的應用和結果影響因素

張明

【摘 要】目的：探討并分析免疫檢驗中電發光免疫的臨床運用以及呈現出的結果情況。方法：分析并研究電極開關在電化學發光中的相關影響情況，對比不同開關的電極的發光效率。結果：觀察電化學發光影像，四孔電極的電發化學發光影像下不僅具有四孔發光的特點，其小孔同樣也存在發光的情況，Tri-n-propylamine與六水合二氯三聯吡啶釕所呈現出的圖形較清楚，信噪比為4。結論：免疫檢驗中電化學發光會受到電極開關的影響而造成不同的發光效率，電化學發光通常集中于邊緣位置。

【關鍵詞】電化學發光免疫;免疫檢驗;影響因素;電化學發光效率

【中圖分類號】R447 【文獻標識碼】A 【文章編號】2095-6851（2020）10--01

本研究共設置了三類形態的電極，即圓片狀、螺旋絲狀以及四孔狀，本文主要將這幾類形態電極運用于免疫檢驗過程中，來檢測電化學發光強度與發光圖像等相關情況，具體報道如下。

1 臨床資料與研究方法

1.1 儀器與試劑

本研究試驗所使用的試劑包含了硫酸鉀（由鄭州統麒化工所生產）、三丙胺（Tri-n-propylamine，由美國Sigma-Aldrich公司所生產）、六水合二氯三聯吡啶釕（由Sigma-Aldrich公司所提供）等。二維成像系統則由恒溫水泵、ICCD、PC機、ST-130控制器所組成，首先，使用相關控制器（ST-130）進行制冷處理（降低至-40度）之后，將其置于暗箱中，通過光學透鏡在ICCD光電陰極成像，由ST-130控制器對數據加以采集并完成傳送工作，圖像則由winview加以處理。

1.2 電極選擇

本研究共選擇了三類電極，全部電極都屬于定做電極，其中，四孔電極主要是在圓片電極的基礎上來鉆出一個1毫米直徑的小孔所得到，而圓片電極的直徑為1.5厘米，最后，以鉑絲（給予彎曲處理后）來得到了實驗使用的螺旋絲電極。

1.3 實驗方法

選擇硫酸鉀，并以0.1mol/L的劑量對六水合二氯三聯吡啶釕進行溶解處理，從而配制成1mmol/L的實驗液，在運用的過程中通過磷酸鹽進行稀釋處理，并且對Tri-n-propylamine以及六水合二氯三聯吡啶釕依照1：2的比例加入樣品池，兩組電壓設置為1.25V，運用ICCD成像，同時探測發光的基本強度。

1.4 統計學處理方法

本研究中的全部數據均使用SPSS 20.0的軟件來加以處理，同時，本研究中的計量資料則以“”所表示，以“”來檢驗本文中各數據間呈現出的數據差。統計結果P>0.05，數據差異對比不明顯，無統計學比較意義，統計結果P<0.05，代表數據差異對比有統計學意義。

2 結果

觀察電化學發光影像，四孔電極與圓片電極都存在邊緣發光的情況 ，其中，四孔電極不僅具有四孔發光的特征，同時，它的小孔同樣存在發光的情況，在此基礎上，Tri-n-propylamine與六水合二氯三聯吡啶釕（100mol/L）所呈現出的圖像十分清楚，其信噪比為4。

對比發光強度，運用濃度為1amo/1L-1nmo/1L的Tri-n-propylamine與六水合二氯三聯吡啶釕分別測試四孔電極的發光體系與圓片發光體系的ECL強度，結果顯示，對比圓片電極來說，四孔電極中，其電化學發光強度大約提升了50-90%，運用圓片電極檢測Ru（bpy）3Cl2.6H2O的極限值為1fom/L，而運用四孔圓片的電極極限則為1aom/L。

3 討論：

就當前臨床免疫學來看，抗原-抗體特異性結合是其中受到廣泛關注的問題，通過電化學發光免疫則能運用此生物特異性完成對復雜生物體系的分析選擇。電化學發光免疫分析主要是指光化學發光與免疫檢測結合的新型免疫分析法，對比常規化學發光來看，電化學發光免疫分析的標記物存在一定的差異性，它屬于電極表面特異性化學發光反應，這是由兩個部分所組成的，即化學發光與電發光。對比其它類別免疫分析法來說，電化學發光免疫分析有著較高的檢驗速度、較高的靈敏度、無任何發射性以及較高的檢驗范圍等特點，電化學發光免疫分析在自動免疫分析前沿技術中以相對較高的穩定度以及操控性在生命科學研究中呈現了良好的發展效益。在如今電化學發光技術中，最為常見的工作電極均以表面光滑的圓片電極為主，由于邊緣效應的產生，分布于電極表面的電荷并不均勻，這致使發光集中于工作電極的邊緣位置，為此，發光效率相對較低，從而致使極低的探測靈敏度。本研究結果顯示，四孔電極中，四孔與小孔均出現了發光的情況，Tri-n-propylamine與六水合二氯三聯吡啶釕圖形較清晰，信噪比為4，而螺旋狀電極呈現出螺旋狀的發光效果。電化學發光免疫分析作為一類與時俱進的免疫標記技術為生命科學研究與臨床診斷提供了一種有效的檢測手段，并逐漸成為免疫分析與DNA分析的前沿方法。

總的來說，電化學發光免疫分析是一類相對快捷、便捷、具有較高靈敏度的免疫檢驗法，對比表面積進行調整能夠有效完成檢測范圍動態的調整價值。

參考文獻

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