雙酶分步酶解紅花籽粕制備抗氧化肽

呂凱波*，朱文婷

武漢工商學院環境與生物工程學院（武漢 430065）

紅花籽粕是紅花籽經過壓榨提油后的副產物[1]，無毒、無異味，粗蛋白質含量為20%～60%，且消化率為77%[2]，是物美價廉、營養豐富、氨基酸組成齊全的純天然植物性蛋白源[3]。目前紅花籽粕的主要用途一般作為廉價的肥料和飼料[4]，造成了優質蛋白質資源的極大浪費。研究表明植物蛋白酶解后可獲得許多具有多種生物活性的肽，具有清除體內自由基的能力、清除身體內脂質過氧化物、保護紅細胞等生理功能[5]。目前已酶解出多種植物性抗氧化肽，如菜籽抗氧化肽[6]、玉米抗氧化肽[7]、大豆抗氧化肽[8]等。對于紅花籽粕，國內外學者把主要研究蛋白提取、酶解工藝及氨基酸分析等方面[9-11]。孫立等[12-13]用堿性蛋白酶Alcalase酶解紅花籽粕制備紅花籽抗氧化肽，通過超濾、凝膠過濾層析對產物進行分離純化，獲得抗氧化活性較強的紅花籽多肽，為利用紅花籽粕蛋白提供一定參考依據。

此次試驗在前期研究基礎上發現單酶酶解紅花籽粕效果一般[14-16]，故采用雙酶分步酶解工藝，以此來提高紅花籽粕的水解度和抗氧化性，為制備一種來源廣泛、無毒副作用的新型抗氧化劑提供技術參考。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

紅花籽，新疆產地；木瓜蛋白酶（Papain，2 400 U/mg）、胰蛋白酶（Parenzyme，2 500 U/mg）、中性蛋白酶（Bɑcillus subtilisneutral protease，150 U/mg），購自諾維信公司；三氯化鐵、鐵氰化鉀、30%過氧化氫、硫酸、硼酸、鹽酸、磷酸氫二鈉、無水乙醇、氫氧化鈉、酚酞、三氯乙酸、甲醛、堿性品紅、磷酸二氫鈉，鄭州萊博儀器設備有限公司；……