果蠅心臟發(fā)育標(biāo)記基因Svp的多克隆抗體制備

李玉玲，趙夢(mèng)婧，李瑞可，張亞楠，吳秀山，袁婺洲

（湖南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院心臟發(fā)育研究中心，長(zhǎng)沙 410081）

黑腹果蠅（Drosophilamelanogaster）是一種雙翅目昆蟲(chóng)，具有生活史短、繁殖迅速、易于人工飼養(yǎng)、染色體少、突變性狀多等優(yōu)點(diǎn)。作為一種常見(jiàn)的模式生物，果蠅在現(xiàn)代生態(tài)學(xué)、群體生物學(xué)、行為學(xué)、系統(tǒng)學(xué)、遺傳學(xué)、發(fā)育生物學(xué)和分子生物學(xué)等研究領(lǐng)域都被廣泛的應(yīng)用［1］，特別是在遺傳學(xué)、胚胎發(fā)育基因調(diào)控的研究中起著非常重要的作用。果蠅心臟發(fā)育過(guò)程與人類(lèi)的心臟發(fā)育過(guò)程及調(diào)控機(jī)制有著密切的關(guān)聯(lián)，研究果蠅心臟發(fā)育的調(diào)控機(jī)制能為認(rèn)識(shí)人類(lèi)先天性心臟病的發(fā)病機(jī)制和治療提供重要的線索［2-3］。

果蠅心臟位于胚胎背中線的表層下，呈線性管狀結(jié)構(gòu)，由具有收縮特性的心肌細(xì)胞和不能收縮的副心肌細(xì)胞組成［4-5］。Svp（seven-up）作為一種孤兒受體基因在類(lèi)固醇受體家族中存在，它與果蠅復(fù)眼中的光感受器細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞以及心臟前體細(xì)胞等細(xì)胞的分化存在聯(lián)系，并且Svp在心肌細(xì)胞和副心肌細(xì)胞中都具有一定的表達(dá)量［6-7］。果蠅Svp基因定位于染色體3R上，cDNA長(zhǎng)度為846 bp，編碼282個(gè)氨基酸，是心臟發(fā)育的一種標(biāo)記基因，但目前尚無(wú)用于科學(xué)研究的商用Svp抗體。本研究采用DNA免疫技術(shù)來(lái)快速制備Svp抗體，為研究心臟發(fā)育分子調(diào)控機(jī)制奠定基礎(chǔ)。

DNA免疫是指將編碼某種蛋白質(zhì)抗原的重組真核表達(dá)載體直接注射到動(dòng)物體肌肉、皮下或者腹腔等部位，利用宿主的轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)譯系統(tǒng)合成外源目標(biāo)蛋白抗原，從而誘導(dǎo)特異性的免疫應(yīng)答反應(yīng)［8-9］。……