分析流行性感冒病毒的微生物檢驗價值

武勝科

[摘要]目的：研究微生物檢驗在流行性感冒病毒檢測中的價值。方法：選取當地轄區醫院2019年4月至2020年4月前來就診的148例表現流行性感冒癥狀病人進行微生物檢驗。觀察檢驗結果。結果：經檢驗共100例患者確診，陽性率67.57%。結論：對流行性感冒患者進行微生物檢驗能有效檢出病原體，該檢驗方式具有顯著價值。

[關鍵詞]微生物檢驗;流行性感冒;流感病毒

[中圖分類號]R511.7;R446.5

[文獻標識碼]A

[文章編號]2096-5249（2021）24-0176-02

流行性感冒由流感病毒引起，該疾病在春季、冬季發病率較高。患者感染后表現出發熱、肌肉酸痛、全身無力、咳嗽等癥狀[1]。患者感染后3至14天內可自愈，但也有重癥病人生命受到威脅[2]。經微生物檢驗能夠明確致病原因，為此本研究通過微生物檢驗技術進行檢測，分析其價值。

1資料與方法

1.1一般資料選取當地轄區醫院2019年4月至2020年4月前來就診的148例表現流行性感冒癥狀病人為對象。男性70例，女性78例，年齡23-65歲，平均31.91±3.75歲。兩組基本資料具有可比性（P>0.05）。

1.2方法采集148例疑似患者咽拭子、鼻拭子等樣本，進行微生物檢驗。具體如下：（1）樣本處理：1在病人癥狀早期或者恢復階段采集血清樣本。采集份數兩份，樣本置于冰壺中保存以待檢測。48h內接種，若不能在規定時間內接種需將樣本置于低溫環境下保存。2生理鹽水處理棉拭子，將其放置5min。采集漱液，用無菌燒杯保存。3樣液充分震蕩后在4°C條件下靜置5至10min，使其沉淀。4樣液沉淀后取3ml上清液于燒杯中，添加青霉素以及鏈霉素。在4°C條件下靜置2h，準備接種。（2）培養：將病毒分離并進行培養。動物分離培養成本高，細胞、雞胚培養是最常見方法。1雞胚培養。將標本于羊膜腔、雞胚尿囊腔中進行接種，接種前需選擇日齡適當的接種物。孵育溫度控制在35°C，時間為2至3天。每天翻卵觀察孵育情況，頻率2次/d，若雞胚在2小時內死亡內死亡則應當放棄。孵育成功后收集羊水以及尿囊液，開展血凝試驗。若實驗結果為血凝陽性，利用特異性抗體開展抑制試驗。通過抑制試驗鑒別病毒的類型、亞型。若血凝試驗結果為陰性，需要再一次在雞胚中盲傳。2細胞培養。將標本于傳代狗、猴的腎細胞之以及原代人的胚腎中進行接種。于35°C條件下進行孵育，時間為10至14天。孵育期間每天觀察培養情況，有無病變出現。若病變出現應當開展血凝試驗。若無病變出現則將當每隔2小時進行檢測。若孵育時間周期內依然無病變出現應當開展盲傳一代。（3）病毒鑒定：在細胞聚集過程中，不同流行性感冒病毒經對其對應的紅細胞敏感。利用特異性抗體對血凝試驗為陽性結果的分離株進行抑制試驗。鑒別病毒的類型、亞型。

1.3觀察指標本研究觀察指標為微生物檢驗結果。記錄樣本檢出的陽性率，陽性率=陽性例數/總樣本數*100%。

1.4統計方法SPSS17.0軟件分析數據，率計數資料采用c2檢驗，并以率（%）表示，（P<0.05）表示數據差異明顯，有統計學意義。

2結果

經檢驗共100例患者確診，陽性率67.57%，具體結果如表1所示。

3討論

流行性感冒在春冬季節較為常見，該疾病任何年齡皆可見，幼兒、體質薄弱者感染風險較高。流感易控制，治療難度低，且多數病人可自愈，但重癥流感對病人的生命健康有危險隱患[3]。學齡前兒童是重癥流感危險人群，該疾病也是導致6個月以下嬰兒死亡的原因之一。此外老年患者、合并基礎疾病人群感染流感后病情加重，促進基礎疾病的發展。Frederick等人[4]通過實驗證實Alere試驗、Liat試驗均不能同時確保對甲流、乙流具有較高的敏感度，早期診斷有利于開展對癥治療。通過微生物檢驗能夠明確致病原因，流行性感冒病毒感染是引起流行性感冒的重要原因，飛沫傳播是流感病毒的主要傳播方式。飛沫中攜帶流感病毒，而其在空氣中能夠生存約30分鐘。當與病人處于同一環境或接觸其私人物品后流感病毒會從口鼻、眼睛黏膜處經呼吸系統進入人體。流感病毒侵犯呼吸道黏膜的上皮細胞，因此病人在感染后會表現出呼吸道反應。

流感病毒分A、B、C三種類型，A型病毒容易引起抗原性發生變異，B型病毒低致病性，通常不會造成流感大面積的暴發，C型病毒抗原性穩定，不會造成流感大面積的暴發，但嬰幼兒、免疫能力低下人群是患病高危人群[5]。流感病毒屬于RNA病毒。其具有包膜大多數呈球形。新分離流感病毒形態也可表現為絲狀。核心、基質蛋白以及外層包膜是病毒構成。核酸、核蛋白（NP）組成其核心。在其核心中存儲了病毒信息遺傳物、酶。病毒信息遺傳物為單鏈RNA，其節段中能夠編碼結構、功能蛋白。A型、B型、C型流感病毒中前兩種病毒的基因組可分成8個節段，而后者可分成7個節段。這一特征導致了病毒復制過程中發生基因重組的幾率較高，易產生新病毒株。此外不同亞型的病毒對同一細胞的敏感性存在差異，因此在微生物檢驗的病毒分離培養環節中培養結果會受到影響。NP包裹病毒RNA的每一個節段，其作為病毒衣殼表現為對稱的螺旋形狀。患者被流感病毒感染后臨床癥狀較多，以發熱、畏寒、肌肉酸痛、頭痛、咳嗽等癥狀為主。流感具有易傳染、發病率、治療難度低的特點。0至4°C條件下流行性感冒病毒存活時間較長，可達數周之久，為此春季、冬季為流感高發季。病毒在56°C條件下生存之間不超過30分鐘，耐熱性差，同時對紫外線較為敏感。而在-70°C的低溫環境中流行性感冒病毒能夠長期生存。患者在感染后癥狀表現的時間存在差異性，這是由于病人的免疫能力、身處環境以及侵入機體的病毒量影響潛伏期[6]。免疫能力低下的人群更容易患病且更容易表現出癥狀。病毒經呼吸道進入機體，會感染呼吸系統上皮細胞。在其進入機體后若免疫體系統不能及時分泌抑制物將其消滅將會引起細胞變形，使其進入臨近細胞并產生子代病毒，因此臨床中有部分病人腸粘膜遭受損傷。根據病人體質、病毒侵入量等潛伏期通常在1至4天，雖然流感疾病容易控制且治愈率高，但若發展為重癥、危重癥則將威脅生命，嬰幼兒、慢性基礎疾病、老年人等患病后風險更大。臨床中有大量關于微生物檢驗技術檢測流感病毒的研究，均證實該項技術的可靠性。韓志國等人[7]提出經微生物檢驗對病毒的分離培養的分離鑒定效果更好，該檢測技術優于PCR核酸檢測。同時通過微生物檢驗還能進行抗原性分析，為臨床治療提供了可靠的依據。邢軍華團隊[8]表明流感病人傳染性強，容易從呼吸道侵入，經微生物檢查能夠快速確診，對病人進行對癥治療。在邢軍華團隊研究中疑似病人經微生物檢驗陽性率高達67.86%。其團隊證實了微生物檢驗的價值。須注意的是機體在感染流感病毒后的排毒時間約為5天，感染后的半天至1天內排毒量達到最高[9]。因此病人在出現流行性感冒癥狀后應當早期進行診斷采集樣本，確保病毒存活率。同時采樣時間與收樣時間之間間隔過長會影響病毒的培養分離效果，因此醫院在采樣后應當及時培養，患者需要提高就診意識盡早到院檢查，提高診斷效率。

研究證實，對流行性感冒患者進行微生物檢驗能有效檢出病原體，確保患者早期確診，及時治療，該檢驗方式具有顯著價值。

參考文獻

[1]趙佩娟，蔡宏津.流行性感冒的快速診斷檢驗[J].感染控制雜志，2019，29（1）：23-28.

[2]韓志國，薛娜，樊旭成，等.流行性感冒病毒細胞培養陽性相關影響因素分析[J].微生物學免疫學進展，2018，46（02）：56-59.

[3]王旭，馬可佳，江云飛，等.流行性感冒病毒的微生物檢驗[J].中國衛生標準管理，2016，7（07）：157-158.

[4] Frederick， S， Nolte， et al. Direct Comparison of Alere i and cobas Liat Influenza A and B Tests for Rapid Detection of Influenza Virus Infection[J]. Journal of Clinical Microbiology， 2016， 54（1）： 2763- 2766.

[5]田鶴，張進強，郭家胤，等.2015年至2018年兒童流行性感冒樣疾病的病毒病原學監測[J].中華傳染病雜志，2020，38（08）：489-494.

[6] BruningAHL，LeeflangMMG，VosJMBW，etal.RapidTestsfor Influenza， Respiratory Syncytial Virus， and Other Respiratory Viruses： A Systematic Review and Meta-analysis[J]. Clinical Infectious Diseases An Official Publication of the Infectious Diseases Society of America， 2017， 8（6）： 6-6.

[7]劉述華.流行性感冒病毒的微生物檢驗[J].醫學信息，2013，26（08）：521-521.

[8]邢軍華，文蔚，尹明.流行性感冒病毒的微生物檢驗要點分析[J].中國繼續醫學教育，2020，12（19）：101-103.

[9]張麗杰，宋會榮.流行性感冒病毒的微生物檢驗要點分析[J].世界最新醫學信息文摘，2019，19（02）：161+168.