早期急性腦梗死患者血清MMP-9、S100水平與血腦屏障損傷相關性研究

黃文娟 張雯雯 岳嬋娟 程星 張俠 陳巍巍

221000徐州市中心醫院神經內科1，江蘇徐州

221000徐州市中心醫院檢驗科2，江蘇徐州

資料與方法

2019年1月-2020年2月收治急性腦梗死患者53 例，作為急性腦梗死組，男31 例，女22 例；年齡38～87 歲，平均(61.49±9.85)歲；所有患者均為首次發病，在發病12 h 內入院，按照第四屆全國腦血管病修訂診斷標準，經頭顱CT排除出血后入組。對照組為健康體檢者36例，男21 例，女15 例；年齡49～73歲，平均(61.61±10.48)歲；經神經系統及CT排查排除顱內病灶。急性腦梗死組脫落2例，均為男性患者。

脫落標準：①中途轉院或退出研究；②依從性差或不合作。

排除標準：①病情危重；②生命體征不穩定或昏迷狀態；③自身免疫系統和血液系統疾病；④代謝免疫性疾病；⑤惡性腫瘤；⑥心肝腎功能衰竭、感染等嚴重合并癥；⑦近期有手術或創傷、近3個月內有激素使用史及可能影響血清MMP9、S100、CRP、NSE水平的疾病。

方法：①標本采集：急性腦梗死患者于發病72 h 抽取晨起空腹靜脈血1次，對照組于體檢時采血1 次。靜脈血標本5 mL 采用抗凝管收集，4℃低溫離心機，2 500 r/min離心15 min，收集上清液，-80℃冰箱儲存，用于ELISA 檢測MMP9；S100、NSE、C 反應蛋白送至醫院檢驗科進行檢測。②頭顱CT檢查：全部入組患者均在入院當天及第10 天復查頭顱CT。應用Pullicino 公式：長×寬×CT 掃描陽性層數×π/6 計算梗死體積，梗死體積＜5 cm3為小面積梗死灶，5～10 cm3為中面積梗死灶，＞10 cm3為大面積梗死灶。③NIHSS 評分：在患者入院當天(發病后12 h內)進行NIHSS評分，主要通過意識水平、眼位、面癱、語言、肢體活動及感覺等方面。＜4分為輕度腦梗死，5～15 分為中度腦梗死，＞15 分為重度腦梗死。

統計學處理：數據應用SPSS 23.0 軟件處理；計數資料以[n(%)]表示，采用χ2檢驗；計量資料以(±s)表示，采用t檢驗；多樣本間兩兩比較采用單因素方差分析；P＜0.05為差異有統計學意義。

結果

兩組臨床資料及生化指標水平比較：急性腦梗死組年齡、性別、高血壓病、糖尿病、吸煙等情況與對照組比較，差異無統計學意義(P＞0.05)。急性腦梗死組HCY 水平顯著高于正常對照組，差異有統計學意義(P＜0.05)。見表1。

血腦屏障損傷程度與腦梗死嚴重程度的關系：按照NIHSS 評分將急性腦梗死組患者分為輕、中、重組。急性腦梗死組血清S100、MMP9 水平明顯高于對照組，差異有統計學意義(P＜0.05)。輕度組CRP、NSE 水平與對照組比較，差異無統計學意義(P＞0.05)。 S100、MMP9、CRP、NSE 隨著神經功能損害程度加重而逐漸升高，中度損傷組較輕度損傷組，重度損傷中較重度損傷組之間的S100、MMP9、CRP、NSE 水平均有明顯升高，差異有統計學意義(P＜0.05)。見表2。

血腦屏障與梗死面積的相關性：按照急性梗死組患者顱內梗死面積大小，將急性腦梗死患者分為小面積、中面積、大面積腦梗死。隨著急性腦梗死面積的增大，血清S100、MMP9、NSE水平逐漸升高，且各組間比較，差異有統計學意義(P＜0.05)。小面積組和中面積組CRP 無顯著差異，大面積組CRP 顯著高于中面積組和小面積組。見表3。

表1 兩組臨床資料及生化指標水平比較[(±s)，n(%)]

表1 兩組臨床資料及生化指標水平比較[(±s)，n(%)]

注：與對照組相比，?P＜0.05。

組別n平均年齡(歲)男女吸煙高血壓糖尿病血同型半胱氨酸(HCY)(μmol/L)對照組3661.61±10.48211513(36.11)22(61.11)11(30.56)10.00±3.90急性腦梗組5161.49±9.85292220(39.21)32(62.75)17(33.33)17.80±5.26?

表2 血腦屏障損傷程度與腦梗死嚴重程度的關系(±s)

表2 血腦屏障損傷程度與腦梗死嚴重程度的關系(±s)

注：與對照組相比，aP＜0.05；與輕度梗死組相比，bP＜0.05；與重度梗死組相比，cP＜0.05。

組別nS100MMP9NSECRP對照組3675.97±17.9921.84±8.097.05±2.756.44±3.27 NIHSS分級輕(＜4分)15119.97±25.52a117.58±17.08a7.37±2.986.72±2.86中(5～15分)23200.25±48.85ab165.35±17.68ab20.67±7.29b10.94±4.70b重(＞15分)13396.41±82.64abc217.23±22.44abc46.48±17.52bc43.14±33.76bc

表3 血腦屏障損傷與梗死面積相關性(±s)

表3 血腦屏障損傷與梗死面積相關性(±s)

注：與小面積組相比，aP＜0.05；與中面積組相比，bP＜0.05。

組別nNIHSSS100MMP9NSECRP＜5 cm3144.60±3.34136.71±33.62128.91±23.809.84±4.598.24±3.24 5～10 cm31912.22±8.92a215.50±121.37a158.87±34.93a20.42±12.34a8.71±4.80＞10 cm31820.50±9.46ab340.68±81.77ab205.95±37.08ab33.18±14.35ab33.72±31.12b

討論

急性腦梗死是由于多種原因引起的局部腦血液供應障礙，缺血、缺氧引起腦屏障破壞，中樞神經系統的免疫豁免地位隨之改變，大量免疫細胞滲透入腦實質，引起免疫相關反應，最終導致特殊的固有免疫和適應性免疫反應[1-2]。蛋白質在血液中含量豐富，它可以在疾病表現出可察覺的臨床癥狀之前，即出現可監測的變化。通過檢測血液指標中的MMP9、S100 觀察血腦屏障損傷水平，應用CRP 觀察血腦屏障破壞后中樞神經系統的炎性反應，通過檢測NSE 觀察炎性反應導致的神經元損傷情況。

血腦屏障是由毛細血管周圍星形膠質細胞足突，內皮細胞及其緊密連接的基膜、周細胞組成，起到維持中樞神經系統內環境穩定的作用[3-4]。急性腦梗死發病過程常伴隨著血腦屏障的破壞、受損腦組織中大量炎性細胞的產生、浸潤和聚集，炎性因子的分泌增多、黏附分子的表達上調等。強烈的炎癥反應可以導致急性腦梗死后繼發的腦組織損傷。急性腦梗死患者隨著梗死面積及受損程度的加重，CRP 水平呈逐漸上升趨勢，因此隨著血腦屏障受損加重，會造成更嚴重的炎性反應[5-6]。本試驗同步檢測NSE 水平，入組的急性腦梗死患者，輕度、中度、重度腦梗死組NSE水平呈上升趨勢，神經元隨著炎性反應損傷逐漸加重。