兒童肺炎支原體檢測方法應(yīng)用研究進(jìn)展

應(yīng)悅

【摘 要】兒童抵抗力較弱，而肺炎前期并無明顯癥狀，同時，肺炎易引起并發(fā)癥，導(dǎo)致兒童其他系統(tǒng)、器官遭到損害，使得兒童生命健康受到影響。鑒于醫(yī)者的職責(zé)是治病救人，而肺炎嚴(yán)重影響兒童生命健康，所以醫(yī)者需對兒童肺炎支原體進(jìn)行研究，并嘗試將檢測方法應(yīng)用于臨床診斷中。

【關(guān)鍵詞】兒童肺炎；支原體；檢測方法；應(yīng)用研究

Progress in application of detection methods for mycoplasma pneumoniae in children

Ying Yue

Lanxi Peoples Hospital， Zhejiang Lanxi， 321100

【Abstract】Childrens resistance is weak， and there are no obvious symptoms in the early stage of pneumonia. Meanwhile， pneumonia is easy to cause complications， resulting in damage to other systems and organs of children， which affects childrens life and health. Since the responsibility of doctors is to treat and save lives， and pneumonia seriously affects childrens lives and health， doctors need to study mycoplasma pneumoniae in children and try to apply detection methods to clinical diagnosis.

【Key？Words】childhood pneumonia； Mycoplasma； Detection method； Application research on

肺炎支原體將口、鼻分泌物當(dāng)做載體，通過空氣進(jìn)行傳播。一般來講，肺炎支原體可引起呼吸道感染，當(dāng)累及肺面時可引起肺炎。據(jù)調(diào)查，感染肺炎支原體常為青少年、兒童，而且患兒年齡越小，臨床表現(xiàn)越不明顯，診斷時間也越長。在無法確診的情況下，醫(yī)者會憑借自身經(jīng)驗開一些抗生素給患兒，但并未給予患兒及時有效的治療。由此可見，兒童肺炎支原體檢測方法的應(yīng)用對于臨床診斷而言有著重要作用[1]。但是，肺炎支原體檢測方法各有優(yōu)點與不足，想要進(jìn)行切實有效的檢測，需結(jié)合患兒臨床表現(xiàn)選擇一種或多種方法進(jìn)行檢測。

1 肺炎支原體概述

支原體隸屬于細(xì)胞形微生物，最大特征為具有較多形態(tài)，沒有細(xì)胞壁，因自身直徑小所以可以通過濾菌器，可通過人工培養(yǎng)基進(jìn)行培育、繁殖。因其構(gòu)成部分有三層，兩邊為蛋白質(zhì)，中間為脂質(zhì)，且形狀為分支狀、絲狀，所以被稱為支原體。支原體直徑多為0.2mm～0.3mm，且在自然界中存在較廣。據(jù)統(tǒng)計，自然界中共有60多種支原體。肺炎支原體雖為自然界中的一種支原體，但可引發(fā)人類疾病。

肺炎支原體并不是直接引起肺部感染，而是通過呼吸道感染對肺部造成破壞，引起局部組織損傷。具體來講，肺炎支原體基于接觸感染長于纖毛上皮間，通過抑制纖毛活動、對上皮細(xì)胞造成破壞、產(chǎn)生過氧化氫引起局部組織損傷。

2 兒童肺炎支原體檢測的重要性

2.1 于早期快速確診

支原體肺炎越拖越難治，因其可引發(fā)各種并發(fā)癥。而將肺炎支原體檢測方法應(yīng)用于臨床診斷中，可在患兒就診時快速確診，并采取相關(guān)治療措施進(jìn)行治療。

2.2 避免濫用抗生素

在未確診的情況下，多數(shù)醫(yī)者會為緩解兒童患病癥狀開一些抗生素，但濫用抗生素不僅無法進(jìn)行有效治療，還會引起不良反應(yīng)、使細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性。而應(yīng)用兒童肺炎支原體檢測方法，可避免抗生素的濫用。

2.3 減輕患兒家庭經(jīng)濟負(fù)擔(dān)

據(jù)調(diào)查，支原體肺炎拖的越久治療費用越高。而應(yīng)用肺炎支原體檢測方法，可及時給予有效質(zhì)量，可盡快使患兒恢復(fù)健康，可減輕患兒家庭經(jīng)濟負(fù)擔(dān)。

3 兒童肺炎支原體檢測方法

3.1 培養(yǎng)法

培養(yǎng)法簡單來說就是培育支原體，如果培養(yǎng)基與肺炎支原體形態(tài)相似，即形成“荷包蛋”狀細(xì)小菌落，便可確診為支原體。最初的培養(yǎng)法對培養(yǎng)基營養(yǎng)有著較高要求，且培養(yǎng)基生長速度較慢，常需一定培養(yǎng)時間，且陽性率極低，所以無法進(jìn)行臨床快速診斷。實驗室研究人員通過探究、實踐對培養(yǎng)法進(jìn)行了改良，快速液體培養(yǎng)法應(yīng)勢而生。這種培養(yǎng)法的原理是這樣的：將肺炎支原體生長期間的代謝產(chǎn)物利用起來，置于培養(yǎng)基液體中，使其進(jìn)行結(jié)合并改變指示劑顏色，然后根據(jù)顏色對肺炎支原體生長進(jìn)行判斷，而標(biāo)本中的其他支原體、細(xì)菌因培養(yǎng)基中加入青霉素、醋酸陀、生物抑菌劑而被抑制[2]。具體操作為：采集臨床疑似患兒的咽拭子、痰、胸腔積液、肺泡沖洗液，并選擇疑似菌落進(jìn)行肺炎支原體檢測。因MP培養(yǎng)法操作簡便，對實驗室條件并無太高要求，可明顯縮短培養(yǎng)時間，所以可應(yīng)用于臨床診斷中。但在應(yīng)用快速液體培養(yǎng)法進(jìn)行肺炎支原體檢測時，醫(yī)者需注意：念珠菌可影響診斷結(jié)果，為避免出現(xiàn)誤診誤治，醫(yī)者需同時進(jìn)行念珠菌培養(yǎng)。

3.2 免疫學(xué)檢測法

免疫學(xué)檢測法又被稱為血清學(xué)檢測法，即根據(jù)患兒血清情況進(jìn)行臨床診斷。

3.2.1 血清冷凝集試驗 血清冷凝集試驗是最早出現(xiàn)的一種檢測方法，因為兒童被肺炎支原體感染時會在一周后期或第二周前期出現(xiàn)血清冷凝集效價升高的現(xiàn)象。利用傳統(tǒng)血清檢測方法進(jìn)行檢測，可快速獲得結(jié)果。但醫(yī)者需注意，此種方法存在靈敏度不高、特異度不高等問題，所以不能作為確診指標(biāo)。

3.2.2 酶聯(lián)免疫吸附試驗 酶聯(lián)免疫吸附試驗是應(yīng)用最為廣泛的一種技術(shù)，其原理為：將載體表面的抗原進(jìn)行吸附，使其與血清中的相應(yīng)抗體進(jìn)行結(jié)合，進(jìn)而形成免疫復(fù)合物[3]。之后，將免疫復(fù)合物放入第二抗體，使其進(jìn)行結(jié)合，進(jìn)而發(fā)生免疫反應(yīng)，并借助酶所具備的降解作用進(jìn)行診斷。相較而言，這種檢測方法具有以下優(yōu)點：①操作簡單方便。②臨床易開展。③操作時間短。④對實驗室條件低。但檢測結(jié)果容易受患者年齡、基體免疫功能及試劑盒不同等影響，所以無法為肺炎支原體診斷提供有效依據(jù)。

3.2.3 明膠顆粒凝集法 明膠顆粒凝集法隸屬于間接凝集試驗。原理為：將病原體放置于粉色凝膠顆粒中，使其進(jìn)行結(jié)合，并根據(jù)試驗反應(yīng)進(jìn)行診斷。倘若血清標(biāo)本中含有抗體，那么試驗結(jié)果就會變成這樣：形成肉眼可見的粉紅色凝集。這種試驗方法的具體操作并不是很難，而且血清抗體呈現(xiàn)出特異度高特點，所以診斷結(jié)果的可靠性可以得到保障。因此，被應(yīng)用于支原體肺炎診斷常規(guī)檢測中。

3.3 基因檢測法

基因檢測法指的是對患兒的基因進(jìn)行檢測，根據(jù)患兒基因情況進(jìn)行臨床診斷。一般采用基因檢測法進(jìn)行檢測時，醫(yī)者需采集患兒的血液、細(xì)胞或者其他體液。就現(xiàn)代醫(yī)學(xué)而言，可應(yīng)用于肺炎支原體檢測的基因檢測法有四種，一是普通PCR，二是實時熒光PCR，三是套式PCR，四是反向斑點雜交法。利用基因檢測法進(jìn)行肺炎支原體檢測的操作流程如下：①獲取標(biāo)本。醫(yī)者需與患兒監(jiān)護(hù)人進(jìn)行交流，使患兒監(jiān)護(hù)人了解此檢測的意義、必要性，并在患兒監(jiān)護(hù)人同意后與患兒進(jìn)行溝通，使其配合標(biāo)本取樣。②獲取核酸。醫(yī)者需采取有效手段去除標(biāo)本中除核算外的雜質(zhì)，如：裂解劑、孵育、反復(fù)清洗、離心等。③PCR。利用PCR儀使標(biāo)本產(chǎn)生反應(yīng)，并對靶基因進(jìn)行擴增。④電泳。使擴增物質(zhì)進(jìn)行凝膠電泳，之后進(jìn)行有效檢測。倘若標(biāo)本中未存在靶基因，那么檢測結(jié)果為陰；倘若標(biāo)本中存在靶基因，那么檢測結(jié)果為陽。但基因檢測因操作復(fù)雜、所用設(shè)備昂貴，無法進(jìn)行廣泛應(yīng)用。

3.4 血小板衍生生長因子檢測法

血小板衍生生長因子指的是由血小板衍生的生長因子，常被稱為PDGF，由二聚體和染色體激酶肽結(jié)構(gòu)組成，分為AA、AB、BB、CC、DD5種亞型。血小板衍生生長因子是多種間質(zhì)細(xì)胞強促成的生長因子，包括絲分裂劑、生長因子、趨化因子。PDGF可趨化多種炎細(xì)胞、肺泡細(xì)胞，所以在檢測肺炎支原體方面有一定的優(yōu)勢。通過研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)患兒血清PDGF值為6000pg/ml時，檢測結(jié)果為陽性的概率為93.47%。也就是說，可將PDGF值為6000mg/ml作為鑒別診斷的基線值，對支原體肺炎及非支原體肺炎進(jìn)行有效區(qū)分[4]。

4 結(jié)語

綜上所述，培養(yǎng)法、免疫學(xué)檢測法、基因檢測法都是公認(rèn)的檢測支原體肺炎的方法。但是，每一種方法都有其優(yōu)勢、不足，且適用于不同時期，在實際檢測中，醫(yī)者需結(jié)合患兒情況、病情進(jìn)程選擇檢測手段。如此，才能避免漏診、誤診等問題發(fā)生，才能使診斷具有特異性，才能提高診斷靈敏度。

參考文獻(xiàn)

[ 1 ] 業(yè)曉青.兒童肺炎支原體檢測方法的研究進(jìn)展[J].中國實驗診斷學(xué)，2014（10）：1729-1731.

[2] 田婧，賈春梅.兒童肺炎支原體肺炎相關(guān)實驗室檢測的研究進(jìn)展[J].包頭醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2019，35（2）：131-132.

[3] 陳倩，王會中，郭燕菊，等.肺炎支原體實驗室檢測方法研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2014（16）：4.

[4] 張鳳花，李金星.兒童肺炎支原體抗體檢測方法的比較研究及分析[J].醫(yī)學(xué)檢驗與臨床，2015（2）：73-74.