一種改良的兔經胃給藥方法*

李彥錦 蔡賢華 豐瑞兵 陳 芳

(1. 湖北中醫藥大學針灸骨傷學院，武漢 430065)(2. 中國人民解放軍中部戰區總醫院，武漢 430070)(3. 武漢市中醫醫院，武漢 430014)

相對于小鼠、豚鼠等小型實驗動物，兔在進行灌胃操作時難度較大。傳統灌胃法雖然應用普遍[1]，但仍有諸多不足之處。例如，在使用張口器時，兔常劇烈反抗，造成嘴唇和牙齦受傷出血，甚至繼發感染。插入橡皮導管也常誤入氣管，甚至在個別兔并未觀察到管口兔毛擺動或氣泡逸出現象，但灌入藥液后仍誘發嗆咳并死亡。此外，該方法操作復雜，常需2～3個實驗員配合實施，整個操作需5～10 min，不利于大樣本實驗的批量操作。

作者在既往實驗中曾總結出一種兔經胃給藥方法[2]，能夠簡化操作流程、縮短操作時間，并顯示了極高的安全性和穩定性。簡述如下：助手將兔放入固定盒中固定并豎直抱起，實驗者左手持20 cm止血鉗維持兔嘴張開，右手經止血鉗間隙將灌胃針頭順著舌面滑入咽后壁根部，出現自然吞咽動作后伴隨吞咽動作將藥液經注射器緩緩推入。該方法以固定盒代替手抓固定法，并利用止血鉗與灌胃針代替張口器與橡膠軟管，簡化了操作流程，極大的降低了兔的不適感，但該方法在實際操作中存在諸多不足，如固定盒笨重、需雙人配合，且操作過程中兔往往因重力下墜常造成頸部卡頓甚至窒息，不得不中斷給藥后重復操作。因此，作者在實驗中進一步改進給藥方法，總結出一種單人即可完成的經胃給藥方法。

1 材料與方法

1.1 材料

16號灌胃針，10 mL注射器，生理鹽水。

1.2 實驗動物

成年兔，10～12月齡，質量3.2～3.8 kg，購自武漢萬千佳興生物科技有限公司，實驗動物生產許可證號：SCXK(鄂)2016-001。單籠飼養于中國人民解放軍中部戰區總醫院醫學實驗動物中心，溫度(22±1)℃、相對濕度45%、明暗交替12 h/12 h，適應性飼養2周后開始實驗，期間自由采食。所有實驗操作經中國人民解放軍中部戰區總醫院實驗倫理委員會批準。

1.3 操作方法

① 實驗者將兔夾在兩小腿之間，小腿肚固定兔髖部，膝部固定兔前肢腋下處，維持穩定，避免過度用力引起兔呼吸困難等不適。

② 左手拇指頂在兔頸后枕骨下，中指置于兔頸前，食指托抬下頜，固定兔頭部并維持頸部后伸，使口、咽、食道大致位于一條直線(圖1a)。

③ 右手持安裝16號灌胃針的注射器(注射器規格可根據給藥劑量調整)，灌胃針頭自兔右側嘴角齒根部進入(圖1b)，輕壓舌根后緩慢豎起注射器，保持與食道方向一致(圖1c)，沿咽后壁緩慢下滑，下針過程中應順暢無阻力，引起吞咽時停止進針，此時注射器根部距兔門齒約1 cm(圖1d、圖1e)。

④ 稍作停留確認兔無明顯不適后緩慢推注藥液，每次推注藥液控制在0.5～1 mL，中間略有停頓，使藥液伴隨吞咽動作進入食道和胃中，此時左手中指能觸及兔頸前明顯的吞咽動作，如此反復直至完成全部給藥。

圖1 一種改良的兔經胃給藥方法操作演示注：a.實驗者小腿和左手固定兔；b.灌胃針從右側嘴角進針；c.下針點操作圖; d、e.下針深度正、側位圖Fig.1 Demonstration of a modified transgastric administration for rabbitNote: a.Stabilizing the rabbit with lower legs;b.Placing the lavage needle from the right corner of the rabbit’s mouth;c. Erecting and placing the lavage needle along the root of tongue;d and e.Demonstration of the depth of the lavage needle

2 討論

2.1 改進之處

① 本方法單人即可完成操作。

② 操作效率明顯提升：整個給藥流程3～5 min即可完成。

③ 無需使用固定盒：本方法以雙側小腿和膝部固定兔髖部和腋下即可維持體位，前爪無需刻意固定，操作中兔少有劇烈反抗。

④ 無需止血鉗和張口器：止血鉗和張口器易引起兔反抗，損傷嘴唇和牙齦、甚至繼發感染，干擾實驗結果；本方法中實驗者左手能夠較好的固定頭部，右手僅使用灌胃針進行給藥，操作簡單易掌握，過程穩定，極少造成額外損傷。

2.2 不足之處

① 本方法主要依靠兔的吞咽動作使藥物進入食道和胃中，對于部分低溶解度藥物，易造成藥物在口咽部殘留。因此，作者常規在給藥完成后再灌入少量的清水或相關溶劑以利于藥物進入胃中。值得注意的是，兔嘔吐反射并不發達[3]，即使口咽部殘存少量藥物，后續仍可通過進食和飲水進入胃腸道吸收，對實驗結果的干擾有限。

② 小腿夾持兔時，可因兔后肢蹬踏劃傷實驗者，因此推薦隔一層布單或厚的塑料膜以避免實驗者受到意外傷害。

2.3 操作注意事項

① 左手食指托抬著力點在兔下頜骨正中偏左部位，中指位于頸前時應放松，避免用力壓迫氣道引起呼吸困難。

② 灌胃過程中應保持兔頭部后仰，使口、咽、食道大致位于一條直線，便于準確進針、下針。

③ 從右側嘴角進針后不要急于下針，應先順著嘴角滑到右側齒根部，輕壓舌根后緩慢豎起注射器，保持與食道方向一致(優勢手為左手者則改右手固定，從兔左側嘴角進針)。

④ 下針時應順暢無阻力，如有明顯阻力或兔以舌頭抵觸干擾進針，則應退回后重新進針。待下針到足夠深度后可感受到明顯吞咽動作，確認后即可給藥；若未感受到明顯吞咽動作，可試探性的推入少量藥液(0.1～0.2 mL)，中指感受到有吞咽且無咳嗆后再繼續推入藥液。

⑤ 應注意控制推藥速度，以每次推入0.5 mL較合適，期間應停頓，左手中指感受到吞咽動作后再進行下一次推藥，切忌過快給藥，造成兔吞咽不及，引起咳嗆或藥物溢出，影響實驗準確性。

⑥ 操作過程中若遇到兔劇烈反抗，應停止操作或退出針頭，稍作安撫后，再重新操作，切忌粗暴操作，造成兔驚嚇或損傷。

綜上所述，本方法是在課題組總結前期經驗基礎上，進一步改進，簡化操作，提高效率，總結出的一種改良的兔經胃給藥方法。該方案操作簡單易行、學習時間短、對兔傷害小、效率高、可單人完成，符合實驗動物“3R”原則[4-5]，有利于開展大樣本的批量給藥操作，是一種行之有效的兔實驗給藥方法。