CYP11B2、APOA5基因多態(tài)性與老年高血壓的關(guān)系

陳昭喆，簡(jiǎn)立國(guó)，宋亞輝，謝秀樂(lè)，張登科，馮 磊，彭 坤，康 銳

CYP11B2、APOA5基因多態(tài)性與老年高血壓的關(guān)系

陳昭喆1，簡(jiǎn)立國(guó)2，宋亞輝1，謝秀樂(lè)1，張登科1，馮 磊1，彭 坤1，康 銳1

摘要：目的探討醛固酮合成酶(CYP11B2)、載脂蛋白A5(APOA5)基因多態(tài)性與老年高血壓的關(guān)系。方法選取2017年2月—2019年2月在信陽(yáng)市中心醫(yī)院治療的老年高血壓病人200例(觀察組)，同時(shí)選取健康體檢者200名作為對(duì)照組，采用限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性聚合酶鏈反應(yīng)測(cè)定CYP11B2、APOA5基因多態(tài)性。結(jié)果兩組CYP11B2、APOAT5基因型分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，觀察組CYP11B2、APOAT5等位基因C比例分別為34.00%和33.75%，明顯高于對(duì)照組(P<0.05)；高血壓分級(jí)越高，病人CYP11B2、APOA5基因型CC+TC型比例越高(P<0.05)，其中高血壓分級(jí)3級(jí)病人CYP11B2、APOA5基因型CC+TC型比例分別為76.92%、78.85%，明顯高于高血壓分級(jí)1級(jí)和2級(jí)病人(P<0.05)。結(jié)論CYP11B2、APOA5基因多態(tài)性可能在老年高血壓發(fā)病過(guò)程中有重要作用。

關(guān)鍵詞：高血壓；醛固酮合成酶；載脂蛋白A5；基因多態(tài)性；老年

基金項(xiàng)目河南省醫(yī)學(xué)科技攻關(guān)計(jì)劃項(xiàng)目(No.201832569)

作者單位：1.信陽(yáng)市中心醫(yī)院/鄭州大學(xué)附屬信陽(yáng)醫(yī)院(河南信陽(yáng)464000)；2.鄭州大學(xué)第二附屬醫(yī)院

引用信息陳昭喆，簡(jiǎn)立國(guó)，宋亞輝，等.CYP11B2、APOA5基因多態(tài)性與老年高血壓的關(guān)系[J].中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志，2021，19(14)：2414-2416.

doi：10.12102/j.issn.1672-1349.2021.14.028

老年高血壓是指年齡高于65歲，血壓持續(xù)或非同日3次檢測(cè)超過(guò)標(biāo)準(zhǔn)血壓的病人[1]。本類高血壓病人由于機(jī)體老化，動(dòng)脈管壁彈性較小，其臨床特征以收縮壓上升，收縮壓與舒張壓差距明顯等為主[2]。老年高血壓發(fā)病機(jī)制除與病人機(jī)體老化有關(guān)外，還與遺傳、飲食、肥胖等因素有關(guān)。醛固酮是鹽皮質(zhì)激素的一種，可通過(guò)基因或非基因方式增強(qiáng)血管平滑肌細(xì)胞增殖、肥大，并參與血管重塑，醛固酮合成酶(CYP11B2)是醛固酮合成、裂解的重要調(diào)控因子；載脂蛋白A5(APOA5)可對(duì)血漿三酰甘油(TG)水平進(jìn)行調(diào)控，臨床研究發(fā)現(xiàn)，APOA5基因多態(tài)性與血脂代謝異常密切相關(guān)，并可因此引發(fā)高血壓、心臟病等[3]。為探討CYP11B2、APOA5基因多態(tài)性與老年高血壓的關(guān)系，本研究選取我院治療的200例老年高血壓病人進(jìn)行研究。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年2月—2019年2月在信陽(yáng)市中心醫(yī)院治療的老年高血壓病人200例(觀察組)，納入標(biāo)準(zhǔn)：①診斷符合世界衛(wèi)生組織(WHO)制定的高血壓診斷標(biāo)準(zhǔn)；②年齡≥60歲；③漢族；④病人及家屬知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：①繼發(fā)性高血壓；②合并有糖尿病、肝腎功不全、惡性腫瘤、免疫系統(tǒng)疾病、心臟病、甲狀腺疾病等其他疾病。同時(shí)選取健康體檢者200名作為對(duì)照組。兩組一般資料比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。詳見(jiàn)表1。

表1 兩組一般資料比較

1.2 方法 抽取研究對(duì)象靜脈血3 mL，置于抗凝試管內(nèi)冷藏備用，選用Trizol法提取血液DNA，選用瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行DNA濃度及純度檢測(cè)，選用美國(guó)菲力爾分子凝膠成像儀讀取結(jié)果。取4 μg樣本，在PubMed.SNP數(shù)據(jù)庫(kù)查詢CYP11B2、APOA5基因序列，并設(shè)計(jì)引物，CYP11B2正向引物：5′-AGAGCGGCATGAAGAAGGAGTG-3′，反向引物：5′-GAAATGGGAGAAGGTAGTGTCAAA-3′；APOA5正向引物：5′-GAAGAAACCTTAAGGAGTG-3′，反向引物：5′-AGGAGGTTCAAGGTCCTTC-3′。聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)反應(yīng)體系為：模板2 μL，正向/反向引物各1 μL，PCRmix 12 μL，滅菌雙蒸水9 μL。反應(yīng)條件為：95 ℃，10 min；94 ℃，45 s；63 ℃，40 s；72 ℃，45 s。共30個(gè)循環(huán)，對(duì)反應(yīng)產(chǎn)物進(jìn)行限制性酶切消化，并選用2.5%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)酶切產(chǎn)物，最終選用賽默飛EGel Imager凝膠成像系統(tǒng)讀取結(jié)果。

2 結(jié) 果

2.1 CYP11B2、APOA5基因型 根據(jù)Hae Ⅲ酶切片段結(jié)果，CYP11B2基因型分為CC、TT和CT型，詳見(jiàn)圖1；根據(jù)MseⅠ酶切片段結(jié)果，APOA5基因型分為CC、TT和TC型。詳見(jiàn)圖2。

圖1 CYP11B2基因電泳圖

圖2 APOA5基因電泳圖

2.2 兩組CYP11B2、APOA5基因多態(tài)性比較 兩組CYP11B2、APOA5基因型分布符合Hardy-Weinberg遺傳平衡(P>0.05)；兩組CYP11B2、APOA5基因型分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，觀察組CYP11B2、APOA5等位基因C比例明顯高于對(duì)照組(P<0.05)。詳見(jiàn)表2、表3。

表2 兩組CYP11B2基因型和等位基因比較 單位：例(%)

表3 兩組APOA5基因型和等位基因比較 單位：例(%)

2.3 觀察組不同高血壓分級(jí)病人CYP11B2、APOA5基因多態(tài)性分析 高血壓分級(jí)越高，病人CYP11B2、APOA基因型CC+TC型比例越高(P<0.05)，其中高血壓分級(jí)3級(jí)病人CYP11B2、APOA5基因型CC+TC型比例明顯高于高血壓分級(jí)1級(jí)和2級(jí)病人(P<0.05)。詳見(jiàn)表4。

表4 觀察組不同高血壓分級(jí)病人CYP11B2、APOA5基因多態(tài)性分析 單位：例(%)

3 討 論

醛固酮可與心臟鹽皮質(zhì)激素受體反應(yīng)，誘導(dǎo)膠原蛋白及心肌成纖維細(xì)胞增殖，最終引起心室結(jié)構(gòu)改變，導(dǎo)致室壁增厚[4]。醛固酮還可影響人體血鉀濃度，并促使血管緊張素Ⅱ高表達(dá)，影響血管結(jié)構(gòu)。有研究發(fā)現(xiàn)，醛固酮可促進(jìn)血管內(nèi)中膜增厚，并參與血管重構(gòu)[5]。CYP11B2是細(xì)胞氧化酶家族成員之一，是醛固酮合成的重要參與酶。CYP11B2主要表達(dá)于腎上腺皮質(zhì)內(nèi)，其基因位于人8q22染色體上，含有8個(gè)內(nèi)含子、9個(gè)外顯子[6]。CYP11B2具有兩種變異基因，一種是轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合位點(diǎn)，其突變體現(xiàn)為胸腺嘧啶及胞嘧啶的變換；另一種變異則與第二內(nèi)含子內(nèi)大部分基因被其同源基因代替，最終導(dǎo)致CYP11B2從野生型向轉(zhuǎn)換型轉(zhuǎn)變[7-8]。對(duì)于CYP11B2基因多態(tài)性與高血壓間的聯(lián)系，臨床還存在一定爭(zhēng)議。有研究認(rèn)為，男性人群CYP11B2 CC基因型可促進(jìn)其醛固酮水平上升，并且高于CYP11B2 TT及TC型基因；而女性人群CYP11B2 344TC位點(diǎn)基因多態(tài)性與其血清醛固酮水平并無(wú)聯(lián)系[9]。還有研究發(fā)現(xiàn)，原發(fā)性高血壓與CYP11B2 344CT等位基因多態(tài)性密切相關(guān)[10]。本研究中，兩組CYP11B2基因型分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，并且觀察組CYP11B2等位基因C比例為34.00%，明顯高于對(duì)照組(14.00%)，表明CYP11B2 C型(CC型+TC型)等位基因是老年高血壓的影響因素，其原因可能為CYP11B2的344TC位點(diǎn)變異可促使機(jī)體醛固酮異常表達(dá)，并引發(fā)相關(guān)疾病。但對(duì)于性別與CYP11B2 C型基因及高血壓間的聯(lián)系如何，尚無(wú)結(jié)論，這有待進(jìn)一步的研究。本研究結(jié)果顯示，高血壓分級(jí)越高，病人CYP11B2基因型CC+TC型比例越高，其中高血壓分級(jí)3級(jí)病人CYP11B2基因型CC+TC型比例為76.92%，明顯高于高血壓分級(jí)1級(jí)和2級(jí)病人，這也表明CYP11B2基因型CC+TC型是老年高血壓的危險(xiǎn)因素，并且與病人疾病進(jìn)展密切相關(guān)。

APOA5是脂類運(yùn)轉(zhuǎn)的重要介質(zhì)，可調(diào)整脂蛋白代謝相關(guān)酶表達(dá)，并影響機(jī)體脂質(zhì)代謝。大量研究顯示，血脂異常是多種心血管疾病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素[11-12]。有研究發(fā)現(xiàn)，小鼠APOA5基因過(guò)度表達(dá)時(shí)，其血漿膽固醇濃度顯著下降，其原因可能與APOA5異常表達(dá)導(dǎo)致血漿脂蛋白水平下降，脂蛋白內(nèi)的膽固醇濃度也隨之下降[13]。1131位點(diǎn)是APOA5基因的第4個(gè)外顯子的突變點(diǎn)，與血漿三酰甘油(TG)水平密切相關(guān)[14]。本研究中，兩組APOA5基因型分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，觀察組APOA5等位基因C比例明顯高于對(duì)照組(P<0.05)，表明APOA5等位基因C型多態(tài)性與老年高血壓密切相關(guān)，其原因可能為：APOA5基因1131位點(diǎn)多態(tài)性與高血壓密切相關(guān)，CC純合子可能具有高血壓保護(hù)功能，當(dāng)1131基因位點(diǎn)出現(xiàn)C堿基與T堿基變換時(shí)，CC純合子的保護(hù)作用將失去，病人高血壓發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)上升[15]。隨后的研究發(fā)現(xiàn)，高血壓分級(jí)越高，病人APOA5基因型CC+TC型比例越高，其中，高血壓分級(jí)3級(jí)病人APOA5基因型CC+TC型比例明顯高于高血壓分級(jí)1級(jí)和2級(jí)病人，表明APOA5等位基因CC+TC型還與高血壓疾病嚴(yán)重程度相關(guān)。

本研究發(fā)現(xiàn)CYP11B2、APOA5等位基因C型多態(tài)性與老年高血壓密切相關(guān)，同時(shí)還與病人疾病嚴(yán)重程度相關(guān)，臨床或可通過(guò)檢測(cè)CYP11B2、APOA5基因多態(tài)性來(lái)診斷老年高血壓，并評(píng)估其疾病嚴(yán)重程度。受限客觀條件，本研究還存在一定不足，如尚未明確性別與CYP11B2 C型基因及高血壓間的聯(lián)系。

綜上所述，CYP11B2、APOA5基因多態(tài)性可能在老年高血壓發(fā)病過(guò)程中有重要作用。

(收稿日期：2020-03-01)

(本文編輯 王麗)