VEGF 和突變型p53 在胃癌組織中的表達及臨床診斷價值

陳寧

我國是胃癌高發國家,胃癌發病率約為國外的3倍。2013 年全世界的胃癌新發數目為95.2 萬,而中國就有44.7 萬。胃癌的預后差,死亡率居全部惡性腫瘤的第2 位,而其中的原因與胃癌早期檢出率低有很大關系,很多患者確診時都已進入中晚期。據報道,我國早期胃癌的檢出率僅徘徊在10%［1］。目前尋找有效的胃癌標志物是幫助人們早期發現胃癌的重要策略。VEGF 是目前所發現的促血管生成功能最強的因子,對腫瘤的生長、浸潤及轉移具有重要作用。近年研究表明,p53 缺失或突變可誘發細胞的惡性轉化,具有致癌性,mtp53在很多惡性腫瘤的發生發展中扮演了重要角色［2］。本研結果旨在探討VEGF 和mtp53 在胃癌組織中的表達情況及臨床診斷價值,報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2017 年6 月～2018 年12 月本院37 份胃癌組織標本與30 份正常胃組織標本,胃癌患者均經手術治療、病理檢查證實。胃癌患者術前均未接受過放、化療及免疫治療。所有標本一經離體,即經福爾馬林固定,并包埋入石蠟,4 μm 連續切片,備用。

1.2 方法 采用免疫組化SP 法檢測標本中VEGF 和mtp53 表達情況,檢測試劑盒及試劑包括SP 試劑盒(福州邁新生物技術開發有限公司)、兔抗人VEGF 單克隆抗體(Poteintech Group)、鼠抗人mtp53 單克隆抗體(北京中杉金橋生物技術有限公司)。操作按試劑盒說明進行,包括脫蠟、水化,高壓抗原修復,3% H2O2孵育,山羊血清封閉,滴加一抗室溫孵育1 h,二抗室溫孵育0.5 h,二氨基聯苯胺(DAB)顯色,蘇木素復染,鹽酸乙醇分化,脫水、二甲苯透明、封片等操作。結果判定：由兩位觀察者采用雙盲法對結果進行判定,顯微鏡400 倍視野下,20 個視野,VEGF 為細胞質或細胞膜染色,表皮生長因子受體(EGFR)為細胞核染色,計數500～1000 個細胞中的陽性細胞,陽性細胞數所占的比例為0～5%為(-),占6%～25%為(+),占26%～50%為(++),＞50%為(+++)。

1.3 觀察指標 記錄受試胃癌組織標本與正常胃組織標本的VEGF 和mtp53 表達陽性情況及VEGF、mtp53在低分化、中高分化胃癌,有淋巴結轉移、無淋巴結轉移,胃癌浸潤漿膜及以外、浸潤未及漿膜中的表達陽性率。

1.4 統計學方法 采用SPSS18.0 統計學軟件處理數據。計數資料以率(%)表示,采用χ2檢驗。P＜0.05 表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 VEGF和mtp53在不同胃組織中的表達比較 VEGF和mtp53 在胃癌組織的表達陽性率均高于正常組織,差異具有統計學意義(P＜0.05)。見表1。

表1 VEGF 和mtp53 在不同胃組織中的表達比較 ［n(%)］

2.2 VEGF 和mtp53 在胃癌不同臨床病理特征中的表達比較 VEGF 在浸潤未及漿膜、浸潤漿膜及以外中的表達陽性率分別為50.0%(8/16)、52.4%(11/21),在中高分化、低分化中的表達陽性率分別為34.5%(10/29)、75.0%(6/8),在有淋巴結轉移、無淋巴結轉移中的表達陽性率分別為76.5%(13/17)、40.0%(8/20),VEGF 在低分化胃癌中的表達陽性率高于中高分化胃癌,在有淋巴結轉移中的表達陽性率高于無淋巴結轉移,差異具有統計學意義(χ2=4.194、4.980,P=0.041、0.026＜0.05)。mtp53 在浸潤未及漿膜、浸潤漿膜及以外中的表達陽性率分別為37.5%(6/16)、76.2%(16/21),在中高分化、低分化中的表達陽性率分別為62.1%(18/29)、50.0%(4/8),在有淋巴結轉移、無淋巴結轉移中的表達陽性率分別為82.4%(14/17)、45.0%(9/20),mtp53 在胃癌浸潤漿膜及以外中的表達陽性率高于胃癌浸潤未及漿膜,在有淋巴結轉移中的表達陽性率高于無淋巴結轉移,差異具有統計學意義(χ2=5.639、5.451,P=0.018、0.020＜0.05)。

3 討論

胃癌是一種基因病,在正常胃黏膜→腸上皮化生→胃腸黏膜不典型增生→胃癌的這個過程中,都存在著多種致癌基因與抑癌基因的特征性的表達差異。結合臨床工作發現,胃癌患病率一直呈遞增發病趨勢,疾病發生與生活環境、幽門螺桿菌感染、遺傳、基因等因素有關,且患病人群集中在＞40 歲人群,患者有上腹疼痛不適、食欲下降、消瘦等常見癥狀表現。近些年,分子生物學研究技術的不斷發展使更多的胃癌相關基因及其蛋白質產物得以被發現,在胃癌的早期診治與評估預后方面顯示出了廣闊的前景［3］。

胃癌細胞可通過自分泌與旁分泌產生多種生長因子,VEGF 是一種能夠引起血管生長特異分裂的誘導因子,能夠強效促進血管內皮細胞分裂,使更多的新生血管生成,同時還能夠通過調節血管與淋巴管生成改變血管的通透性,從而為腫瘤細胞的生長、侵襲及轉移提供有力條件。既往研究表明,VEGF 在胃癌組織中的陽性率顯著提高［4］,本研究亦再次顯示,VEGF 在胃癌組織的表達陽性率分別為51.4%,明顯高于正常組織的6.7%,差異有統計學意義(P＜0.05)。與既往研究相符［5］。VEGF 與胃癌的惡性程度呈正相關,本研究結果顯示,VEGF 在低分化胃癌與有淋巴結轉移中的表達陽性率明顯高于中高分化胃癌和無淋巴結轉移,差異有統計學意義(P＜0.05)。也證明VEGF 的表達與胃癌的生物學行為相關,能夠一定程度上預測胃癌的惡性程度。

p53 基因位于 17 號染色體短臂,包括具有抑癌效應的野生型p53 和具有致癌效應的mtp53。野生型p53可干擾腫瘤DNA 復制,而mtp53 喪失了修復細胞的功能,可促進細胞惡向轉變。既往研究表明,即使在腸上皮化生和胃腸黏膜不典型增生中也能檢出mtp53,提示mtp53 的表達先于胃癌的發生。mtp53 的表達上調可存在于胃癌各臨床分期中［6］。本研究結果顯示,mtp53在胃癌組織的表達陽性率明顯高于正常組織。研究表明,mtp53 與腫瘤大小、浸潤深度及遠處轉移密切相關［7］。但是也有研究表明,mtp53 與胃癌的臨床病理特征無顯著關系［8］。本研究結果顯示,mtp53 在胃癌浸潤漿膜及以外與有淋巴結轉移中的表達陽性率明顯高于胃癌浸潤未及漿膜和無淋巴結轉移,差異有統計學意義(P＜0.05)。提示mtp53 對胃癌的診斷有價值,并有助于預測胃癌的惡性程度。

綜上所述,VEGF和mtp53在胃癌組織呈過度表達,且與胃癌的臨床病理特征有一定的相關性,對胃癌具有輔助診斷價值。